一、產(chǎn)品概述

Asprosin 是一種由纖維蛋白原基因（FBN1）編碼的蛋白質(zhì)，在代謝調(diào)節(jié)和能量平衡中具有重要作用。本試劑盒通過夾心法檢測 Asprosin，為相關(guān)研究提供了可靠的工具。

Abbexa小鼠Asprosin ELISA試劑盒是一種用于體外定量檢測小鼠血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液及其他生物液體中小鼠 Asprosin 濃度的試劑盒。該試劑盒基于酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）技術(shù)，具有高特異性和靈敏度，適用于小鼠樣本的檢測。艾美捷作為Abbexa中國區(qū)代理商，為大家整理了一份小鼠Asprosin ELISA試劑盒中文說明書。

Abbexa小鼠Asprosin ELISA試劑盒（abx585287）基本信息

目標(biāo)蛋白：Asprosin

反應(yīng)性：小鼠

檢測方法：比色法

檢測范圍：78 pg/ml - 5000 pg/ml

靈敏度：< 32 pg/ml

標(biāo)準(zhǔn)品形式：凍干

樣本類型：血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液及其他生物液體

檢測類型：定量

檢測方法：夾心法（Sandwich）

二、試劑盒組成

本試劑盒包含以下主要組分：

預(yù)包被的 96 孔微孔板：預(yù)先包被有特異性抗體，用于捕獲樣本中的 Asprosin。

標(biāo)準(zhǔn)品：用于建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，以定量分析樣本中的 Asprosin 含量。

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液：用于稀釋標(biāo)準(zhǔn)品溶液，以獲得不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)系列。

洗滌緩沖液：用于在各步驟中清洗微孔板，去除未結(jié)合的成分，減少背景干擾。

檢測試劑 A 和 B：用于夾心法檢測，結(jié)合樣本中的 Asprosin。

稀釋液 A 和 B：分別用于稀釋檢測試劑 A 和 B，確保其在合適的工作濃度下發(fā)揮作用。

TMB 底物：用于顯色反應(yīng)，其顏色變化與 Asprosin 的含量呈正比關(guān)系。

終止液：用于終止反應(yīng)，使顏色變化固定，便于在特定波長下測量吸光度。

封板膜：用于在反應(yīng)過程中封閉微孔板，防止蒸發(fā)和交叉污染。

三、存儲(chǔ)與有效期

運(yùn)輸條件：試劑盒在運(yùn)輸過程中應(yīng)保持在 4℃。

存儲(chǔ)條件：收到后，請按照試劑盒說明書中的存儲(chǔ)說明進(jìn)行存儲(chǔ)。建議存儲(chǔ)于 4℃。

有效期：本試劑盒的有效期至少為 6 個(gè)月。如需更長時(shí)間的有效期（最長可達(dá) 12 個(gè)月），請?zhí)崆奥?lián)系A(chǔ)bbexa。

穩(wěn)定性：試劑盒的穩(wěn)定性由活性損失率決定。在適當(dāng)?shù)拇鎯?chǔ)條件下，有效期內(nèi)的損失率小于 5%。為減少性能波動(dòng)，應(yīng)嚴(yán)格控制操作流程和實(shí)驗(yàn)室條件。強(qiáng)烈建議整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程由同一位用戶完成。

四、實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒采用夾心 ELISA 技術(shù)。預(yù)先在 96 孔板上包被有特異性抗體。將標(biāo)準(zhǔn)品、測試樣本加入到孔中并孵育，樣本中的 Asprosin 與包被抗體結(jié)合。隨后加入檢測試劑 A 和 B，形成夾心復(fù)合物。加入 TMB 底物后，只有含有 Asprosin 的孔才會(huì)產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物，加入酸性終止液后會(huì)變?yōu)辄S色。黃色的強(qiáng)度與結(jié)合在板上的 Asprosin 量成正比。在微孔板讀數(shù)儀上以 450nm 波長光譜光度法測量 OD 值，從而可以計(jì)算出 Asprosin 的濃度。

五、實(shí)驗(yàn)步驟

1.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)、測試樣本和對照孔：在預(yù)包被的微孔板上分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)孔、測試樣本孔和對照（零）孔，并記錄它們的位置。建議每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)和樣本至少進(jìn)行雙份測量。

2.加樣：向標(biāo)準(zhǔn)孔中加入 100uL 稀釋后的標(biāo)準(zhǔn)品，向?qū)φ眨悖┛字屑尤?nbsp;100uL 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液，向樣本孔中加入 100uL 稀釋后的樣本。在 37℃下孵育 1 小時(shí)。

3.加入檢測試劑 A：向每個(gè)孔中加入 100uL 檢測試劑 A 工作溶液。用封板膜封住微孔板，在 37℃下孵育 1 小時(shí)。

4.洗滌：移除封板膜，棄去溶液。用 1X 洗滌緩沖液洗滌微孔板 3 次。

5.加入檢測試劑 B：向每個(gè)孔中加入 100uL 檢測試劑 B 工作溶液，封板后在 37℃下孵育 30 分鐘。

6.再次洗滌：棄去溶液，用洗滌緩沖液按前一步驟所述方法洗滌微孔板 5 次。

7.加入 TMB 底物：向每個(gè)孔中加入 90uL TMB 底物。用封板膜封住微孔板，在 37℃下孵育 10 - 20 分鐘。避免光照。孵育時(shí)間僅供參考，最佳時(shí)間應(yīng)由最終用戶確定。不要超過 30 分鐘。

8.加入終止液：向每個(gè)孔中加入 50uL 終止液。立即在 450nm 波長下讀取吸光度。

六、結(jié)果計(jì)算

本實(shí)驗(yàn)為夾心 ELISA，樣本中 Asprosin 的濃度與其測量的吸光度呈正比關(guān)系。計(jì)算每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)和樣本的平均 OD450 值，并減去對照（零）孔的平均 OD450 值。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，以標(biāo)準(zhǔn)濃度（X 軸）和相對 OD450 值（Y 軸）為坐標(biāo)。可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線上插值計(jì)算出樣本中 Asprosin 的濃度。

七、實(shí)驗(yàn)精密度

1.批內(nèi)精密度（同一批次內(nèi)的精密度）：對低、中、高三個(gè)水平的 Asprosin 樣本進(jìn)行 20 次測試，均在同一塊微孔板上進(jìn)行。變異系數(shù)（CV%）=（標(biāo)準(zhǔn)差/平均值）× 100。批內(nèi)精密度：CV < 10%。

2.批間精密度（不同批次之間的精密度）：對低、中、高三個(gè)水平的 Asprosin 樣本在 3 塊不同的微孔板上進(jìn)行測試，每塊微孔板上各有 8 個(gè)重復(fù)樣本。批間精密度：CV < 12%。

八、注意事項(xiàng)

1.僅限研究使用：本產(chǎn)品僅供研究使用，不得用于診斷或治療用途。

2.范圍和靈敏度可能發(fā)生變化：范圍和靈敏度可能會(huì)發(fā)生變化。

3.樣本濃度要求：為獲得準(zhǔn)確結(jié)果，樣本濃度必須稀釋至試劑盒的中等范圍內(nèi)。

4.樣本類型優(yōu)化：請注意，Abbexa的試劑盒針對天然樣本的檢測進(jìn)行了優(yōu)化，而不是重組蛋白。Abbexa無法保證檢測重組蛋白，因?yàn)樗鼈兛赡芫哂信c天然蛋白不同的序列或三級結(jié)構(gòu)。

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