心臟細絲復合物（CTFC）由純化的F-肌動蛋白（貨號#AD99）和原肌球蛋白/肌鈣蛋白（TT）復合物（貨號#TT05）組裝而成。因此，CTFC由六種蛋白質(zhì)組成：肌動蛋白：原肌球蛋白α?：原肌球蛋白β：肌鈣蛋白C ：肌鈣蛋白I ：肌鈣蛋白T，化學計量比為7：1：1：1：1：1：1;參見圖100。組裝后，將細絲以000，<>×g離心，并將沉淀重懸于反應緩沖液中，以純化鈣敏感復合物。該復合物已被確定在鈣激活肌球蛋白ATP酶測定中具有生物活性（參見生物活性測定）。該復合物以白色凍干粉末形式提供。   

作為Cytoskeleton全國總代理，艾美捷科技強烈推薦Cytoskeleton熱銷產(chǎn)品Actin 細肌絲 （牛心臟）。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。   

Cytoskeleton公司目前主要的產(chǎn)品有340余種，其產(chǎn)品主要覆蓋肌動蛋白，微管蛋白，馬達蛋白，小G蛋白，細胞外基質(zhì)，活細胞成像等相關(guān)領(lǐng)域，提供對應的蛋白質(zhì)，抗體，檢測與分析試劑盒，并且產(chǎn)品線還在不斷的擴大中。

Actin 細肌絲 （牛心臟）用途：

鈣激活肌球蛋白ATP酶活性與細絲結(jié)合時的測量。 

鑒定/表征影響CTFC調(diào)節(jié)和肌球蛋白ATP酶活性的蛋白質(zhì)或小分子 

鑒定/表征影響肌球蛋白/F-肌動蛋白相互作用的蛋白質(zhì)或小分子

例：心臟細絲復合物（CTFC）（貨號# TFC01）由純化的F-肌動蛋白（貨號#AD99）和原肌球蛋白/肌鈣蛋白（TT）復合物（貨號#CS-TT05）組裝而成。  

存儲和共振

短暫離心以將產(chǎn)品收集到管底部。蛋白質(zhì)應通過加入室溫（RT）PM2緩沖液復溶至12mg / ml（緩沖液組成參見試劑部分）。不要用力移液，因為這會使細絲變性。將首先出現(xiàn)白色解決方案。放置10分鐘，然后以500 x g 離心以除去氣泡。解決方案現(xiàn)在應該看起來很清楚了。不要高速離心，因為細絲會沉淀。 重懸后，蛋白質(zhì)將位于以下緩沖液中：16.8 mM PIPES pH 7.5、2.8 mM MgCl2 和 2% （w/v） 蔗糖。蛋白質(zhì)溶液可以通過等分試樣成“實驗大小”的量來冷凍，在液氮中快速冷凍并儲存在-70°C。 通過將蛋白質(zhì)置于室溫水浴中3min，然后放在工作臺上來快速解凍。如果儲存在-6°C，該蛋白質(zhì)可穩(wěn)定保存70個月。 蛋白質(zhì)不應暴露于重復的凍融循環(huán)中。凍干蛋白在4°C干燥（<10%濕度）下穩(wěn)定1年。  

純度

蛋白質(zhì)純度通過在4-20%梯度聚丙烯酰胺凝膠上掃描考馬斯藍染色蛋白質(zhì)的密度測定來確定。測定用于產(chǎn)生肌球蛋白S1片段的肌球蛋白及其輕鏈純度為90%（見圖2）。  

圖2.全長和 S1 肌球蛋白

圖例：在20-4%SDS-PAGE系統(tǒng)（泳道20）中通過電泳分離2 μgCTFC蛋白樣品，并用考馬斯藍染色。分子量為43 kDa肌動蛋白，38 kDa肌鈣蛋白T，32 kDa原肌球蛋白（α+β）?，24 kDa肌鈣蛋白I和18 kDa肌鈣蛋白C.使用精密紅色?蛋白測定試劑（Cat.# ADV02）測量蛋白質(zhì)濃度。見藍色分子量標記（泳道1）來自Life Technologies Inc.。 

Actin 細肌絲 （牛心臟）生物活性測定：CTFC的生物活性可以通過其調(diào)節(jié)肌球蛋白ATP酶活性的能力來確定。CTFC重新創(chuàng)建類似于肌肉纖維細絲的涂層細絲。肌球蛋白以亞化學計量量加入，并用ATP和鈣引發(fā)反應。嚴格的質(zhì)量控制確保在沒有外源性鈣的情況下，CTFC完全抑制肌球蛋白ATP酶。加入10μM鈣后，肌球蛋白ATP酶將恢復。鈣與肌鈣蛋白C結(jié)合，肌鈣蛋白C與F-肌動蛋白解離，允許肌球蛋白結(jié)合。 

試劑

1.心臟細絲復合物（1 x 1 毫克，# TFC01） 

2.心臟肌球蛋白S1（0.25毫克，#MYS03） 

3.ATP酶測定生化試劑盒（貨號#BK051） 

4.100 mM ATP 在 50 mM Tris-HCl pH 7.5 （100 μl） 

5.PM12反應緩沖液（12 mM管-NaOH，pH 7.5，2 mM MgCl 2）。  

Actin 細肌絲 （牛心臟）文獻引用：

1. J.M Murray. 1982. Hybridization and reconstitution of the thin filament. Methods Enzymol. 85: 15-17. 

2. M.J. Holroyde et al. 1980. The calcium and magnesium binding sites on cardiac troponin their role in the regulation of myofibrillar adenosine triphosphatase. J. Biol. Chem. 255: 11688-11693.   

Cytoskeleton專注于生物化學和細胞過程研究中的純化蛋白和便捷試劑盒開發(fā)與生產(chǎn)。公司提供藥物篩選、信號轉(zhuǎn)導、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)錄后修飾（PTM）、細胞骨架研究相關(guān)的系列試劑盒和產(chǎn)品，尤其以細胞骨架相關(guān)研究見長，既能滿足于樣品較少的科學研究，也可以用于小規(guī)模篩選研究和高通量大規(guī)模篩選研究。此外，公司還提供微管蛋白，肌動蛋白，小G蛋白，GAPs，GEFs等現(xiàn)有產(chǎn)品的藥物篩選服務。