FluoTag-Q抗TagFP是一種內(nèi)部開發(fā)的單域抗體（sdAb），對來自四膜蟲（Entacmaea quadricolor）的熒光蛋白（包括TagRFP、TagRFP657、TagBFP、mTagBFP2、mKate和mKate2）具有高親和力和特異性。它每個sdAb分子上結(jié)合一個熒光團(tuán)，可用于更定量的測量（Q）。

熒光蛋白（FPs）在細(xì)胞生物學(xué)和顯微鏡技術(shù)中被廣泛用作蛋白標(biāo)簽，徹底革新了蛋白成像和生化應(yīng)用。TagRFP是一種單體紅色熒光蛋白，由TurboRFP（來自四膜蟲）改造而來，具有更長的熒光壽命和增強(qiáng)的光穩(wěn)定性（Merzlyak等，2007）。通過進(jìn)一步的突變，這種紅色熒光蛋白被改造成了藍(lán)色熒光的TagBFP（Subach等，2008）。幾年后，一個改進(jìn)版本mTagBFP2被推出，提供了更高的亮度和穩(wěn)定性（Subach等，2011）。2007年，mKate從TagRFP中開發(fā)出來，以其出色的遠(yuǎn)紅熒光和光穩(wěn)定性而聞名（Shcherbo等，2007）。目前可用的最新變體可以在開源的熒光蛋白數(shù)據(jù)庫FPbase上找到。

FluoTag-Q抗TagFP可牢固結(jié)合TagRFP、TagRFP657、TagBFP、mTagBFP2、mKate和mKate2。

FluoTags是直接與一定數(shù)量的熒光團(tuán)結(jié)合的單域抗體（sdAbs）。FluoTag-Q是配備單個熒光團(tuán)的sdAb，用于更定量的讀數(shù)。FluoTag-X2每個sdAb攜帶兩個熒光團(tuán)。FluoTag-X4是兩種不同的sdAbs的混合物，它們同時結(jié)合到單一目標(biāo)上，每個都帶有兩個熒光團(tuán)，從而總共在目標(biāo)蛋白上裝飾4個熒光團(tuán)，以產(chǎn)生更明亮的信號。

艾美捷FluoTag-Q抗TagFP AbberiorStar635P：

貨號：N0501-Ab635P-L

克隆：1H7

宿主：羊駝

生產(chǎn)于：大腸桿菌

應(yīng)用：免疫熒光

注意：不建議在Western blot中使用該產(chǎn)品，因?yàn)閟dAbs主要識別天然/折疊蛋白。

稀釋度：1:1000（相當(dāng)于最終濃度為5 nM）

靶標(biāo)：TagFP

特異性：識別TagRFP、TagRFP657、TagBFP、mTagBFP2、mKate和mKate2。可能與其他未經(jīng)測試的TagRFP衍生物發(fā)生反應(yīng)。

配方：從含有2% BSA（美國產(chǎn)地）的pH 7.4的PBS中凍干sdAb克隆。用200 ul去離子水中的50%甘油復(fù)溶。如果適用，我們建議加入0.1%疊氮化鈉作為防腐劑。復(fù)溶于200 ul時，單域抗體的最終濃度為5 uM。

運(yùn)輸：常溫

儲存：含有凍干蛋白的安瓿瓶可在4°C下儲存6個月。我們建議用去離子水中的50%無菌甘油復(fù)溶蛋白，并加入0.1%疊氮化鈉作為防腐劑（如果適用）。通過分裝復(fù)溶蛋白，減少凍融循環(huán)次數(shù)。長期儲存可在-80°C下保存長達(dá)6個月。工作分裝可在-20°C下保存長達(dá)4周。不建議將復(fù)溶后的蛋白在4°C下儲存。

注意：僅用于體外/研究目的。無毒、無害、無傳染性。

使用FluoTag-Q Abberior STAR635P抗TagFP sdAb（貨號N0501，稀釋度1:500）對表達(dá)TOM70-BFP報告蛋白的PFA固定3T3細(xì)胞進(jìn)行免疫染色。BFP信號以藍(lán)色表示，相應(yīng)的FluoTag信號以黃色表示，兩個通道的合并以白色表示。

文獻(xiàn)參考：

Oleksiievets N, Sargsyan Y, Thiele JC, et al. Fluorescence lifetime DNA-PAINT for multiplexed super-resolution imaging of cells. Commun Biol. 2022;5(1):38. Published 2022 Jan 11. doi:10.1038/s42003-021-02976-4 (FL-DNA PAINT)

Thiele JC, Helmerich DA, Oleksiievets N, et al. Confocal Fluorescence-Lifetime Single-Molecule Localization Microscopy. ACS Nano. 2020;14(10):14190-14200. doi:10.1021/acsnano.0c07322 (DNA PAINT)

Sograte-Idrissi S, Oleksiievets N, Isbaner S, et al. Nanobody Detection of Standard Fluorescent Proteins Enables Multi-Target DNA-PAINT with High Resolution and Minimal Displacement Errors. Cells. 2019;8(1):48. Published 2019 Jan 14. doi:10.3390/cells8010048 (DNA PAINT)