確定細(xì)胞群中絲狀肌動(dòng)蛋白 （F-肌動(dòng)蛋白） 含量與游離球狀肌動(dòng)蛋白 （G-肌動(dòng)蛋白） 含量的最可重復(fù)和最準(zhǔn)確的方法是使用 F-肌動(dòng)蛋白和 G-肌動(dòng)蛋白細(xì)胞組分的蛋白質(zhì)印跡定量 （1-4）。一般方法是在F-肌動(dòng)蛋白穩(wěn)定緩沖液中勻漿細(xì)胞，然后離心以將F-肌動(dòng)蛋白從G-肌動(dòng)蛋白池中分離出來。然后用SDS-PAGE分離餾分，并通過蛋白質(zhì)印跡定量肌動(dòng)蛋白。最終結(jié)果給出了確定細(xì)胞骨架中摻入的F-肌動(dòng)蛋白與細(xì)胞質(zhì)中發(fā)現(xiàn)的G-肌動(dòng)蛋白比例的最準(zhǔn)確方法。該試劑盒包含執(zhí)行該測定所需的所有試劑。  

作為Cytoskeleton全國總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦Cytoskeleton熱銷產(chǎn)品G-Actin：F-Actin 體內(nèi)分析試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。   

Cytoskeleton公司目前主要的產(chǎn)品有340余種，其產(chǎn)品主要覆蓋肌動(dòng)蛋白，微管蛋白，馬達(dá)蛋白，小G蛋白，細(xì)胞外基質(zhì)，活細(xì)胞成像等相關(guān)領(lǐng)域，提供對(duì)應(yīng)的蛋白質(zhì)，抗體，檢測與分析試劑盒，并且產(chǎn)品線還在不斷的擴(kuò)大中。

G-Actin：F-Actin 體內(nèi)分析試劑盒用途：

研究藥物化合物對(duì)G-肌動(dòng)蛋白與F-肌動(dòng)蛋白比例的影響。 

研究突變細(xì)胞系與其親本細(xì)胞系對(duì)G-肌動(dòng)蛋白與F-肌動(dòng)蛋白比例變化的影響。 

研究環(huán)境的物理改變對(duì)G-肌動(dòng)蛋白與F-肌動(dòng)蛋白比例的影響。

G-Actin：F-Actin 體內(nèi)分析試劑盒內(nèi)容：該試劑盒包含足夠的材料，可用于 30-100 次檢測，具體取決于檢測設(shè)置，并包括用于陽性和陰性對(duì)照的試劑。包括以下組件： 

裂解和F-肌動(dòng)蛋白穩(wěn)定緩沖液 ATP （貨號(hào) # BSA04) 

蛋白酶抑制劑混合物（貨號(hào) # PIC02) 

F-肌動(dòng)蛋白增強(qiáng)對(duì)照溶液 

F-肌動(dòng)蛋白解聚對(duì)照溶液 對(duì)照 

G-肌動(dòng)蛋白標(biāo)準(zhǔn)品（貨號(hào) # AKL99) 

抗肌動(dòng)蛋白單克隆抗體（克隆 7A8.2.1）（貨號(hào) # AAN02-S) 

SDS 樣品緩沖液 （5 x） 二甲基亞胺 

包含詳細(xì)協(xié)議和廣泛故障排除指南的手冊(cè)

G-Actin：F-Actin 體內(nèi)分析試劑盒示例結(jié)果：

在3°C/3%CO 50下，瑞士10T37細(xì)胞在DMEM / 5%FBS中生長至2%匯合度。 細(xì)胞未經(jīng)處理（泳道1P和1S）或用0.1μM肌動(dòng)蛋白聚合藥物茉莉內(nèi)酯在30°C / 37%CO 5（泳道2P和2S）下處理2分鐘。將細(xì)胞裂解并加工成上清液（S）和沉淀（P）級(jí)分，并根據(jù)G-肌動(dòng)蛋白/F-肌動(dòng)蛋白體內(nèi)檢測試劑盒說明通過蛋白質(zhì)印跡定量進(jìn)行分析。

圖1：在未經(jīng)處理的瑞士3T3細(xì)胞中，45%的肌動(dòng)蛋白是可溶性G-肌動(dòng)蛋白（1S），55%是不溶性F-肌動(dòng)蛋白（1P）。這與已發(fā)表的數(shù)據(jù)一致（3）。圖2：在用肌動(dòng)蛋白聚合藥物茉莉內(nèi)酯處理的瑞士3T3細(xì)胞中，只有5%的肌動(dòng)蛋白保留在不溶性G-肌動(dòng)蛋白部分（2S）中，而95%存在于不溶性F-肌動(dòng)蛋白顆粒部分（2P）中。泳道 50、20 和 10 代表 G-肌動(dòng)蛋白標(biāo)準(zhǔn)的 50ng、20ng 和 10 ng。M代表分子量標(biāo)志物（分子量顯示在印跡的右側(cè)）。   

引文： 

Milligan R.A. et al. 1990. Molecular structure of F-actin and location of surface binding sites. Nature 348, 217-221. 

Dos Remedios C.G. et al. 2003. Actin binding proteins: regulation of cytoskeletal microfilaments. Physiol. Rev. 83, 433-473. 

Phillips D.R. et al. 1980. Identification of membrane proteins mediating the interaction of human platelets. J. Cell Biol. 86, 77-86. Kim H.R. et al. 2008. 

Cytoskeletal remodeling in differentiated vascular smooth muscle is actin isoform dependent and stimulus dependent. Am. J. Physiol. Cell Physiol. 295, C768-C778. 

Cytoskeleton專注于生物化學(xué)和細(xì)胞過程研究中的純化蛋白和便捷試劑盒開發(fā)與生產(chǎn)。公司提供藥物篩選、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)錄后修飾（PTM）、細(xì)胞骨架研究相關(guān)的系列試劑盒和產(chǎn)品，尤其以細(xì)胞骨架相關(guān)研究見長，既能滿足于樣品較少的科學(xué)研究，也可以用于小規(guī)模篩選研究和高通量大規(guī)模篩選研究。此外，公司還提供微管蛋白，肌動(dòng)蛋白，小G蛋白，GAPs，GEFs等現(xiàn)有產(chǎn)品的藥物篩選服務(wù)。