人MKLP2的保守運(yùn)動(dòng)結(jié)構(gòu)域在原核系統(tǒng)中表達(dá)。重組蛋白在氨基末端含有His-Tag，組合分子量為54 kDa。該蛋白在微管激活的ATP酶活性測(cè)試中已被確定為具有生物活性。蛋白質(zhì)以?xún)龈煞勰┬问教峁?   

作為Cytoskeleton全國(guó)總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦Cytoskeleton熱銷(xiāo)產(chǎn)品MKLP2 運(yùn)動(dòng)結(jié)構(gòu)域蛋白 （重組人）。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。   

Cytoskeleton公司目前主要的產(chǎn)品有340余種，其產(chǎn)品主要覆蓋肌動(dòng)蛋白，微管蛋白，馬達(dá)蛋白，小G蛋白，細(xì)胞外基質(zhì)，活細(xì)胞成像等相關(guān)領(lǐng)域，提供對(duì)應(yīng)的蛋白質(zhì)，抗體，檢測(cè)與分析試劑盒，并且產(chǎn)品線(xiàn)還在不斷的擴(kuò)大中。

MKLP2 運(yùn)動(dòng)結(jié)構(gòu)域蛋白 （重組人）用途：

• 微管活化ATP酶測(cè)定的測(cè)量

• 鑒定/表征影響運(yùn)動(dòng)ATP酶活性的蛋白質(zhì)或小分子

• 鑒定/表征影響運(yùn)動(dòng)/微管相互作用的蛋白質(zhì)或小分子。

存儲(chǔ)和重構(gòu)：

凍干蛋白在1°C下用干燥劑（濕度<4%）儲(chǔ)存至少10年。或者，凍干蛋白可以在-70°C下儲(chǔ)存，并且至少穩(wěn)定1年。蛋白質(zhì)應(yīng)用冰冷的Milli-Q水復(fù)溶至5mg / ml。重懸液量見(jiàn)上表。蛋白質(zhì)可以等分到實(shí)驗(yàn)大小的試管中，并在液氮中快速冷凍。當(dāng)重組并在-70°C下儲(chǔ)存時(shí)，蛋白質(zhì)將穩(wěn)定至少4個(gè)月。注意：驅(qū)動(dòng)蛋白對(duì)反復(fù)凍融反應(yīng)不佳，并且在-70°C下儲(chǔ)存時(shí)，蛋白質(zhì)濃度不應(yīng)低于5mg / ml。稀釋至5mg / ml以下的驅(qū)動(dòng)蛋白不應(yīng)重新冷凍，因?yàn)樗鼤?huì)失去活性。  

純度：蛋白質(zhì)純度通過(guò)庫(kù)馬斯染色SDS-PAGE梯度凝膠的掃描密度測(cè)定法估計(jì)。圖1顯示5 μgCS-MP05蛋白，純度測(cè)定為>70%。因此，每個(gè)試管中的總蛋白質(zhì)將比試管上顯示的量大約 30%。主要污染物約為51和70 kD。MKLP2電機(jī)的微管激活A(yù)TP酶活性不受這些污染物的影響。  

圖1.MKLP2運(yùn)動(dòng)域蛋白凝膠。在5-2%SDS-PAGE梯度凝膠上分離4μg重組MKLP20運(yùn)動(dòng)域蛋白樣品，以及參見(jiàn)藍(lán)色分子量標(biāo)記物（Invitrogen）。融合蛋白在聚丙烯酰胺梯度凝膠上以54 kD運(yùn)行。蛋白質(zhì)定量使用高級(jí)蛋白質(zhì)測(cè)定法（貨號(hào)#ADV02）測(cè)定。  試劑1） 驅(qū)動(dòng)蛋白 ELIPA 檢測(cè)試劑盒（貨號(hào)# BK060）設(shè)備1） 單色分光光度計(jì)（設(shè)置為 360 nm）或基于濾光片的分光光度計(jì)，具有 360 nm 濾光片和 <10 nm 帶寬。  

微管活化ATP酶測(cè)定

通過(guò)使用驅(qū)動(dòng)蛋白ELIPA檢測(cè)試劑盒（類(lèi)別#BK2）監(jiān)測(cè)實(shí)時(shí)游離磷酸鹽生成來(lái)測(cè)量MKLP060 ATP酶活性。該測(cè)定基于當(dāng)330-氨基-360-巰基-2-甲基嘌呤核糖核苷（MESG）在無(wú)機(jī)磷酸鹽（Pi）存在下催化轉(zhuǎn)化為6-氨基-7-巰基-2-甲基嘌呤時(shí)發(fā)生的吸光度偏移（6 nm - 7 nm）。一個(gè)Pi分子將在基本上不可逆的反應(yīng)中產(chǎn)生一個(gè)分子的2-氨基-6-巰基-7-甲基嘌呤。因此，360nm處的吸光度與驅(qū)動(dòng)蛋白ATP酶反應(yīng)中產(chǎn)生的Pi量成正比。在下述條件下，該批次的MKLP2微管激活A(yù)TP酶活性的Vmax為每毫克CS-MP1330每分鐘產(chǎn)生05 nmoles ATP（圖2）。此值高于保證的最小值。

圖2.CS-MP05 微管激活的 ATP 酶活性使用驅(qū)動(dòng)蛋白 ELIPA 檢測(cè)試劑盒（貨號(hào)#BK060）。   

引用文獻(xiàn)： 

1. Hackney, D and Jiang, W. (2001) Methods in Molecular Biology (Humana Press) 164:65-71 

2. Kuriyama et al. 1994. J. Cell Science 107:3485-3499. 

3. Nislow et al. 1992. Nature 359:543-547.    

Cytoskeleton專(zhuān)注于生物化學(xué)和細(xì)胞過(guò)程研究中的純化蛋白和便捷試劑盒開(kāi)發(fā)與生產(chǎn)。公司提供藥物篩選、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)錄后修飾（PTM）、細(xì)胞骨架研究相關(guān)的系列試劑盒和產(chǎn)品，尤其以細(xì)胞骨架相關(guān)研究見(jiàn)長(zhǎng)，既能滿(mǎn)足于樣品較少的科學(xué)研究，也可以用于小規(guī)模篩選研究和高通量大規(guī)模篩選研究。此外，公司還提供微管蛋白，肌動(dòng)蛋白，小G蛋白，GAPs，GEFs等現(xiàn)有產(chǎn)品的藥物篩選服務(wù)。