簡(jiǎn)介

    突觸后致密區(qū) (PSD)

    PSD95 (SAP90)

    The PSD95 FluoTag

    The PSD95 sdAb - FluoTag-X2 – 所有變異型

    文獻(xiàn)

 

我們先瀏覽一下Synaptic Systems第一個(gè)PSD95 FluoTag-X2 抗體，它在標(biāo)準(zhǔn)免疫染色應(yīng)用方面例如免疫組織化學(xué)(IHC) (圖1) 和免疫細(xì)胞化學(xué)(ICC) (圖 2)展現(xiàn)出了穩(wěn)固而可靠的結(jié)果。并且，在附加的抗原提取步驟中，它對(duì)經(jīng)PFA / 福爾馬林固定的，來(lái)源于大鼠和小鼠的組織和細(xì)胞沒(méi)有任何的要求。

突觸后致密區(qū)(PSD)

突觸后致密區(qū) (PSD) 是位于突觸后膜，并列于突觸前活躍區(qū)的一個(gè)特殊蛋白致密區(qū)。起初，通過(guò)電子顯微鏡，他被鑒定為位于突觸后膜上的電子致密結(jié)構(gòu)(圖3)。突觸后致密區(qū)在突觸間隙充當(dāng)支架結(jié)構(gòu)，使神經(jīng)遞質(zhì)受體聚集在靠近突觸前釋放神經(jīng)遞質(zhì)的位置(Banker et al., 1974; Ziff, 1997; Dosemeci et al., 2016)。

由于大腦區(qū)域，活躍狀況，突觸成熟和一些神經(jīng)變性的疾病，突觸后致密區(qū)的大小和成分也有所不同(Meyer et al., 2014; Vyas and Montgomery, 2016)

圖3：大鼠海馬結(jié)構(gòu)突觸的電子顯微斷層掃描圖片

PSD95 (SAP90)

PSD95 (突觸后致密區(qū)蛋白 95) 也稱(chēng)為SAP90 (突觸關(guān)聯(lián)蛋白 90)或者由DLG4基因編碼的Disks large homolog 4 (Statthakis et al., 1997)。

與其鄰近親屬PSD93, SAP102和SAP97，一同屬于MAGUK 蛋白超級(jí)家族，并且共享PDZ, SH3和GUK結(jié)構(gòu)域的特性(Woods and Bryant, 1993) (見(jiàn)圖4)。

圖4：PSD95蛋白的3D結(jié)構(gòu)。基于PyMOL 上對(duì)PDB 1be9的描述。

PSD95和PSD93 是PSD的關(guān)鍵組分(Hunt et al., 1996; Kennedy, 1997)，可以形成包含數(shù)百個(gè)拷貝的多聚體支架，聚集神經(jīng)遞質(zhì)受體、離子通道和其他伴隨的信號(hào)蛋白(Dosemeci et al., 2016)。

出于此原因， PSD95是一個(gè)重要的，常用的標(biāo)記蛋白，用于神經(jīng)系統(tǒng)中突觸后端的特定免疫標(biāo)記，包括免疫細(xì)胞化學(xué) (ICC)和免疫組織化學(xué)(IHC)。然而，由于多聚體的，緊湊且致密的結(jié)構(gòu)，抗體表位經(jīng)常被巨大的完整IgG抗體分子所掩蓋或由于空間位阻而難以接近。抗原修復(fù)方法或者特殊調(diào)整過(guò)的固定實(shí)驗(yàn)方案可以改善結(jié)果，但由于附加的組織處理步驟，對(duì)于其它抗體在多路復(fù)用實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用可能會(huì)是一個(gè)限制。

The PSD95 FluoTag

新的PSD95 FluoTag N3702是一個(gè)單域抗體(sdAb)，通常被稱(chēng)為納米抗體，由我們的合作伙伴公司NanoTag Biotechnologies所研制開(kāi)發(fā)。這種重組駱駝源抗體僅由羊駝重鏈抗體的一個(gè)抗原結(jié)合位點(diǎn)組成。只有約僅僅15 kDa，這種FluoTag比傳統(tǒng)的IgG抗體分子大約小10倍。由于非常小的尺寸，即使在標(biāo)準(zhǔn)的4% PFA灌注固定和后固定組織中，這種PSD95 FluoTag也可以穩(wěn)定地訪問(wèn)其表位。這種組織制備方法由于確保了組織形態(tài)的極佳保存，并與大量可用的研究抗體兼容，所以通常用于振動(dòng)和冷凍切片的免疫組化染色。此外，在對(duì)人工培養(yǎng)神經(jīng)元細(xì)胞的免疫組化染色中發(fā)現(xiàn)，新引入的PSD95 FluoTag在經(jīng)PFA固定的細(xì)胞上表現(xiàn)卓越(圖 2)。

它的單價(jià)結(jié)合特性，即每個(gè)FluoTag與確定數(shù)量的熒光團(tuán)分子結(jié)合，使其成為定量分析的理想試劑。為了確保最大范圍的應(yīng)用符合您的需求，艾美捷科技作為Synaptic Systems品牌總代理商，為您推薦以下PSD95 FluoTag可與一個(gè)廣泛的熒光分子團(tuán)共軛(見(jiàn)下表)

PSD95 sdAb - FluoTag-X2 - 所有變異型

參考文獻(xiàn)

Banker et al. 1974: Proteins of the postsynaptic density. PMID: 4419608

Dosemeci et al. 2016: The Postsynaptic Density: There Is More than Meets the Eye. PMID: 27594834

Hunt et al. 1996: PSD-95 is associated with the postsynaptic density and not with the presynaptic membrane at forebrain synapses. PMID: 8778289

Kennedy 1997: The postsynaptic density at glutamatergic synapses. PMID: 9185308

Meyer et al. 2014: Balance and stability of synaptic structures during synaptic plasticity. PMID: 24742464

Statthakis et al. 1997: Human postsynaptic density-95 (PSD95): location of the gene (DLG4) and possible function in nonneural as well as in neural tissues. PMID: 9286702

Vyas and Montgomery 2016: The role of postsynaptic density in neural degeneration and regeneration. PMID: 27482211

Woods and Bryant 1993: ZO-1, DlgA and PSD-95/SAP90: homologous proteins in tight, septate and synaptic cell junctions. PMID: 8155583

Ziff 1997: Enlightening the postsynaptic density. PMID: 9427241

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