該測定是確定藥物或蛋白質(zhì)對微管蛋白聚合影響的經(jīng)濟(jì)一步法。它是對最初由Bonne，D.等人描述的測定的改編（1）。聚合之后是熒光增強(qiáng)，因?yàn)殡S著聚合發(fā)生，熒光報告基因被摻入微管中。標(biāo)準(zhǔn)測定使用神經(jīng)元微管蛋白（Cat.#T240），其產(chǎn)生代表微管形成的三個階段的聚合曲線;即成核、生長和穩(wěn)態(tài)平衡。其他微管蛋白，如HeLa細(xì)胞微管蛋白（貨號#H001）也可用于該測定。每次檢測的低體積為50μl，微管蛋白濃度低，最終濃度為2mg/ml（每次檢測100μg），使其成為研究更昂貴的癌細(xì)胞微管蛋白試劑和高通量應(yīng)用的理想選擇。    

經(jīng)典的微管蛋白聚合測定使用340nm處的吸光度讀數(shù)來跟蹤微管的形成。它基于這樣一個事實(shí)，即光被微管散射到與微管聚合物濃度成比例的程度。該檢測由Cytoskeleton，Inc.（Cat.#BK006P）提供。基于熒光的測定已與基于吸光度的格式進(jìn)行了比較，并在下面的表1中給出了比較。   

表 1.基于熒光與基于吸光度的聚合測定的比較

作為Cytoskeleton全國總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦Cytoskeleton熱銷產(chǎn)品Tubulin聚合檢測（熒光法-96assays 豬腦 tubulin）試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。   

Cytoskeleton公司目前主要的產(chǎn)品有340余種，其產(chǎn)品主要覆蓋肌動蛋白，微管蛋白，馬達(dá)蛋白，小G蛋白，細(xì)胞外基質(zhì)，活細(xì)胞成像等相關(guān)領(lǐng)域，提供對應(yīng)的蛋白質(zhì)，抗體，檢測與分析試劑盒，并且產(chǎn)品線還在不斷的擴(kuò)大中。

*：重復(fù)樣品 

**：在標(biāo)準(zhǔn)測定條件下。可以針對聚合增強(qiáng)劑或抑制劑優(yōu)化條件。

試劑盒內(nèi)容：該試劑盒包含足夠的材料，可用于 96 μl 格式的 50 次測定。包括以下組件： 

>99% 純微管蛋白（貨號 # T240） 

帶熒光報告基因的通用微管蛋白緩沖液 

微管甘油緩沖液（貨號 # BST05） 

GTP 解決方案（貨號 # BST06） 

紫杉醇陽性對照（貨號 # TXD01） 

半?yún)^(qū)96孔板。黑色，平底

包含詳細(xì)協(xié)議和廣泛故障排除指南的手冊

 Tubulin聚合檢測（熒光法-96assays 豬腦 tubulin）試劑盒示例結(jié)果：與微管蛋白相互作用的化合物或蛋白質(zhì)通常會改變聚合的一個或多個特征相。例如，圖1顯示了在標(biāo)準(zhǔn)聚合反應(yīng)中加入抗有絲分裂藥物紫杉醇的效果。3μM濃度的紫杉醇消除了成核階段并增強(qiáng)了生長階段的Vmax。因此，該測定的一個應(yīng)用是鑒定新型抗有絲分裂藥物。圖1還顯示了添加微管不穩(wěn)定藥物長春花堿的效果。在3μM終濃度下，長春花堿導(dǎo)致Vmax急劇降低和最終聚合物質(zhì)量降低。

圖1.使用基于熒光的微管蛋白聚合測定法（BK011P）進(jìn)行微管蛋白聚合。微管蛋白單獨(dú)孵育（對照），與紫杉醇或長春花堿。每個條件都一式兩份。通過360 nm激發(fā)和420 nm發(fā)射來測量聚合。微管蛋白聚合的三個相標(biāo)記為對照聚合曲線;I：成核，II：生長，III：穩(wěn)態(tài)平衡。  

Tubulin聚合檢測（熒光法-96assays 豬腦 tubulin）試劑盒文獻(xiàn)引用：

Bonne, D., Heusele, C., Simon, C., and Pantaloni, D.  (1985).  4’, 6-Diamidino-2-phenylindole, a fluorescent probe for tubulin and mictrotubules. J. Biol. Chem. 260, 2819-2825.    

Cytoskeleton專注于生物化學(xué)和細(xì)胞過程研究中的純化蛋白和便捷試劑盒開發(fā)與生產(chǎn)。公司提供藥物篩選、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)錄后修飾（PTM）、細(xì)胞骨架研究相關(guān)的系列試劑盒和產(chǎn)品，尤其以細(xì)胞骨架相關(guān)研究見長，既能滿足于樣品較少的科學(xué)研究，也可以用于小規(guī)模篩選研究和高通量大規(guī)模篩選研究。此外，公司還提供微管蛋白，肌動蛋白，小G蛋白，GAPs，GEFs等現(xiàn)有產(chǎn)品的藥物篩選服務(wù)。