α-(2-3,6,8,9) 神經(jīng)氨酸酶Au能夠從復(fù)雜碳水化合物和糖蛋白中切割所有非還原末端的唾液酸殘基。不同連接方式的相對切割速率為：α(2-6) > α(2-3) > α(2-8), α(2-9)。

此外，該酶還能切割分支唾液酸（連接到內(nèi)部殘基）。這一特性使其在神經(jīng)氨酸酶中獨一無二。切割分支殘基可能需要較高濃度的酶和較長的孵育時間。若僅切割非還原末端的α(2-3)非分支唾液酸殘基，請使用唾液酸酶SP，編號E-S007。

α-(2-3,6,8,9) 神經(jīng)氨酸酶是從產(chǎn)尿素棒狀桿菌的一個克隆中分離出來的。該酶已使用寡糖標(biāo)準(zhǔn)品進行了廣泛的表征。

艾美捷QA-Bio-神經(jīng)氨酸酶Au：

來源 來自大腸桿菌中產(chǎn)尿素棒狀桿菌的重組。

EC 3.2.1.18

內(nèi)容 20 mM Tris-HCl, 25 mM NaCl, pH 7.5 中的神經(jīng)氨酸酶

隨附20 uL 和 60 uL 包裝大小：

5倍反應(yīng)緩沖液 250 mM 磷酸鈉，pH 6.0

比活性 >135 U/mg

活性 >5 U/ml

分子量 70,000 道爾頓

pH 范圍 4.5-7，Z佳 pH 6.0

推薦的緩沖液濃縮物為標(biāo)準(zhǔn)底物提供酶活性的最佳pH。如果由于糖蛋白的溶解度或活性要求而在非Z佳pH下進行糖苷酶處理，預(yù)計酶活性會有所降低。

建議用法：

向管中添加最多100 μg的糖蛋白或1 nmol的寡糖。

加水至14 μL。

添加4 μL 5X 反應(yīng)緩沖液。

添加2 μL α-(2-3, 6,8,9) 神經(jīng)氨酸酶。

在37°C下孵育1小時。

如果天然和去唾液酸化的蛋白質(zhì)之間的大小差異足夠大以便于檢測，可以通過SDS-PAGE監(jiān)測去唾液酸化。

注意：如果存在分支唾液酸，則需要更長的孵育時間。

特異性 切割所有非還原末端的分支和非分支唾液酸

比活性 定義為在37℃，pH 5.0條件下，每分鐘產(chǎn)生1 u mole的甲基傘形酮所需的酶量，從MU-NANA [2′-(4-甲基傘形基)-α-D-N-乙酰神經(jīng)氨酸]。

儲存 將酶存放在4℃。

純度 每批α-(2-3,6,8,9) 神經(jīng)氨酸酶都經(jīng)過以下測試以檢測污染的蛋白酶；10 μg的變性牛血清白蛋白與2 μL的酶孵育24小時。經(jīng)處理的BSA的SDS-PAGE分析顯示沒有降解跡象。

生產(chǎn)宿主菌株經(jīng)過廣泛測試，不產(chǎn)生任何可檢測的糖苷酶。

穩(wěn)定性 妥善儲存至少12個月穩(wěn)定。幾天暴露在常溫下不會降低活性。酶在37℃下至少保持一周活性。

QA-Bio-神經(jīng)氨酸酶Au文獻參考：

Corfield, A. P., H. Higa, J. C. Paulson and R. Schauer. The specificity of viral and bacterial sialidases for alpha(2-3) and alpha(2-6)-linked sialic acids in glycoproteins. Biochim Biophys Acta 744: 121-12 6 (1983).

Dwek, R. A., C. J. Edge, D. J. Harvey, M. R. Wormald and R. B. Parekh. Analysis of glycoprotein-associated oligosaccharides. Ann Rev Biochem 62: 65-100 (1993).

Kobata, A. Use of endo- and exoglycosidases for structural studies of glycoconjugates. Anal Biochem 100: 1-14 (1979).

Ohta, Y., Y. Tsukada and T. Sugimori. Purification and properties of neuraminidase isoenzymes in Arthrobacter ureafaciens mutant. J Biochem (Tokyo) 106: 1086- 1089 (1989).

Prime, S., J. Dearnley , A. M. Venton, R. B. Parekh and C. J. Edge. Oligosaccharide sequencing based on exo- and endoglycosidase digestion and liquid chromatographic analysis of the products. J Chromatogr A 720: 263-274 (1996).

Uchida, Y., Y. Tsukada and T. Sugimori. Enzymatic properties of neuraminidases from Arthrobacter ureafaciens. J Biochem (Tokyo) 86: 573-58 5 (1979).

艾美捷科技是QA-Bio的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。