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ALPCO 大鼠高范圍胰島素ELISA試劑盒檢測原理&程序說明

發(fā)布者:艾美捷科技    發(fā)布時間:2024-09-14     
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ALPCO大鼠高量程胰島素ELISA用于定量測定大鼠血清和血漿中的胰島素。僅供研究使用。不用于診斷程序。


作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理,艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品大鼠高范圍胰島素ELISA試劑盒產(chǎn)品僅用于科研,不可用于臨床診斷。

產(chǎn)品名稱貨號詳情

大鼠高范圍胰島素ELISA試劑盒

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大鼠高范圍胰島素ELISA試劑盒檢測原理:

ALPCO大鼠高范圍胰島素ELISA是一種夾心型免疫分析法。96孔微孔板被涂覆有特異性針對胰島素的單克隆抗體。標準品、對照品和樣本與結(jié)合物一起加入微孔板孔中。然后,微孔板在室溫下放置在微孔板振蕩器上,以700-900轉(zhuǎn)每分鐘的速度振蕩。第一次孵育完成后,孔被洗滌緩沖液清洗并吸干。加入TMB底物,然后微孔板再次在室溫下以700-900轉(zhuǎn)每分鐘的速度振蕩。第二次孵育完成后,加入停止液,并通過分光光度計在450納米處測量光密度(OD)。生成的顏色強度與樣本中胰島素的含量成正比。


所需材料

- 用于分配5、75和100微升的精密移液管(帶一次性吸頭)

- 用于分配75和100微升的重復(fù)或多通道移液管

- 用于試劑配制的容量瓶和移液管

- 用于試劑配制的蒸餾水或去離子水

- 微孔板洗滌器或洗滌瓶

- 能夠以700-900轉(zhuǎn)每分鐘速度振蕩的微孔板振蕩器

- 帶有450納米濾光片的微孔板讀數(shù)器

- 用于樣本制備的渦旋混合器


注意事項

1. 本試劑盒中包含的人血制品已檢測是否含有HIV(人類免疫缺陷病毒)、HBV(乙型肝炎病毒)和HCV(丙型肝炎病毒)。這些病毒的檢測方法不能保證病毒的絕對不存在;因此,所有試劑應(yīng)被視為潛在傳染性物質(zhì)。處理和處置應(yīng)符合所有適當?shù)膰液偷胤椒ㄒ?guī),以處理潛在的生物危害物質(zhì)。

2. 所有來自動物源的材料均為BSE(瘋牛病)陰性。然而,所有材料應(yīng)被視為潛在傳染性物質(zhì)。

3. 避免直接接觸皮膚。

4. 本產(chǎn)品不得內(nèi)服。

5. 使用本產(chǎn)品時,避免進食、飲水或吸煙。

6. 不要使用口吸移液管吸取任何試劑。

7. 試劑盒中的試劑是特定批次的,不得替換。

8. 不要使用超過有效期的試劑。

9. 不建議更改測試程序,可能會影響測試結(jié)果。


檢測程序

所有試劑和微孔板條應(yīng)在使用前平衡至室溫(18-25°C)。使用前輕輕混合所有試劑。每次檢測運行和每次使用多個微孔板時,都必須進行標準曲線的繪制。所有標準品、對照品和樣本應(yīng)以雙份運行。

1. 在打開鋁箔袋之前,應(yīng)將微孔板平衡至室溫。為標準品、對照品和樣本的雙份測定指定足夠的微孔板條。剩余的微孔板條應(yīng)存放在含有干燥劑的密封鋁箔袋中,溫度保持在2-8°C。

2. 將5微升的每種標準品、對照品和樣本分別吸入相應(yīng)的孔中。有關(guān)對照品重組的說明,請參見試劑配制和分析證明。

3. 向每個孔中加入75微升的工作濃度結(jié)合物(參見試劑配制)。

4. 用板封蓋住微孔板,在室溫下振蕩700-900轉(zhuǎn)每分鐘的微孔板振蕩器上孵育2小時。

5. 倒掉孔中的內(nèi)容物,并使用微孔板洗滌器用350微升的工作濃度洗滌緩沖液(參見試劑配制)洗滌微孔板6次。或者,使用帶有洗滌噴嘴的洗滌瓶將工作濃度洗滌緩沖液注入孔中。(不建議使用多通道移液管。洗滌緩沖液必須以足夠且相等的力量分配,以便正確洗滌孔。)在洗滌之間,丟棄液體,倒置,并在吸水紙上用力拍打微孔板。在最后一次洗滌后(自動或手動),通過倒置并在吸水紙上用力拍打微孔板,去除孔中的任何殘留洗滌緩沖液和氣泡。

6. 向每個孔中加入100微升的TMB底物。

7. 用板封蓋住微孔板,在室溫下振蕩700-900轉(zhuǎn)每分鐘的微孔板振蕩器上孵育15分鐘。

8. 向每個孔中加入100微升的停止液,并輕輕搖晃微孔板以混合內(nèi)容物。在進行下一步之前,去除任何氣泡。

9. 將微孔板放入能夠讀取450納米吸光度的微孔板讀數(shù)器中。在加入停止液后應(yīng)立即分析微孔板,且不得超過30分鐘。


典型標準曲線:

以下結(jié)果僅用于演示目的,不能代替測定獲得的數(shù)據(jù)。每次分析運行和平板測試都必須繪制標準曲線。

RTH.png

大鼠胰島素從ng/mL轉(zhuǎn)換為?IU/mL(國際微量單位):

1 ng/mL = 24.8 ?IU/mL 1 ?IU/mL = 6.945 pmol/L 


文獻參考:

Finlay JWA, Dillard RF. Appropriate Calibration Curve Fitting in Ligand Binding Assays.AAPS Journal. 2007; 9(2): E260-E267.


ALPCO產(chǎn)品種類多樣,可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等,涉及神經(jīng)生物學(xué)、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細胞因子與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能、腸胃病學(xué)、免疫學(xué)、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領(lǐng)域,尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長。


作為ALPCO在中國區(qū)域的代理,艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的ALPCO產(chǎn)品。


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產(chǎn)品中心分類
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