一、產(chǎn)品概述

Abbexa人KHDC1類蛋白（KHDC1L）ELISA試劑盒是一種用于體外定量檢測人類組織勻漿、細(xì)胞裂解液及其他生物液體中人類KHDC1類蛋白（KHDC1L）濃度的試劑盒。該試劑盒基于酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）技術(shù)，具有高特異性和靈敏度，適用于人類樣本的檢測。艾美捷作為Abbexa中國區(qū)代理商，為大家整理了一份人KHDC1類蛋白（KHDC1L）ELISA試劑盒中文說明書。

Abbexa人KHDC1類蛋白（KHDC1L）ELISA試劑盒（abx529898）基本信息
-目標(biāo)蛋白：KHDC1類蛋白（KHDC1L）

-反應(yīng)性：人類

-檢測方法：比色法

-檢測范圍：0.156ng/ml-10ng/ml

-靈敏度：<0.07ng/ml

-標(biāo)準(zhǔn)品形式：凍干

-樣本類型：組織勻漿、細(xì)胞裂解液及其他生物液體

-檢測類型：定量

-檢測方法：夾心法（Sandwich）

二、試劑盒組成

本試劑盒包含以下主要組分：

-預(yù)包被的96孔微孔板：預(yù)先包被有特異性抗體，用于捕獲樣本中的KHDC1L。

-標(biāo)準(zhǔn)品：用于建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，以定量分析樣本中的KHDC1L含量。

-標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液：用于稀釋標(biāo)準(zhǔn)品溶液，以獲得不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)系列。

-洗滌緩沖液：用于在各步驟中清洗微孔板，去除未結(jié)合的成分，減少背景干擾。

-檢測試劑A和B：用于夾心法檢測，結(jié)合樣本中的KHDC1L。

-稀釋液A和B：分別用于稀釋檢測試劑A和B，確保其在合適的工作濃度下發(fā)揮作用。

-TMB底物：用于顯色反應(yīng)，其顏色變化與KHDC1L的含量呈正比關(guān)系。

-終止液：用于終止反應(yīng)，使顏色變化固定，便于在特定波長下測量吸光度。

-封板膜：用于在反應(yīng)過程中封閉微孔板，防止蒸發(fā)和交叉污染。

三、存儲與有效期

-運(yùn)輸條件：試劑盒在運(yùn)輸過程中應(yīng)保持在4℃。

-存儲條件：收到后，請按照試劑盒說明書中的存儲說明進(jìn)行存儲。建議存儲于4℃。

-有效期：本試劑盒的有效期為6個月。

-穩(wěn)定性：試劑盒的穩(wěn)定性由活性損失率決定。在適當(dāng)?shù)拇鎯l件下，有效期內(nèi)的損失率小于5%。為減少性能波動，應(yīng)嚴(yán)格控制操作流程和實(shí)驗(yàn)室條件。強(qiáng)烈建議整個實(shí)驗(yàn)過程由同一位用戶完成。

四、實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒采用夾心ELISA技術(shù)。預(yù)先在96孔板上包被有特異性抗體。將標(biāo)準(zhǔn)品、測試樣本加入到孔中并孵育，樣本中的KHDC1L與包被抗體結(jié)合。隨后加入檢測試劑A和B，形成夾心復(fù)合物。加入TMB底物后，只有含有KHDC1L的孔才會產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物，加入酸性終止液后會變?yōu)辄S色。黃色的強(qiáng)度與結(jié)合在板上的KHDC1L量成正比。在微孔板讀數(shù)儀上以450nm波長光譜光度法測量OD值，從而可以計(jì)算出KHDC1L的濃度。

五、實(shí)驗(yàn)步驟

1.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)、測試樣本和對照孔：在預(yù)包被的微孔板上分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)孔、測試樣本孔和對照（零）孔，并記錄它們的位置。建議每個標(biāo)準(zhǔn)和樣本至少進(jìn)行雙份測量。

2.加樣：向標(biāo)準(zhǔn)孔中加入50uL稀釋后的標(biāo)準(zhǔn)品，向?qū)φ眨悖┛字屑尤?0uL標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液，向樣本孔中加入50uL稀釋后的樣本。

3.加入檢測試劑A：立即向每個孔中加入50uL檢測試劑A工作溶液。用封板膜封住微孔板，在37℃下孵育1小時。

4.洗滌：移除封板膜，棄去溶液。用1X洗滌緩沖液洗滌微孔板3次。

5.加入檢測試劑B：向每個孔中加入100uL檢測試劑B工作溶液，封板后在37℃下孵育30分鐘。

6.再次洗滌：棄去溶液，用洗滌緩沖液按前一步驟所述方法洗滌微孔板5次。

7.加入TMB底物：向每個孔中加入90uLTMB底物。用封板膜封住微孔板，在37℃下孵育10-20分鐘。避免光照。孵育時間僅供參考，最佳時間應(yīng)由最終用戶確定。不要超過30分鐘。

8.加入終止液：向每個孔中加入50uL終止液。立即在450nm波長下讀取吸光度。

六、結(jié)果計(jì)算

本實(shí)驗(yàn)為夾心ELISA，樣本中KHDC1L的濃度與其測量的吸光度呈正比關(guān)系。創(chuàng)建一個以標(biāo)準(zhǔn)濃度（y軸）和平均吸光度（x軸）為坐標(biāo)的圖表。通過標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)繪制最佳擬合趨勢線。可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線上插值計(jì)算出樣本中KHDC1L的濃度。

七、注意事項(xiàng)

1.僅限研究使用：本產(chǎn)品僅供研究使用，不得用于診斷或治療用途。

2.范圍和靈敏度可能發(fā)生變化：范圍和靈敏度可能會發(fā)生變化。

3.樣本濃度要求：為獲得準(zhǔn)確結(jié)果，樣本濃度必須稀釋至試劑盒的中等范圍內(nèi)。

4.樣本類型優(yōu)化：請注意，Abbexa的試劑盒針對天然樣本的檢測進(jìn)行了優(yōu)化，而不是重組蛋白。Abbexa無法保證檢測重組蛋白，因?yàn)樗鼈兛赡芫哂信c天然蛋白不同的序列或三級結(jié)構(gòu)。

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