FluoTag-X2 anti-TagFP 是一種自主研發(fā)的單域抗體（sdAb），對(duì)源自四色叢葵熒光蛋白（Entacmaea quadricolor）的熒光蛋白（包括TagRFP、TagRFP657、TagBFP、mTagBFP2、mKate和mKate2）具有高親和力與特異性。其特點(diǎn)在于每個(gè)單域抗體分子上標(biāo)記有兩個(gè)熒光基團(tuán)（X2）。

熒光蛋白（FPs）作為蛋白質(zhì)標(biāo)簽被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)和顯微技術(shù)領(lǐng)域，為蛋白質(zhì)成像及生化應(yīng)用帶來(lái)了革命性變革。TagRFP是一種單體紅色熒光蛋白，由源自四色叢葵的TurboRFP改造而成，具有更長(zhǎng)的熒光壽命和更強(qiáng)的光穩(wěn)定性（Merzlyak等，2007）。通過(guò)進(jìn)一步誘變，該紅色熒光蛋白被轉(zhuǎn)化為藍(lán)色熒光蛋白TagBFP（Subach等，2008）。數(shù)年后，升級(jí)版本mTagBFP2問世，具有更高的亮度和穩(wěn)定性（Subach等，2011）。2007年，研究人員從TagRFP開發(fā)出mKate，其卓越的遠(yuǎn)紅熒光特性與光穩(wěn)定性備受矚目（Shcherbo等，2007）。當(dāng)前所有可用變體信息均可通過(guò)開源熒光蛋白數(shù)據(jù)庫(kù)FPbase獲取。

FluoTag-X2 anti-TagFP 可強(qiáng)力結(jié)合TagRFP、TagRFP657、TagBFP、mTagBFP2、mKate及mKate2。

FluoTags系列是由特定數(shù)量熒光基團(tuán)直接標(biāo)記的單域抗體（sdAbs）。FluoTag-Q是單個(gè)單域抗體標(biāo)記單個(gè)熒光基團(tuán)的構(gòu)型，可實(shí)現(xiàn)更定量的檢測(cè)結(jié)果；FluoTag-X2在每個(gè)單域抗體上標(biāo)記兩個(gè)熒光基團(tuán)；FluoTag-X4是兩種不同單域抗體的混合制劑，可同時(shí)結(jié)合單個(gè)靶標(biāo)蛋白——每個(gè)抗體攜帶兩個(gè)熒光基團(tuán)，從而使靶標(biāo)蛋白總共標(biāo)記4個(gè)熒光基團(tuán)，獲得更明亮的信號(hào)。

艾美捷FluoTag-X2抗TagFP AbberiorStar635P：

貨號(hào)：N0502-Ab635P-L

克隆號(hào)：1H7

宿主：羊駝

生產(chǎn)系統(tǒng)：大腸桿菌

應(yīng)用：免疫熒光（ICC）

注：本品不推薦用于Western blot檢測(cè)，因單域抗體主要識(shí)別天然/折疊狀態(tài)蛋白質(zhì)。

稀釋比例：1:500（相當(dāng)于終濃度5 nM）

靶點(diǎn)：TagFP

特異性：可識(shí)別TagRFP、TagRFP657、TagBFP、mTagBFP2、mKate及mKate2，可能與其他未經(jīng)測(cè)試的TagRFP衍生蛋白發(fā)生交叉反應(yīng)。

制劑說(shuō)明：?jiǎn)慰寺斡蚩贵w凍干粉源自含2% US源牛血清白蛋白的PBS緩沖液（pH 7.4）。

運(yùn)輸條件：常溫

儲(chǔ)存說(shuō)明：凍干粉試劑瓶可于2-8°C保存12個(gè)月。復(fù)溶后需置于-80°C保存，有效期6個(gè)月。工作 aliquots 可于-20°C保存4周。

注意：僅供體外研究使用。無(wú)毒、無(wú)危害性、無(wú)傳染性。

使用FluoTag-X2 Abberior STAR 580 anti-TagFP單域抗體（貨號(hào)N0502，稀釋比例1:500）對(duì)表達(dá)TOM70-BFP報(bào)告蛋白的PFA固定3T3細(xì)胞進(jìn)行免疫染色效果圖。BFP信號(hào)顯示為藍(lán)色，對(duì)應(yīng)FluoTag信號(hào)顯示為紅色，雙通道合并信號(hào)顯示為品紅色。

文獻(xiàn)參考：

Stelloo S, Alejo-Vinogradova MT, van Gelder CAGH, et al. Deciphering lineage specification during early embryogenesis in mouse gastruloids using multilayered proteomics. Cell Stem Cell. 2024;31(7):1072-1090.e8. doi:10.1016/j.stem.2024.04.017 (IF; mouse gastruloids)

Capdevila C, Miller J, Cheng L, et al. Time-resolved fate mapping identifies the intestinal upper crypt zone as an origin of Lgr5+ crypt base columnar cells. Cell. 2024;187(12):3039-3055.e14. doi:10.1016/j.cell.2024.05.001

Hutto RA, Rutter KM, Giarmarco MM, Parker ED, Chambers ZS, Brockerhoff SE. Cone photoreceptors transfer damaged mitochondria to Müller glia. Cell Rep. 2023;42(2):112115. doi:10.1016/j.celrep.2023.112115 (IHC, zebrafish)