基于已知對(duì)泛素具有親和力的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域，串聯(lián)泛素結(jié)合體（TUBEs）已被開發(fā)用于分離和鑒定泛素化蛋白。TUBEs對(duì)多泛素鏈的親和力比單個(gè)泛素結(jié)合相關(guān)結(jié)構(gòu)域（UBA）高出多達(dá)1000倍。此外，TUBEs對(duì)多泛素化蛋白具有保護(hù)作用，使其即使在低豐度條件下也能被檢測到。這些特性有效地“捕獲”了處于多泛素化狀態(tài)的蛋白質(zhì)。LifeSensors開發(fā)了HRP-TUBE 2，用于快速、便捷地檢測多泛素鏈和多泛素化底物。

艾美捷[干冰]TUBE 2(HRP標(biāo)簽)：

貨號(hào)：UM-0312-0050  

純度：通過SDS-PAGE檢測，純度>95%  

分子量：38.5 kDa + HRP  

標(biāo)簽：辣根過氧化物酶（HRP）  

物理狀態(tài)：液體  

數(shù)量：50 ?g  

儲(chǔ)存：-80°C。避免反復(fù)凍融。

應(yīng)用：

通過配體印跡法檢測多泛素化蛋白。  

使用各種現(xiàn)成的生物素支持物從細(xì)胞系、組織和器官中捕獲多泛素化蛋白。  

通過組織化學(xué)法進(jìn)行多泛素的原位標(biāo)記檢測。

[干冰]TUBE 2(HRP標(biāo)簽)實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

連接有HRP的TUBEs能夠通過遠(yuǎn)西方印跡法檢測到HeLa細(xì)胞裂解液中的多泛素化鏈和多泛素化蛋白。將TUBE-HRP稀釋至5%脫脂奶粉PBS-T溶液中的1:4000，成功檢測到不同加載量（每孔500、250、10、50 ng）的-K48和-K63多泛素化鏈。TUBE-HRP還成功檢測到來自HeLa細(xì)胞裂解液（每孔加載30 ?g）的多泛素化特征。如質(zhì)量控制圖像所示，經(jīng)過蛋白酶體抑制劑（PI）處理的細(xì)胞表現(xiàn)出增強(qiáng)的泛素化特征，這與預(yù)期一致，當(dāng)使用1:4000稀釋的TUBE2 HRP進(jìn)行檢測時(shí)。

文獻(xiàn)參考：

Donaghy, Ryan, et al. “The BRISC deubiquitinating enzyme complex limits hematopoietic stem cell expansion by regulating JAK2 K63-ubiquitination.” Blood, vol. 133, no. 14, 2019, pp. 1560-1571.

Lv, Kaosheng, et al. “CBL family E3 ubiquitin ligases control JAK2 ubiquitination and stability in

hematopoieticstem cells and myeloid malignancies.” Genes & Development, vol. 31, 2017, pp. 1007-1031.