IgG檢測試劑盒是一種高靈敏度的雙位點酶聯(lián)免疫測定法（ELISA），用于定量猴血漿和血清樣本中免疫球蛋白G（IgG）的測定。用于研究僅限使用。不用于診斷程序。

作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品猴子IgG ELISA試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

猴子IgG ELISA試劑盒檢測原理：

雙抗體夾心ELISA的原理如圖1所示。在此檢測中，樣品中的IgG與已吸附在聚苯乙烯微量滴定孔表面的抗IgG抗體發(fā)生反應。去除未結合的蛋白質(zhì)后，加入與辣根過氧化物酶（HRP）結合的抗IgG抗體。這些酶標記的抗體與先前結合的IgG形成復合物。在另一步洗滌后，通過添加顯色底物3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）來測定結合到免疫吸附劑上的酶。結合的酶的數(shù)量與被測試樣品中IgG的濃度成正比；因此，在450 nm處的吸光度可以作為被測試樣品中IgG濃度的測量。測試樣品中IgG的數(shù)量可以通過從標準曲線中推算得到，該標準曲線是根據(jù)標準品構建并校正樣品稀釋度得出的。

所需材料但未提供

精密移液器（2 ?L至1000 ?L），用于稀釋和分配。

試管。

噴瓶或微孔板清洗/吸液器。

蒸餾水或去離子水。

微孔板讀數(shù)儀。

各種玻璃器皿，用于制備試劑和緩沖溶液。

定時器。

抗凝劑（用于血漿樣本收集）。

離心機。

樣本收集和處理

所有血液成分和生物材料應視為潛在危險物質(zhì)。處理和處置時應遵循通用預防措施。

如果血樣發(fā)生了凝塊、嚴重溶血、脂血癥，或樣本的完整性受到懷疑，請記錄并謹慎解讀結果。

下面列出的樣本收集和儲存條件僅作為一般指導。樣本穩(wěn)定性尚未評估。

血清樣本：應通過靜脈穿刺收集血液。血液凝固后，通過離心分離血清與細胞。去除血清后立即檢測，或分裝并在-80°C（優(yōu)先）或-20°C下儲存。避免反復凍融循環(huán)。

血漿樣本：應將血液收集到含有抗凝劑的容器中，然后進行離心。立即檢測，或分裝并在-80°C（優(yōu)先）或-20°C下儲存。避免反復凍融循環(huán)。

已知干擾物質(zhì)：濃度高于0.1%的疊氮和硫柳汞會抑制酶反應。

樣本稀釋

檢測要求在使用前對每個測試樣本進行稀釋。每次進行檢測時，應對所有樣本進行重復檢測。推薦的稀釋倍數(shù)僅供參考。稀釋應基于未知樣本的預期濃度，以確保稀釋后的樣本落在標準曲線的動態(tài)范圍內(nèi)。如果不確定樣本值，強烈建議在測試整個板之前對一個或兩個代表性樣本進行系列稀釋檢測。

血清和血漿樣本 - 推薦的起始稀釋倍數(shù)為1:80,000。要制備1:80,000的稀釋液，將2 ?L的樣本轉(zhuǎn)移到1,998 ?L的1X稀釋液中，這樣得到1:1,000的稀釋液。接下來，將1:1,000的稀釋液通過將10 ?L轉(zhuǎn)移到790 ?L的1X稀釋液中，再稀釋，得到1:80,000的稀釋液。每個階段都要徹底混合。

試劑準備

使用前，將所有試劑置于室溫（16°C至25°C）。

稀釋液濃縮液 - 提供的稀釋液為5X濃縮液，必須用蒸餾水或去離子水稀釋1:5（1份緩沖濃縮液，4份去離子水）。

清洗溶液濃縮液 - 提供的清洗溶液為20X濃縮液，必須用蒸餾水或去離子水稀釋1:20（1份緩沖濃縮液，19份去離子水）。存儲溫度過低時，濃縮液中可能會出現(xiàn)結晶。在稀釋之前，將濃縮液加熱到30-35°C可以溶解結晶。

酶-抗體結合物 - 通過將10 ?L酶-抗體結合物加入990 ?L的1X稀釋液中，為每個微孔板測試條計算所需的工作結合物溶液量。使用前立即稀釋，并避免光照。均勻混合，但要輕柔，避免起泡。

預涂ELISA微孔板 - 可直接使用。撕開鋁箔袋并從袋中取出板。去除所有不在檢測中的條和孔，并將其放回袋中，重新封口并與干燥劑一起保存。

IgG標準品 - 根據(jù)特定批次的分析證書準備。

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應激、細胞因子與信號轉(zhuǎn)導、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領域見長。

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