針對(duì)組蛋白H3在賴氨酸4位點(diǎn)雙甲基化（H3K4me2）的小鼠單克隆抗體，使用KLH偶聯(lián)的合成肽作為免疫原。  

作為BPS Bioscience在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BPS Bioscience熱銷產(chǎn)品Anti-H3K4me2單克隆抗體。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

Anti-H3K4me2單克隆抗體：

克隆性：單克隆  

宿主物種/表達(dá)系統(tǒng)：小鼠  

純化方法：Protein A純化  

形式：水溶液緩沖液  

配方：含有0.05%疊氮化物和0.05% ProClin 300的PBS溶液  

濃度：50 ?g/50 ?l  

免疫原：合成肽  

儲(chǔ)存/穩(wěn)定性  

在–80°C下可保存長達(dá)2年。首次解凍后離心以最大化產(chǎn)品回收。分裝以避免反復(fù)凍融循環(huán)。分裝可在–20°C下保存至少一個(gè)月。

染色質(zhì)免疫沉淀（ChIP）結(jié)果  

使用HeLa細(xì)胞、針對(duì)H3K4me2的單克隆抗體（產(chǎn)品編號(hào)25254）以及優(yōu)化的qPCR引物集進(jìn)行染色質(zhì)免疫沉淀（ChIP）實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)中使用160萬細(xì)胞的剪切染色質(zhì)。抗體用量分別為1 ?g、5 ?g和10 ?g/ChIP進(jìn)行梯度實(shí)驗(yàn)分析。以5 ?g IgG作為陰性免疫沉淀（IP）對(duì)照。通過qPCR分析，使用特異性引物檢測GAPDH基因的啟動(dòng)子和編碼區(qū)以及RPL10和HBB啟動(dòng)子。圖1顯示了回收率，以輸入DNA的百分比表示（免疫沉淀DNA與輸入DNA的相對(duì)量）。

單克隆抗體的交叉反應(yīng)性

為測試特異性，使用針對(duì)H3K4me2的單克隆抗體（產(chǎn)品編號(hào)25254）進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn)，采用該抗體的系列稀釋液。實(shí)驗(yàn)中使用了含有未修飾的H3K4以及單甲基化、雙甲基化和三甲基化H3K4和雙甲基化H3K9的肽段進(jìn)行包被。圖2顯示該抗體對(duì)目標(biāo)修飾具有高度特異性。

Western Blot分析

使用針對(duì)H3K4me2的單克隆抗體（產(chǎn)品編號(hào)25254）對(duì)HeLa細(xì)胞的組蛋白提取物（15 ?g）進(jìn)行Western Blot分析，抗體稀釋度為1:1,000，使用含有5%脫脂奶粉的TBS-Tween緩沖液。右側(cè)標(biāo)記了目標(biāo)蛋白的位置，左側(cè)顯示了分子量標(biāo)記（單位：kDa）。

免疫熒光實(shí)驗(yàn)

使用針對(duì)H3K4me2的抗體（產(chǎn)品編號(hào)25254）和DAPI對(duì)HeLa細(xì)胞進(jìn)行染色。細(xì)胞用4%甲醛固定10分鐘，并用含有5%正常山羊血清和1% BSA的PBS/TX-100進(jìn)行封閉。細(xì)胞用H3K4me2抗體（左側(cè)）以1:500的比例稀釋在封閉液中進(jìn)行免疫熒光標(biāo)記，隨后使用與Alexa594偶聯(lián)的抗小鼠抗體進(jìn)行二抗標(biāo)記。中間圖顯示DAPI對(duì)細(xì)胞核的染色。右側(cè)圖顯示了兩種染色的合并圖像。

應(yīng)用

-染色質(zhì)免疫沉淀（ChIP）：1 ?g/ChIP  

-酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）：1:5000  

-Western Blot（WB）：1:1000  

-免疫熒光（IF）：1:500  

運(yùn)輸溫度：–20°C或–80°C  

物種反應(yīng)性：人  

注意事項(xiàng)：每IP的最佳抗體用量應(yīng)由最終用戶確定。建議測試1–5 ?g/IP。  

警告：避免反復(fù)凍融循環(huán)。  

科學(xué)分類：抗體  

監(jiān)管狀態(tài)：僅限研究使用

BPS Bioscience是一家通過ISO 9001:2015認(rèn)證的生命科學(xué)領(lǐng)域的供應(yīng)商，公司一直致力于開發(fā)藥物研發(fā)領(lǐng)域的重組蛋白酶、蛋白酶活性/抑制劑篩選試劑盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年創(chuàng)立，從創(chuàng)立至今一直致力于提供藥物研發(fā)領(lǐng)域的創(chuàng)新解決方案，以推動(dòng)新的藥物發(fā)現(xiàn)a。公司主要關(guān)注的領(lǐng)域包括免疫療法、表觀遺傳學(xué)、新型冠狀病毒、CRISPR、細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等，主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、組蛋白去甲基化酶、組蛋白甲基化轉(zhuǎn)移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。 

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