重組HEK293細(xì)胞穩(wěn)定表達全長人類FcRL5（Fc受體樣5，也稱為CD307，參考序列NM_031281）。

背景

FcRL5是一種單次跨膜的類型1膜蛋白，包含8個免疫球蛋白樣C2型結(jié)構(gòu)域。FcRL5可能參與B細(xì)胞發(fā)育和淋巴瘤發(fā)生。此外，它在被診斷為多發(fā)性骨髓瘤患者的惡性漿細(xì)胞中富集，是抗體藥物偶聯(lián)物（ADC）和抗FcRL5 CAR T細(xì)胞的有吸引力的靶標(biāo)。

作為BPS Bioscience在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦BPS Bioscience熱銷產(chǎn)品FcRL5 HEK293 細(xì)胞系。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

應(yīng)用

用作抗FcRL5 CAR T細(xì)胞、抗FcRL5 ADC和雙特異性抗體的靶細(xì)胞。

細(xì)胞培養(yǎng)協(xié)議

細(xì)胞解凍

1. 在37°C水浴中搖晃裝有冷凍細(xì)胞的小瓶大約60秒。細(xì)胞一旦解凍（可能比60秒稍快或稍慢），迅速將小瓶的全部內(nèi)容轉(zhuǎn)移到含有10毫升預(yù)溫的解凍培養(yǎng)基1（不含普魯霉素）的試管中。如果將細(xì)胞在37°C水浴中放置過久，將導(dǎo)致活性迅速喪失。

2. 立即以300 x g的速度離心細(xì)胞5分鐘，去除培養(yǎng)基并用5毫升預(yù)溫的解凍培養(yǎng)基1（不含普魯霉素）重懸細(xì)胞。

3. 將重懸的細(xì)胞轉(zhuǎn)移到T25或T75培養(yǎng)瓶中，并在37°C和5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4. 培養(yǎng)24小時后，檢查細(xì)胞附著和活性。更換培養(yǎng)基為新鮮的解凍培養(yǎng)基1（不含普魯霉素），并在37°C和5% CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)，直到細(xì)胞準(zhǔn)備好傳代。

5. 細(xì)胞應(yīng)在完全融合前進行傳代。在第一次傳代和后續(xù)傳代中，使用生長培養(yǎng)基1T（含普魯霉素）。

細(xì)胞傳代

1. 抽吸培養(yǎng)基，用磷酸鹽緩沖液（PBS）沖洗細(xì)胞，并用0.05%胰酶/EDTA從培養(yǎng)容器中分離細(xì)胞。

2. 一旦細(xì)胞分離，加入生長培養(yǎng)基1T并轉(zhuǎn)移到試管中。以300 x g的速度離心細(xì)胞5分鐘，去除培養(yǎng)基并用含普魯霉素的生長培養(yǎng)基1T重懸細(xì)胞。每三天按照1:10的期望傳代比例將細(xì)胞種植到新的培養(yǎng)容器中。

細(xì)胞冷凍

1. 抽吸培養(yǎng)基，用磷酸鹽緩沖液（PBS）沖洗細(xì)胞，并用0.05%胰酶/EDTA從培養(yǎng)容器中分離細(xì)胞。

2. 一旦細(xì)胞分離，加入生長培養(yǎng)基1T并計數(shù)細(xì)胞。

3. 以300 x g的速度離心細(xì)胞5分鐘，去除培養(yǎng)基并在4°C冷凍培養(yǎng)基（BPS Bioscience #79796，或10% DMSO + 90% FBS）中重懸細(xì)胞，細(xì)胞濃度約為2 x 10^6個細(xì)胞/毫升。

4. 將1毫升的細(xì)胞懸浮液分裝到冷凍小瓶中。將小瓶放入保溫容器中緩慢冷卻，并在-80°C下過夜保存。

5. 次日將小瓶轉(zhuǎn)移到液氮中保存。

注意：建議在早期傳代時擴增細(xì)胞并至少冷凍10個小瓶以備將來使用。

圖1. FcRL5 HEK293細(xì)胞中FcRL5表達的分析。35,000個FcRL5 HEK293細(xì)胞和HEK293親本細(xì)胞用PE偶聯(lián)的抗人FcRL5抗體（BioLegend，#340304）染色，并通過流式細(xì)胞儀分析。HEK293親本細(xì)胞以綠色顯示，F(xiàn)cRL5 HEK293細(xì)胞以藍色顯示。

相關(guān)產(chǎn)品：

Products Catalog # Size

FcRL5 CHO Cell Line 78375 2 vials

FcGR3A (CD16A) CHO Cell Line 78332 2 vials

FcGR3B (CD16B) CHO Cell Line 78333 2 vials

BCMA CHO Recombinant Cell Line (High or Low Expression) 79500 2 vials

BCMA / GLuc - CHO Recombinant Cell Line 79830 2 vials

CD19 CHO Recombinant Cell Line (Low, Medium and High Expression) 79561 2 vials

CD19 / Firefly Luciferase - CHO Recombinant Cell Line 79714 2 vials

CD19 / BCMA / Firefly Luciferase - CHO Recombinant Cell Line 78030 2 vials

CD20 CHO Recombinant Cell Line (High or Medium Expression) 79624 2 vials

CD22 CHO Recombinant Cell Line (Medium and High Expression) 79557 2 vials

CD22 / Luciferase - CHO Recombinant Cell Line 79715 2 vials

BPS Bioscience是一家通過ISO 9001:2015認(rèn)證的生命科學(xué)領(lǐng)域的供應(yīng)商，公司一直致力于開發(fā)藥物研發(fā)領(lǐng)域的重組蛋白酶、蛋白酶活性/抑制劑篩選試劑盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年創(chuàng)立，從創(chuàng)立至今一直致力于提供藥物研發(fā)領(lǐng)域的創(chuàng)新解決方案，以推動新的藥物發(fā)現(xiàn)。公司主要關(guān)注的領(lǐng)域包括免疫療法、表觀遺傳學(xué)、新型冠狀病毒、CRISPR、細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等，主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、組蛋白去甲基化酶、組蛋白甲基化轉(zhuǎn)移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。 

作為BPS Bioscience在中國的區(qū)域代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BPS Bioscience以及客戶訂制化服務(wù)。