抗Jo-1抗體針對的是組氨酸t(yī)RNA合成酶（HRS）的反應(yīng)位點(diǎn)，HRS是一種屬于氨酰轉(zhuǎn)移酶組的細(xì)胞質(zhì)酶。這些酶負(fù)責(zé)將相應(yīng)的氨基酸（對于HRS來說是組氨酸）與其相應(yīng)的轉(zhuǎn)移RNA連接起來。HRS在細(xì)胞中以同源二聚體的形式存在，其大約50 kDa的相同亞基每個(gè)都與tRNA結(jié)合。測量抗Jo-1抗體對于研究多發(fā)性肌炎或皮肌炎是有用的。

抗Jo-1 ELISA是一種固相酶免疫分析，使用重組人組氨酸t(yī)RNA合成酶（HRS）來定量和定性檢測人血清中針對Jo-1的抗體。含有抗Jo-1抗體的人血清僅識別高等真核生物的HRS，并與人酶具有最高的親和力。

作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品抗Jo-1 IgG ELISA。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

抗Jo-1 IgG ELISA檢測原理：

將1:101稀釋的血清樣本孵育在涂有特定抗原的微孔板中。

樣本中存在的抗體會與抗原結(jié)合。未結(jié)合的部分在隨后的步驟中被洗掉。

然后孵育與辣根過氧化物酶結(jié)合的抗人免疫球蛋白（結(jié)合物），并與微孔板中樣本的抗原-抗體復(fù)合物發(fā)生反應(yīng)。

未結(jié)合的結(jié)合物在隨后的步驟中被洗掉。

添加TMB底物會產(chǎn)生一種酶促比色（藍(lán)色）反應(yīng)，這種反應(yīng)通過停止液（稀釋酸）停止，顏色變?yōu)辄S色。

色素產(chǎn)生的色度強(qiáng)度是與抗原-抗體復(fù)合物結(jié)合的結(jié)合物數(shù)量的函數(shù)，這與樣本中相應(yīng)抗體的初始濃度成正比。

使用通用指南

- 如果產(chǎn)品信息，包括標(biāo)簽，有缺陷或錯(cuò)誤，請與ALPCO聯(lián)系。

- 不要混合或替換不同批號的試劑或微孔板。這可能會導(dǎo)致結(jié)果變化。

- 使用前讓所有組分達(dá)到室溫（20-32°C/68-89.6°F），充分混合并遵循推薦的孵育方案，以獲得最佳測試性能。

- 孵育：建議在30°C/86°F下運(yùn)行自動(dòng)化測試系統(tǒng)。

- 永遠(yuǎn)不要將組分暴露在高于37°C/98.6°F的溫度下。

- 永遠(yuǎn)只使用全新的吸頭吸取底物溶液。保護(hù)這種試劑免受光線照射。永遠(yuǎn)不要使用之前與其他試劑接觸過的吸頭吸取結(jié)合物。

樣本收集、處理和儲存

最好使用新鮮收集的血清樣本。采血必須遵循國家要求。不要使用黃疸、脂血、溶血或細(xì)菌污染的樣本。含有顆粒的血清應(yīng)通過低速離心（<1000 xg）清除。血液樣本應(yīng)收集在干凈、干燥和空的試管中。

分離后，血清樣本應(yīng)在首次8小時(shí)內(nèi)使用，或在2-8°C/35-46°F下緊密封閉保存長達(dá)48小時(shí)（2天），或在-20°C/-4°F下冷凍保存更長時(shí)間。

試劑：

稀釋濃縮試劑：

- 將濃縮樣本緩沖液1:5稀釋蒸餾水（例如，20 mL加80 mL）。

- 將濃縮洗滌緩沖液1:5稀釋蒸餾水（例如，20 mL加980 mL）。

- 建議標(biāo)記不同校準(zhǔn)液的瓶蓋，以避免錯(cuò)誤。

樣本：

用樣本緩沖液（1x）將血清樣本稀釋1:101

例如，1000 ?L樣本緩沖液（1x）+ 10 ?L血清。充分混合！

洗滌：

每8個(gè)孔準(zhǔn)備20 mL稀釋洗滌緩沖液（1x），或96個(gè)孔準(zhǔn)備200 mL

例如，4 mL濃縮液加196 mL蒸餾水。

自動(dòng)化洗滌：

考慮設(shè)置儀器和機(jī)器人移液器死體積所需的額外體積。

手動(dòng)洗滌：

將孔中的液體倒出并倒置微孔板。將微孔框架在帶有孔的干凈吸收紙上劇烈敲擊。向每個(gè)孔中吸取300 ?L稀釋洗滌緩沖液，等待20秒。再次重復(fù)整個(gè)程序兩次。

微孔板：

計(jì)算檢測運(yùn)行所需的孔數(shù)。從框架中移除未使用的孔，放回提供的塑料袋中，與干燥劑一起，緊密密封（2-8°C/35-46°F）。

文獻(xiàn)參考：

1. Nishikai and Reichlin (1980). Heterogeneity of precipitating antibodies in polymyositis and dermatomyositis. Characterization of the Jo-1 antibody system. Arthritis Rheum 23: 881-888.

2. Love LA, Leff RL, Fraser DD, Targoff IN, Dalakas M, Plotz PH, Miller FW (1991). A new approach to the classification of idiopathic inflammatory myopathy: myositis-specific autoantibodies define useful homogeneous patient groups. Medicine (Baltimore) 70: 360- 374.

3. Miller FW, Twitty SA, Biswas T, Plotz PH (1990a). Origin and regulation of a disease-specific autoantibody response. Antigenic epitopes, spectro type stability and isotype restriction of anti-Jo-1 autoantibodies. J Clin Invest 85: 468-475.

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學(xué)、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能、腸胃病學(xué)、免疫學(xué)、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個(gè)研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長。

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