疫苗即是通過誘導體液免疫和細胞免疫達到預防相應傳染病的目的。因此，中和抗體和細胞免疫也是病毒疫苗有效性評價中非常重要的指標。那么哪種方法可以評估疫苗引起的體液免疫和細胞免疫呢？ELISPOT可以給你答案：

酶聯(lián)免疫斑點檢測（Enzyme-linked Immunospot Assay，ELISPOT）是將細胞培養(yǎng)技術和ELISA技術相結合，可以原位地檢測培養(yǎng)細胞體外分泌蛋白的高靈敏分析技術。根據(jù)技術原理，主要分為T細胞與B細胞ELISpot兩種。其中T細胞ELISpot主要用于檢測刺激后細胞所分泌的痕量細胞因子，而B細胞ELISpot主要用于檢測抗體分泌B細胞的頻率。

IFN-γ ELISpot檢測方法

IFN-γ作為免疫活性細胞分泌的細胞因子在誘導抗病毒免疫中起著重要的免疫調理作用，包括激活細胞毒性T淋巴細胞（cytotoxic lymphocyte,CTL）、自然殺傷細胞（natural killer cell，NK）細胞和吞噬細胞等，而在疫苗免疫后機體產(chǎn)生IFN-γ的水平實際上反映輔助性T細胞的活動。因此，檢測IFN-γ的水平就是間接地檢測輔助性T細胞活性。目前，檢測IFN-γ的水平已經(jīng)逐漸代替各種傳統(tǒng)的細胞免疫檢測手段，目前也已成為疫苗引起的細胞免疫效應評估的“金標準”。

Elisplot陽性對照的設置問題：

為了使實驗結果更具說服力，大部分實驗都需要設置對照組，通過對照組與實驗組的比對分析，以排除無關變量的影響，Elisplot檢測也一樣，通常一次嚴謹?shù)腅LISpot實驗通常需要設置以下三種對照：

陽性對照——細胞經(jīng)特異性抗原或多克隆抗體刺激  用來確定試劑盒正常工作，細胞功能完整；排除假陰性結果

陰性對照——細胞不經(jīng)刺激  用來確定自發(fā)分泌因子的細胞個數(shù)；排除假陽性結果

背景對照——不加細胞和其他所有試劑  用來排除試劑或其他介質的影響產(chǎn)生的斑點；排除假陽性結果

產(chǎn)品推薦：

 1、B細胞ELISpot檢測指標包括人，非人靈長類，小鼠，牛、豬等種屬的IgG，IgA，IgM以及IgE，下表僅列出人的做為參考，其他種屬的B細胞ELISpot檢測指標，詳詢艾美捷科技。

2、提供各種不同種屬的IFN-γ ELISpot試劑盒

3、提供開發(fā)的肽庫可以作為T細胞的抗原特異性陽性對照，且所有肽庫都經(jīng)過驗證，都可用于ELISpot、FluoroSpot和FC。