SYSY 的抗 P2Y12 抗體：提高免疫組化的精度

SYSY 開發(fā)了一種高度特異性的小鼠抗P2Y12單克隆抗體（貨號476 011），其提供了優(yōu)越的信號噪音比，并可稀釋至1:10,000。該抗體適用于各種組織制備方法，包括石蠟包埋組織（FFPE，IHC-P）（圖1），標準PFA固定組織（IHC）以及在甲醇后固定后的新鮮冰凍組織（IHC-Fr）（圖2）。值得注意的是，SYSY的抗體在許多可用的微膠質細胞標記物抗體中表現(xiàn)優(yōu)異，特別是在經歷甲醇后固定的樣本中。

為了增強SYSY多重染色的產品，SYSY擴展了產品范圍，包括嵌合重組抗體。這包括重組兔抗P2Y12（貨號476 008）和重組豚鼠抗P2Y12（貨號476 308）。SYSY所有的P2Y12抗體均為單克隆，確保了最小的批次間變異。

圖1：使用小鼠抗P2Y12抗體（貨號476 008，稀釋1:5000，DAB）間接免疫染色PFA固定的石蠟包埋（FFPE）小鼠皮層切片。細胞核已通過伊紅染色可視化（藍色）。	圖2：使用小鼠抗P2Y12抗體（貨號476 308，稀釋1:5000，綠色）間接免疫染色甲醇后固定的小鼠大腦新鮮冰凍切片。細胞核已通過DAPI染色可視化（藍色）。

科學背景

P2Y12受體是一種Gi-偶聯(lián)嘌呤受體，對中樞神經系統(tǒng)（CNS）中微膠質細胞的功能尤為重要（Lin等，2020年）。該受體在監(jiān)視微膠質細胞的突起和細胞體中高度表達，并在應對局部CNS損傷時在微膠質細胞趨化中發(fā)揮重要作用（Haynes等，2006年）。最近的研究顯示，P2Y12受體主要集中在微膠質細胞突起與神經元細胞體之間的界面（Cserép等，2020年）。迄今為止，P2Y12受體是最被接受的微膠質細胞特異性標記物之一，用于區(qū)分CNS駐留微膠質細胞與CNS相關巨噬細胞（CAMs）（圖3）以及浸潤的單核細胞/巨噬細胞（Hashioka等，2022年）。

圖3：使用小鼠抗P2Y12抗體（貨號476 011，稀釋1:2000，綠色）和兔抗CD163抗體（貨號HS-455 003，稀釋1:125，紅色）間接免疫染色甲醛固定的小鼠皮層切片。細胞核已通過DAPI染色可視化（藍色）。	圖4：使用豚鼠抗P2Y12抗體（貨號476 308，稀釋1:10000，紅色）和鼠抗IBA1抗體（貨號234 017，稀釋1:500，綠色）間接免疫染色APP/PS1小鼠甲醛固定的小鼠海馬區(qū)切片。細胞核已通過DAPI染色可視化（藍色）。

ADP（腺苷二磷酸）是ATP（腺苷三磷酸）的降解產物，是P2Y12受體的首選激動劑。在正常生理活動或組織損傷后，ATP從神經元和其他膠質細胞釋放出來（Lin等，2020年；Deitmer等，2006年；Weilinger等，2023年）。在微膠質細胞中，當這些細胞進入一種被稱為與疾病相關的微膠質細胞（DAM）的激活狀態(tài)時，P2Y12受體的表達水平會下調（Keren-Shaul等，2017年）。這種現(xiàn)象可在APP-PS1轉基因小鼠的淀粉樣斑塊周圍觀察到，這是阿爾茨海默病的常見模型（圖4）。相反，其他微膠質標記物如IBA1、CD11b或CD11c，在激活期間會上調表達。有關神經炎癥的更多信息，請訪問我們的特色主題“大腦中的戰(zhàn)斗-神經炎癥的兩面”。

在外周，P2Y12受體表達在血小板表面，并因其在血小板激活、聚集和血栓形成中的關鍵作用而成為抗血栓藥物的重要生物靶點（Dorsam和Kunapuli，2004年）。

產品

SYSY 產品系列具有多種抗體選擇，非常適合小膠質細胞和巨噬細胞研究：IBA1、TMEM119、F4/80、CD206、CD163、CD11b、CD11c等。

引文：

• Cserép et al., 2020: Microglia monitor and protect neuronal function through specialized somatic purinergic junctions. PMID: 31831638

• Deitmer et al., 2006: Modulation of synaptic activity in Purkinje neurons by ATP. PMID: 16527764

• Dorsam and Kunapuli 2004: Central role of the P2Y12 receptor in platelet activation. PMID: 14755328

• Haynes et al., 2006: The P2Y12 receptor regulates microglial activation by extracellular nucleotides. PMID: 17115040

• Hashioka et al., 2022: Contribution of "Genuine Microglia" to Alzheimer's Disease Pathology. PMID: 35401156

• Keren-Shaul et al., 2017: A Unique Microglia Type Associated with Restricting Development of Alzheimer's Disease. PMID: 28602351

• Lin et al., 2020: The Safeguarding Microglia: Central Role for P2Y12 Receptors. PMID: 33519493

• Weilinger et al., 2023: Pannexin-1 opening in neuronal edema causes initial cell death but also leads to protection via increased microglia contacts. PMID: 37742194