除了嗜堿性粒細(xì)胞外，多形核白細(xì)胞（PMNs）的浮力密度遠(yuǎn)大于單核細(xì)胞，>1.085 g/ml。不幸的是，紅細(xì)胞的浮力密度往往在1.09 - 1.11 g/ml之間，這使得使用與單核細(xì)胞相似的密度屏障從全血中分離更加困難。為了克服這些困難，已經(jīng)開發(fā)了許多程序。

Polymorphprep^TM的高滲透壓導(dǎo)致紅細(xì)胞失水并收縮，從而增加了它們的有效浮力密度。這允許與右旋糖酐聚合的紅細(xì)胞通過濃密介質(zhì)迅速沉降。

由于介質(zhì)與紅細(xì)胞之間的滲透梯度隨著細(xì)胞進(jìn)一步沉入介質(zhì)而下降（即紅細(xì)胞在Polymorphprep^TM頂部的失水最大，并隨著它們進(jìn)一步沉降而逐漸減少） - 在密度屏障內(nèi)形成了一個(gè)三碘酸酯的梯度。PMNs在這個(gè)密度梯度中沉積，而單核細(xì)胞則留在樣品/介質(zhì)界面。

每批Polymorphprep都使用特定的LAL測(cè)試檢查內(nèi)毒素水平。我們的目標(biāo)是生產(chǎn)內(nèi)毒素水平低于或等于0.13 IU/ml的批次。

該方法僅對(duì)未稀釋的全血有效，對(duì)白細(xì)胞豐富的分?jǐn)?shù)無(wú)效。溫度對(duì)于獲得最佳結(jié)果很重要，因?yàn)闇囟茸兓瘯?huì)影響PolymorphprepTM溶液的密度和粘度。血樣和介質(zhì)的溫度應(yīng)保持在18-22攝氏度之間。

可以使用Coulter STKR細(xì)胞分析儀對(duì)Polymorphprep^TM分離的頂部和底部帶進(jìn)行分析。分析儀確定樣品中的細(xì)胞數(shù)量（縱坐標(biāo)）作為細(xì)胞體積（橫坐標(biāo)）的函數(shù)。相對(duì)細(xì)胞數(shù)量是特定體積的細(xì)胞數(shù)量，表示為每個(gè)樣品總數(shù)的分?jǐn)?shù)。

Polymorphprep頂部的細(xì)胞帶僅包含外周血單核細(xì)胞（PBMCs）。細(xì)胞帶本身可以分離成淋巴細(xì)胞（上層，1）和單核細(xì)胞（下層，2）。所有的PMNs都在底部的細(xì)胞帶中，被Polymorphprep溶液包圍。PMN帶被紅細(xì)胞污染的比例在總細(xì)胞數(shù)的2-6%之間。

艾美捷PROGEN-PolymorphPrep：

貨號(hào)    1895

數(shù)量 1 x 250 毫升

預(yù)期用途 僅供研究使用

產(chǎn)品描述 Polymorphprep?是一種現(xiàn)成的、無(wú)菌的、經(jīng)過內(nèi)毒素檢測(cè)的溶液，用于從未經(jīng)稀釋的全血中分離多形核白細(xì)胞（PMNs）。

該溶液含有三碘酸鈉和多糖

密度 1.113 ± 0.001 克/毫升

成分 三碘酸鈉 13.8% (w/v)，多糖 8.0% (w/v)

滲透壓 440-500 毫滲透壓/千克

內(nèi)毒素 < 1.0 歐盟單位/毫升

穩(wěn)定性與儲(chǔ)存 Polymorphprep?在保持溶液無(wú)菌并避免直接陽(yáng)光照射的條件下可穩(wěn)定保存3年。長(zhǎng)時(shí)間直接暴露在陽(yáng)光下會(huì)導(dǎo)致三碘酸鈉分子釋放碘。在日常使用該溶液時(shí)，這種影響是可以忽略不計(jì)的。Polymorphprep?應(yīng)儲(chǔ)存在室溫下（+4°C至+30°C）。

PROGEN-PolymorphPrep主要特征：

泛影酸鈉和多糖的現(xiàn)成、無(wú)菌和內(nèi)毒素檢測(cè)溶液

適用于從未稀釋的全血中分離人類多形核白細(xì)胞（粒細(xì)胞）

文獻(xiàn)參考：

Jia, L. J. et al. Aspergillus fumigatus hijacks human p11 to redirect fungal-containing phagosomes to non-degradative pathway. Cell Host Microbe 31, 373–388 (2023).

PROGEN，體外診斷試劑的制造商和供應(yīng)商。 主要產(chǎn)品線： 經(jīng)過質(zhì)檢驗(yàn)證的抗體、體外診斷產(chǎn)品、抗體噬菌體展示技術(shù)、密度梯度分離液和AAV(腺相關(guān)病毒）檢測(cè)試劑盒等。

艾美捷科技是PROGEN的中國(guó)代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。