帶你了解miRNA酶聯(lián)免疫分析針對(duì)樣本中分離的miRNA進(jìn)行定量和雙尾RT-qPCR技術(shù)針對(duì)總的miRNA和piRNA的定量。MicroRNA（miRNA）是小的非編碼RNA分子，可通過(guò)沉默靶mRNA從而來(lái)調(diào)節(jié)基因翻譯。 它們實(shí)際上參與了所有生物過(guò)程。大量研究表明，miRNA是許多人類病理學(xué)中有潛力的診斷和預(yù)后生物標(biāo)志物。

miRNA酶聯(lián)免疫分析用于miRNA絕對(duì)定量，miREIA檢測(cè)原理：將生物素標(biāo)記的特異性DNA寡核苷酸與樣本中分離出的miRNA雜交。 然后將DNA / RNA雜交體轉(zhuǎn)移到固相上，固相涂有對(duì)完美匹配的RNA / DNA-生物素雜交體的特異單克隆抗體。然后將洗滌后的固相與鏈霉親和素-HRP偶聯(lián)物一起孵育，并通過(guò)發(fā)色底物?3,3'，5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）進(jìn)行顯色觀察，吸光度與血液樣本中存在的特定miRNA種類的濃度成比。

BioVendor專利產(chǎn)品——雙尾RT-qPCR技術(shù)

解決傳統(tǒng)microRNA PCR檢測(cè)方法的缺點(diǎn)，雙尾RT-qPCR技術(shù)具有獨(dú)特的RT引物機(jī)制，與其他方法相比，可提供出色的靈敏度和特異性。雙尾RT-qPCR技術(shù)已被開發(fā)用于總的miRNA和piRNA的定量。

產(chǎn)品推薦：

一、miREIA試劑盒對(duì)從全血，HeLa細(xì)胞，外周血單核細(xì)胞，結(jié)直腸癌組織，關(guān)節(jié)滑液，唾液和尿液樣本中分離的miRNA進(jìn)行定量

二、總的miRNA和piRNA的定量

雙尾RT-qPCR原理：與使用單個(gè)結(jié)合探針不同，雙尾PCR使用兩個(gè)半探針，它們分別結(jié)合到不同的microRNA片段上，這些片段通過(guò)折疊的系鏈連接。雖然每個(gè)半探針本身都很短, 無(wú)法結(jié)合到microRNA上，但當(dāng)兩個(gè)半探針互補(bǔ)時(shí)，它們會(huì)協(xié)同結(jié)合，這種結(jié)合的特異性是非常高的，因?yàn)樵诙贪胩结樦绣e(cuò)配的影響非常大。然后可以使用兩個(gè)特定序列引物對(duì)形成的cDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，用SYBR進(jìn)行檢測(cè)。