天然蛋白酶K，產(chǎn)品代碼PROK和PROKS已停產(chǎn)，取而代之的是重組蛋白酶K，產(chǎn)品代碼PROKR和PROKRS。重組產(chǎn)品符合與天然產(chǎn)品相同的規(guī)格。   蛋白酶K是一種絲氨酸蛋白酶，對脂肪族、芳香族和其他疏水性氨基酸具有廣泛的特異性。PROK的分子量為27，000道爾頓，并且依賴于Ca2+。它不會被金屬離子螯合劑（如EDTA，巰基試劑，PCMB，TLCK或TPCK）滅活。它還在 0.5% SDS 中保留活性。它可以被PMSF或DFP抑制。   

作為Worthington全國總代理，艾美捷科技強烈推薦Worthington主要產(chǎn)品蛋白酶 K, Recombinant。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。  

穩(wěn)定性/存儲：

凍干粉在2-8°C下可穩(wěn)定保存一年。 50mM Tris-HCl、pH 8.0 和 1mM CaCl2 中的溶液在 2-8°C 下可穩(wěn)定保存數(shù)月。 儲存在2-8°C。  

蛋白酶 K, Recombinant相關產(chǎn)品：

無核酸酶白蛋白 脫氧核糖核酸酶 I （DP/D/DCLS/D2/DPFF/DPRF） 組蛋白 （H， NHL） 溶菌酶 （LY/LYSF） 核酸酶，微球菌 （NFCP） 核酸酶，S1 （中新/中核酸） 核酸，DNA，大腸桿菌，λ/片段，RNA磷酸酶，堿性（CAP/BAPF/BAPC/BAPSF/PC）磷酸二酯酶 I （VPH） 磷酸二酯酶 II （SPH） 逆轉(zhuǎn)錄酶，重組 HIV （RTHIV）核糖核酸酶 A （R/RAF/RASE/RS/RPDF）核糖核酸酶 T1，不含動物源性 （RT1S）  

蛋白酶 K, Recombinant測定：

方法 

蛋白酶K水解用尿素變性的血紅蛋白，并釋放Folin Postive氨基酸和肽，它們被確定為酪氨酸當量。1 單位在 1°C、pH 37.7 下釋放 5 μ 摩爾 Folin 陽性氨基酸，使用變性血紅蛋白作為底物。 

試劑

0.05 N HCl - 用試劑級水將 0.82 ml 濃度 HCl 稀釋至 200 ml。 

0.5 M NaOH - 將 4.0 gm NaOH 溶解在 200 ml 試劑級水中。 

緩沖底物 - 將2.0 gm血紅蛋白溶解在35 ml試劑級水中，加入36.0 gm尿素和16 ml 0.5 M NaOH。在室溫下攪拌 30 - 60 分鐘。加入0.618克硼酸并攪拌。用 7 N HCl 將 pH 值調(diào)節(jié)至 5.5，并將 q.s. 調(diào)節(jié)至 100 ml。 

酪氨酸標準品（2.5 nmol / L） - 將45.3mg酪氨酸溶解在100ml 0.05N HCl中。 

0.3 M 三氯乙酸 - 將 9.8 gm 三氯乙酸溶解在 200 ml 試劑級水中。

Folin試劑 - 將10毫升Folin-Ciocalteus苯酚試劑加入20毫升試劑級水中。 

酶

將10mg凍干材料溶解在1ml試劑級水中。使用前立即用水準備 1：1000 稀釋液。 

程序

標記空白、標準和測試的透明玻璃試管。加入 2.5 ml 緩沖液底物，并在 5°C 下孵育 37 分鐘。 通過將0.2ml酪氨酸標準品加入標準管中，0.2ml樣品加入測試中，0.2ml0.05N HCl加入空白開始反應。在 10°C 下孵育 37 分鐘。 通過加入5.0ml三氯乙酸停止反應。混合，然后將0.2ml樣品加入空白和標準品中，并向測試中加入0.2ml 0.05N HCl。混合并在室溫下靜置10分鐘，過濾并移液到1.0ml濾液，2.0ml 0.5N NaOH和0.6mlFolin試劑的試管中。混合均勻。靜置 15 分鐘，閱讀 A₅₇₈納米。

蛋白酶 K, Recombinant部分引用文獻：

Bernabeu, C. , Conde, P. , Vasquez, D. and Ballesta, J. Peptidyl Transferase of Bacterial Ribosome: Resistance to Proteinase K , Eur J Biochem 93 , 527 , 1979 Brdicka, D. and Krebs, W. Localization of Enzymes by Means of Proteases , Biochim Biophys Acta 297 , 203 , 1972 Crowe, J. , Cooper, H. , Smith, M. , Sims, M. , Parker, D. and Gewert, D. Improved Cloning Efficiency of Polymerase Chain Reaction (PCR) Products After Proteinase-K Digestion , Nucleic Acids Res 19 , 184 , 1991  

酶是Worthington的主要產(chǎn)品線。從技術上講，Worthington實際上并不制造酶，而是從各種動植物組織和各種微生物來源（如細菌、真菌和霉菌）中提取酶。根據(jù)該酶在材料中的普遍性選擇特定酶的起始材料。例如，一種功能涉及使肌肉工作的酶將主要存在于肌肉組織中，因此起始材料可能是兔肌肉或豬心；參與發(fā)酵的酶最好在酵母中找到。 

Worthington使用的一些動物組織包括牛胰腺、豬腎、牛眼、馬肝、兔肌肉、牛肝、豬心、馬血和小牛腸。各種蛋白質(zhì)也從辣根、紅薯、杏仁和美洲商陸中提取。一些產(chǎn)品是從大腸桿菌、幾種梭狀芽胞桿菌和各種其它細菌中分離出來的。還使用酵母、蘑菇、全脂牛奶和雞蛋等。   Worthington是一家通過的ISO9001認證的家族企業(yè)。主要生產(chǎn)用于生物技術和生命科學研究，診斷，生物制藥和生物加工應用的高質(zhì)量純化酶，蛋白質(zhì)，核酸和試劑盒。作為生命科學領域知名的酶類供應商，以及細胞分離酶的專家級公司，其核心酶產(chǎn)品包括：膠原蛋白酶，脫氧核糖核酸酶I，彈性蛋白酶，木瓜蛋白酶，核糖核酸酶，胰蛋白酶等。