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Worthington:手動腺苷脫氨酶的應用及特異性分析

發(fā)布者:艾美捷科技    發(fā)布時間:2024-12-10     
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腺苷脫氨酶催化2'-脫氧腺苷和腺苷不可逆地脫氨基為脫氧肌苷和肌苷。它存在于各種不同形式的原核生物和真核生物中(Pospisilova和Frebort 2007)。

Worthington手動腺苷脫氨酶

特異性:

腺苷脫氨酶已經進化到作用于腺苷及其衍生物(Sharoyan等人,2006年)。此外,腺苷脫氨酶還作用于非肽鍵的碳氮鍵,例如在環(huán)狀酰胺中(White和White,1997年)。

 

組成:

腺苷脫氨酶具有(beta/alpha)8桶狀結構基序,并在催化口袋中包含一個鋅原子。需要一個單獨的二價陽離子(鋅或鈷)來催化活性(Cristalli等人,2001年)。

 

分子特征:

在高等真核生物中,兩種不同的同工酶由不同的基因編碼(Maier等人,2005年)。在人類中,ADA1是一種單鏈Zn結合蛋白,幾乎所有活性都歸因于這種蛋白。ADA2被認為由單核細胞產生,并且含量可以忽略不計。ADA1基因的突變,其中表達被阻斷,會導致免疫缺陷,而那些導致過表達的突變則會導致溶血性貧血(Pospisilova和Frebort,2007年)。

 

該酶在系統(tǒng)發(fā)育上分布廣泛,其序列從細菌到人類都高度保守(Chang,1991年)。低等真核生物的基因不包含內含子,而哺乳動物ADA基因中95%的DNA序列被內含子占據(Pospisilova和Frebort,2007年)。已經報告了牛、小鼠、人類、大腸桿菌、釀酒酵母和鏈霉菌的基因序列。哺乳動物中活性位點周圍的氨基酸殘基高度保守(Cristalli等人,2001年)。人類和牛的腺苷脫氨酶的相似性為93%(Kelly等人,1996年),人類和小鼠的腺苷脫氨酶的相似性為83%(Wiginton等人,1984年,Daddona等人,1984年,和Yeung等人,1985年)。細菌酶與哺乳動物腺苷脫氨酶的相似性為33%(Kelly等人,1996年)。

 

艾美捷Worthington手動腺苷脫氨酶:

類別:Alpha Beta

架構:Alpha-Beta桶

拓撲結構:TIM桶

分子質量:

40.8 kDa(理論值)

最佳pH值:5.0-9.0(Rossi和Lucacchini,1974年)

等電點:5.33(理論值)

消光系數(shù):43,960 cm-1 M-1

活性位點殘基:

組氨酸(H214)

半胱氨酸(C262)

天冬氨酸(D295和D296)

激活劑:Zn2+

抑制劑:Ag+、Hg2+、Cu2+

TPCK、DFP

 

應用:

提高水平是多種人類疾病的診斷測試(Ribera等人,1987年,和Segura等人,1989年)。

肌苷、脫氧肌苷和二脫氧肌苷的合成(Sheid,1996年)

在生物液體中測定腺苷(Piras,1973年)

血液中5'-核苷酸酶的測定(Blackburn等人,1992年)

 

文獻參考:

Agarwal, R. , Sagar, S. and Parks, R.

Adenosine Deaminase from Human Erythrocytes: Purification and Effects of Adenosine Analogs , Biochem Pharmacol 24 , 693 , 1975

 

Aiuti, A. , Cattaneo, F. , Galimberti, S. , Benninghoff, U. , Cassani, B. , Callegaro, L. , Scaramuzza, S. , Andolfi, G. , Mirolo, M. , Brigida, I. , Tabucchi, A. , Carlucci, F. , Eibl, M. and Aker, M.

Gene Therapy for Immunodeficiency Due to Adenosine Deaminase Deficiency , N Engl J Med 360 , 447 , 2009

 

Akedo, H. , Nishihara, H. , Shinkai, K. , Komatsu, K. and Ishikawa, S.

Multiple Forms of Human Adenosine Deaminase. I. Purification and Characterization of Two Molecular Species , Biochim Biophys Acta 276 , 257 , 1972

 

Akedo, H. , Nishihara, H. , Shinkai, K. and Komatsu, K.

Adenosine Deaminases of Two Different Molecular Sizes in Human Tissues , Biochim Biophys Acta 212 , 189 , 1970

 

Andy, R. and Kornfeld, R.

Biosynthesis of the Adenosine Deaminase-binding Protein in Human Fibroblasts and Hepatoma Cells , J Biol Chem 259 , 9832 , 1984

 

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