ALFA選擇器PE（“可釋放肽”）是一種創(chuàng)新的親和樹脂（瓊脂糖&磁性），專為在生理?xiàng)l件下高效純化天然ALFA標(biāo)簽?zāi)繕?biāo)蛋白而設(shè)計(jì)。 每個(gè)單位包含10毫克ALFA洗脫肽。

ALFA選擇器PE基于一種高親和力（Kd = 11 nM）的單域抗體（sdAb），該抗體共價(jià)固定在4%交聯(lián)的瓊脂糖或磁性瓊脂糖珠上。 ALFA選擇器PE經(jīng)過優(yōu)化，可在生理?xiàng)l件下使用ALFA洗脫肽進(jìn)行高效、競爭性洗脫。為此，每個(gè)單位的ALFA選擇器PE都附帶10毫克ALFA洗脫肽，足以用于25毫升洗脫緩沖液。

如果需要在低溫下洗脫（例如4°C），請使用ALFA選擇器CE（“可低溫洗脫”）。

或者，可以在酸性或變性條件下進(jìn)行洗脫。 創(chuàng)新的、定向的、選擇性的通過柔性連接鏈連接，保證了sdAb的高度可及性，并大大消除了批次間的變化。

由于sdAb的單鏈性質(zhì)及其共價(jià)連接，在洗脫過程中，即使在惡劣條件下（例如SDS樣品緩沖液），也不會(huì)觀察到IgG的輕鏈和重鏈的“泄漏”。

ALFA選擇器PE因此具有對ALFA融合蛋白的高親和力和卓越容量，同時(shí)顯示出可忽略不計(jì)的非特異性背景。 ALFA選擇器PE不僅與生理緩沖液兼容，還與高嚴(yán)格性緩沖液兼容。因此，ALFA選擇器PE為調(diào)整結(jié)合和洗滌條件以滿足實(shí)驗(yàn)需求提供了極大的自由度。

艾美捷ALFA選擇器PE（包括ALFA肽N1520-10mg）：

貨號：N1510

克隆號： 1G5變體

宿主： 駱駝

生產(chǎn)方式： 大腸桿菌

應(yīng)用： 免疫沉淀（IP）

稀釋比例： 不適用（N/A）

容量： > 3 ug ALFA標(biāo)簽GFP每uL裝填珠子

靶標(biāo)： ALFA標(biāo)簽

特異性： 識(shí)別ALFA標(biāo)簽（SRLEEELRRRLTE）

配方：50%的PBS懸浮液，含有20%乙醇。另外，提供10毫克凍干的ALFA洗脫肽。

運(yùn)輸條件： 常溫

保存條件：在4°C下保存，最長可達(dá)12個(gè)月。不要冷凍！

協(xié)議：請將凍干的肽（10毫克）溶解在250 ul蒸餾水中。這將得到40 mg/ml或20 mM（100倍）的ALFA肽濃度。

注意事項(xiàng)： 僅限體外使用/僅用于研究。無毒、無害、無傳染性。

文獻(xiàn)參考：

G?tzke H, Kilisch M, Martínez-Carranza M, Sograte-Idrissi S, Rajavel A, Schlichthaerle T, Engels N, Jungmann R, Stenmark P, Opazo F, Frey S. The ALFA-tag is a highly versatile tool for nanobody-based bioscience applications. Nat Commun. 2019 Sep 27;10(1):4403. doi: 10.1038/s41467-019-12301-7. PMID: 31562305; PMCID: PMC6764986.

Kilisch M, G?tzke H, Gere-Becker M, Crauel A, Opazo F, Frey S. Discovery and Characterization of an ALFA-Tag-Specific Affinity Resin Optimized for Protein Purification at Low Temperatures in Physiological Buffer. Biomolecules. 2021;11(2):269. Published 2021 Feb 12. doi:10.3390/biom11020269

Cheetham-Wilkinson IJ, Sivalingam B, Flitton C, et al. RpH-ILV: Probe for lysosomal pH and acute LLOMe-induced membrane permeabilization in cell lines and Drosophila. Sci Adv. 2025;11(1):eadr7325. doi:10.1126/sciadv.adr7325 (IP; HEK293T)