熒光素酶被用作一種敏感的報告基因來研究廣泛的生物反應。它最初是從北美洲的Photinus pyralis克隆出來的，能夠催化D-熒光素在ATP和鎂的存在下被氧化，發(fā)出黃光。這個反應具有高量子產率，而且熒光素酶和熒光素都具有低毒性。這些特性使得熒光素酶成為了一種常用的工具。另一方面，海腎熒光素酶不依賴ATP，能在氧氣的存在下將蟲熒光素轉化為蟲熒光酰胺，發(fā)出藍光。兩種熒光素酶相對于例如熒光蛋白都有相對較短的半衰期，這允許進行動態(tài)研究。通過在同一樣本中將熒光素酶報告基因對某一刺激的響應標準化為控制報告基因，例如海腎熒光素酶報告基因，可以提高熒光素酶報告基因的準確性。

兩步螢光素酶（螢火蟲和雷尼拉）檢測系統(tǒng)旨在高通量、快速定量單個哺乳動物細胞培養(yǎng)樣本中的螢火蟲和雷尼拉螢光素酶。它配備了足夠的試劑，可以在96孔板中進行100次100μl的測定。

艾美捷兩步熒光素酶檢測系統(tǒng)：

貨號：BPS-60683-1

同義詞：熒光素，螢火蟲熒光素酶，熒光素酶緩沖液，海腎熒光素酶，熒光素酶檢測緩沖液

需要但不提供的物料：

與讀取儀器兼容的多孔組織培養(yǎng)板。

在實驗啟動子下表達螢火蟲熒光素酶的哺乳動物細胞，以及在控制啟動子下表達海腎熒光素酶的細胞。

適當?shù)募毎囵B(yǎng)基。

實驗室平臺搖床。

發(fā)光計

儲存/穩(wěn)定性：如果按照指示儲存材料，這個測定試劑盒在收到日期后的6個月內將表現(xiàn)最佳。

應用：在培養(yǎng)的哺乳動物細胞中監(jiān)測螢火蟲（Photinus pyralis）和海腎熒光素酶活性。

基于發(fā)光的高通量藥物篩選

運輸溫度：-20°C

科學類別：基于細胞的測定試劑盒

僅供研究使用

兩步熒光素酶檢測系統(tǒng)具有幾個相關的特點：

? 靈敏度高 – 能夠高度敏感地檢測熒光素酶和海腎熒光素酶活性。

? 穩(wěn)定性好 – 熒光素酶信號輸出穩(wěn)定超過一小時，提供了孵育時間的靈活性。

? 高通量 – 其簡單的均相協(xié)議最小化了操作步驟，支持高通量篩選應用。

? 兼容性 – 與含有高達10%血清和酚紅的多種常見培養(yǎng)基兼容。

兩步熒光素酶檢測系統(tǒng)示例結果：

圖1：使用TWO-Step熒光素酶（螢火蟲和海腎）測定系統(tǒng)和另一種商業(yè)可獲得的熒光素酶試劑測量的熒光素酶活性。HEK293細胞被種植在96孔板中，并轉染了Notch熒光素酶報告基因、一個持續(xù)表達海腎熒光素酶的載體，以及Notch1表達載體或對照表達載體（小鼠Notch1信號通路報告試劑盒BPS Bioscience #60509）。轉染后48小時，使用TWO-Step熒光素酶（螢火蟲和海腎）測定系統(tǒng)或另一種商業(yè)可獲得的選項測量發(fā)光。向細胞中添加熒光素酶試劑，并在試劑添加后15分鐘測量發(fā)光。所示數(shù)據(jù)代表背景減去的發(fā)光。A. 使用BPS Bioscience或競爭試劑測量的由Notch熒光素酶產生的螢火蟲衍生發(fā)光信號分析。B. 使用BPS Bioscience或競爭試劑測量的由海腎熒光素酶產生的海腎衍生發(fā)光信號分析。C. 標準化的熒光素酶活性，對應于由對照海腎熒光素酶產生的海腎衍生發(fā)光與Notch熒光素酶產生的螢火蟲衍生發(fā)光的比率。

兩步熒光素酶檢測系統(tǒng)相關產品：

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Renilla Luciferase Lentivirus (G418 and Puromycin)    79565   500 ?l x 2

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