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CryoSol?是一套多組分溶液,用于利用溶解/低溫保護(hù)混合劑1-6(SM1-SM6)進(jìn)行配體溶解和浸泡,以及使用CryoMixes? 1-18(CM1-CM18)進(jìn)行晶體低溫保護(hù)。SM1-SM6和CM1-CM18的成分包括環(huán)己烷和丁二醇以及二甲基亞砜(DMSO)。雖然高濃度的DMSO對(duì)蛋白質(zhì)可能有害,但高濃度的環(huán)己烷卻能很好地被耐受。環(huán)己烷單獨(dú)使用或與其他具有低溫保護(hù)性能的有機(jī)化合物聯(lián)合使用時(shí),也非常有效地進(jìn)行配體溶解。這個(gè)試劑盒旨在用于配體溶解,準(zhǔn)備蛋白-配體復(fù)合物進(jìn)行共晶篩選。它也適用于準(zhǔn)備裝載配體的低溫溶液,用于浸入晶體。
艾美捷MiTeGen-CryoSol?的特點(diǎn):
溶解疏水性配體。
輕松準(zhǔn)備用于浸泡實(shí)驗(yàn)的裝載配體的低溫溶液。
蛋白配體復(fù)合物的共晶篩選。
蛋白友好的二甲基亞砜(DMSO/環(huán)己烷/乙二醇)混合劑應(yīng)改善配體溶解。
包含2,3-丁二醇 - 與酶活性兼容。

來自ICCBM 15海報(bào)展示的晶體照片。在不同配體存在下生長(zhǎng)的野生型人轉(zhuǎn)甲狀腺素(TTR)晶體的顯微照片。(A) TTR-16α-溴雌醇復(fù)合物的晶體。這些晶體是在較低濃度的PEG條件下生長(zhǎng)的。PEG可以參與類固醇的溶解,但濃度的微小變化對(duì)配體晶體生長(zhǎng)幾乎沒有影響。(B) 在pH7.4條件下,存在姜黃素時(shí)生長(zhǎng)的TTR晶體。
二惡烷和二醇對(duì)蛋白質(zhì)不溶性有相反的影響,可以用來改善晶體。在蒸汽擴(kuò)散實(shí)驗(yàn)中,二惡烷增加了儲(chǔ)層溶液的沉淀能力。二惡烷-PEG混合物允許單獨(dú)PEG不能沉淀的蛋白質(zhì)結(jié)晶。二惡烷也是蛋白質(zhì)結(jié)晶中常見的沉淀劑/添加劑。
多組分低溫保護(hù)劑溶液(CM1-CM18)CryoMixes? CM1-CM18 是一套擴(kuò)展型多組分溶液(除了在CryoProtX?, MD1-61中提供的之外),用于晶體的低溫保護(hù)和單步低溫浸泡,并且包括了在CryoProtX?中未發(fā)現(xiàn)的附加組分,如二惡烷和丁二醇,使這些條件更適合于通常在標(biāo)準(zhǔn)低溫溶液中不溶的配體的工作。
配方說明:CryoSol?試劑使用超純水(>18.0 MΩ)配制,并通過0.22微米過濾器無菌過濾。沒有添加防腐劑。可從Molecular Dimensions公司獲取用于優(yōu)化的單獨(dú)試劑和儲(chǔ)備溶液。
MiTeGen-CryoSol文獻(xiàn)參考:
Ciccone L, Tepshi L, Nencetti S, Stura EA.N Biotechnol. (2015)“Transthyretin complexes with curcumin and bromoestradiol: Evaluation of solubilizing multicomponentmixtures” 32(1):54-64.
L Vera, EA Stura - Crystal Growth & Design, (2014)“Strategies for Protein Cryocrystallography”,14 (2), 427-435.
Ciccone L., Vera L., Tepshi L., Rosalia L., Rossello A. & SturaE.A. "Multicomponent mixtures for cryoprotection andligand solubilization." Biotechnology Reports 7 (2015): 120-127. Open Access
MiTeGen 致力于分子結(jié)晶研究相關(guān)產(chǎn)品的開發(fā)與生產(chǎn),包括晶體生長(zhǎng)條件篩選試劑及各種耗材與工具。艾美捷科技是MiTeGen的中國(guó)代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。
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