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纖連蛋白從牛血漿中純化。蛋白質(zhì)純度通過在4-20%聚丙烯酰胺凝膠上掃描考馬斯藍(lán)染色蛋白質(zhì)的密度測定來確定。HiLyte Fluor 488標(biāo)記的纖連蛋白純度為>80%(圖1)。
該蛋白被修飾以含有隨機(jī)表面賴氨酸共價(jià)連接的HiLyte Fluor 488(2)。熒光染料的活化酯用于標(biāo)記蛋白質(zhì)。標(biāo)記化學(xué)計(jì)量是通過蛋白質(zhì)和染料濃度的光譜測量來確定的。最終標(biāo)記化學(xué)計(jì)量是每個(gè)蛋白質(zhì)分子 1-3 種染料(圖 2)。
HiLyte Fluor 488標(biāo)記的纖連蛋白可以使用350-450nm激發(fā)和500-550nm發(fā)射的濾光片組進(jìn)行檢測。 纖連蛋白在SDS-PAGE上作為單個(gè)亞基運(yùn)行,表觀分子量為230 kDa。FNR02以橙色凍干粉的形式提供。每瓶FNR02含有20μg蛋白質(zhì)。
作為Cytoskeleton全國總代理,艾美捷科技強(qiáng)烈推薦Cytoskeleton熱銷產(chǎn)品纖維連接蛋白 HiLyte488 (牛血漿)。產(chǎn)品僅用于科研,不可用于臨床診斷。
Cytoskeleton公司目前主要的產(chǎn)品有340余種,其產(chǎn)品主要覆蓋肌動蛋白,微管蛋白,馬達(dá)蛋白,小G蛋白,細(xì)胞外基質(zhì),活細(xì)胞成像等相關(guān)領(lǐng)域,提供對應(yīng)的蛋白質(zhì),抗體,檢測與分析試劑盒,并且產(chǎn)品線還在不斷的擴(kuò)大中。
| 產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 詳情 |
| 纖維連接蛋白 HiLyte488 (牛血漿) | FNR02-A | 查看 |
纖維連接蛋白 HiLyte488 (牛血漿)用途包括:
觀察纖連蛋白基質(zhì)組裝和細(xì)胞粘附
細(xì)胞侵襲檢測 (1)
FACS 分析
純度純度 純度
是通過SDS-PAGE凝膠上蛋白質(zhì)的掃描密度測定法確定的。樣品純度為>80%。
HiLyte Fluor 488 標(biāo)記的纖連蛋白純度測定(圖1)
HiLyte熒光 488標(biāo)記的纖連蛋白在溶液中的吸收掃描(圖2)
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| 圖1:在20-1%SDS-PAGE系統(tǒng)中通過電泳分離20 μg未標(biāo)記的纖連蛋白(泳道488)和2 μgHiLyte Fluor 4標(biāo)記的纖連蛋白(泳道20)。未標(biāo)記的蛋白質(zhì)用考馬斯藍(lán)染色并在白光下可視化。HiLyte Fluor 488標(biāo)記的蛋白質(zhì)在紫外光下可視化,染料前沿未觀察到游離染料。使用精密紅色蛋白質(zhì)測定試劑(貨號#ADV02)測定蛋白質(zhì)定量。Mark12分子量標(biāo)記物來自Invitrogen |
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| 圖2:用Milli-Q水稀釋FNR02,并在250至650nm之間掃描其吸光度光譜。HiLyte Fluor 488標(biāo)記化學(xué)計(jì)量法計(jì)算為每纖連蛋白1-3種染料,使用527nm處的吸光度最大值和比爾-朗伯定律。蛋白質(zhì)結(jié)合時(shí)的染料消光系數(shù)為70,000M-1厘米-1 |
文獻(xiàn)引用:
Artym VV. Et al. 2009. ECM degradation assay for analyzing local cell invasion. Methods in molecular biology, Extracellular matrix protocols, vol. 522: 211-219.Humana Press.
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Cytoskeleton專注于生物化學(xué)和細(xì)胞過程研究中的純化蛋白和便捷試劑盒開發(fā)與生產(chǎn)。公司提供藥物篩選、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)錄后修飾(PTM)、細(xì)胞骨架研究相關(guān)的系列試劑盒和產(chǎn)品,尤其以細(xì)胞骨架相關(guān)研究見長,既能滿足于樣品較少的科學(xué)研究,也可以用于小規(guī)模篩選研究和高通量大規(guī)模篩選研究。此外,公司還提供微管蛋白,肌動蛋白,小G蛋白,GAPs,GEFs等現(xiàn)有產(chǎn)品的藥物篩選服務(wù)。

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