DIAsource Free 25OH維生素D ELISA是一種體外診斷醫(yī)療器械，旨在供醫(yī)療保健專業(yè)人員使用用于定量測定人血清中游離的25OH維生素D，可用于篩查和監(jiān)測目的。

作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品游離25OH維生素D ELISA, 96孔。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

游離25OH維生素D ELISA, 96孔檢測原理：

游離25OH維生素D ELISA基于在微孔板中進行的兩步免疫測定程序。在第一次孵育步驟中，游離的25OH維生素D[25(OH)維生素D2和D3]與微孔板孔中涂覆的抗維生素D抗體結(jié)合。體內(nèi)游離和結(jié)合的25OH維生素D之間的平衡受到最小的干擾。洗滌后，向每個孔中加入固定量的生物素標(biāo)記的25OH維生素D。通過洗滌去除未結(jié)合的生物素標(biāo)記的25OH維生素D，然后加入鏈霉親和素過氧化物酶結(jié)合物。在下一步中加入TMB顯色底物。最后，通過加入停止試劑來停止反應(yīng)，并使用板式分光光度計測量吸光度[A450nm]。樣本中游離25OH維生素D（pg/ml）的濃度與每個樣本孔中的吸光度成反比。

未提供的耗材

以下材料需要使用，但試劑盒中未提供：

A. 蒸餾水

B. 校準(zhǔn)為遞送的移液管：10 ?l, 35 ?l - 250 ?l, 3500 ?l - 5000 ?l（推薦使用帶有一次性塑料吸頭的精確移液管）。

C. 渦旋混合器

D. 37°C、650 rpm的板式搖床孵化器

E. 微孔板洗滌器

F. 能夠讀取450 nm和650 nm（雙色讀數(shù)）的微孔板讀取器

試劑準(zhǔn)備

使用前至少30分鐘將所有試劑放置在室溫（18-25°C）下。

A. 校準(zhǔn)品：用250 ?l蒸餾水重組校準(zhǔn)品，讓它們在室溫（18-25°C）下靜置15分鐘。重組后，充分混合，確保所有凍干物料都已重組。

B. 對照品：用250 ?l蒸餾水重組對照品。讓它們在室溫（18-25°C）下靜置15分鐘。重組后，充分混合，確保所有凍干物料都已重組。

C. 工作洗滌液：根據(jù)使用的條數(shù)，將1片洗滌緩沖片溶解在500 ml蒸餾水中，或2片洗滌緩沖片溶解在1L蒸餾水中。確保所有鹽晶體都已溶解。

D. 工作生物素-維生素D溶液：根據(jù)使用的條數(shù)，將100倍濃縮的生物素-維生素D試劑與生物素-維生素D稀釋液混合，以制備適量的工作稀釋液，如下表所示：例如，對于6條（48孔）：將60 ?l 100倍濃縮的生物素-維生素D試劑加入6.0 ml生物素-維生素D稀釋液中。

使用適當(dāng)?shù)木郾┤萜鬟M行配制。

生物素-維生素D溶液的配制不穩(wěn)定，如果沒有使用必須丟棄。

文獻參考：

1. BOUILLON R. (2016), Free 25-hydroxyvitamin D: impact of vitamin D binding protein assays on racial genotypic associations, JCEM,http://dx.doi.org/10.1210/jc.2016-1104.

2. SOLLID S.T. (2016), Effects of vitamin D binding protein phenotypes and vitamin D supplementation on serum total 25(OH) D and directly measured free 25(OH)D, Eur. J. Endocrinol. April 1, 174:445-452.

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4. ALOIA J. (2015), Free 25(OH)D and the Vitamin D Paradox in African Americans, J. Clin. Endocrinol. Metab. 2015 Jul 10:JC20152066.

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6. BIKLE D. (2013), Variability in free 25(OH) vitamin D levels in clinical populations, J. Steroid Biochem. Mol. Biol., S09600760.

7. BIKLE D., Gee E, Halloran B, Haddad JG. Free 1,25-dihydroxyvitamin D levels in serum from normal subjects, pregnant subjects, and subjects with liver disease. J Clin Invest 1984;74:1966–71.

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ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學(xué)、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能、腸胃病學(xué)、免疫學(xué)、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長。

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