PLBL2檢測(cè)試劑盒是一種高靈敏度的雙位點(diǎn)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA），用于定量檢測(cè)倉鼠（CHO）細(xì)胞樣本中的磷脂酶B樣蛋白2（Phospholipase B-Like 2，PLBL2）。僅供研究使用，不得用于診斷程序。

艾美捷CHO PLBL2 ELISA試劑盒【#41-PLBL2HA-E01】檢測(cè)原理：

雙抗體夾心ELISA的原理如圖1所示。在此檢測(cè)中，樣本中的PLBL2與已吸附在聚苯乙烯微孔板表面的抗PLBL2抗體發(fā)生反應(yīng)。經(jīng)洗滌去除未結(jié)合的蛋白質(zhì)后，加入檢測(cè)抗體（生物素偶聯(lián)的抗PLBL2抗體），形成復(fù)合物。洗滌后，加入辣根過氧化物酶（HRP）偶聯(lián)的鏈霉親和素，形成復(fù)合物。再經(jīng)洗滌后，通過加入顯色底物3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）來測(cè)定復(fù)合物。結(jié)合的酶量與樣本中PLBL2的濃度成正比；因此，450 nm處的吸光度是測(cè)試樣本中PLBL2濃度的量度。可以通過標(biāo)準(zhǔn)曲線（由標(biāo)準(zhǔn)品構(gòu)建）來估算測(cè)試樣本中PLBL2的量，并根據(jù)樣本稀釋情況進(jìn)行校正。

程序限制：

僅供研究使用：不得用于診斷程序。

可靠性和重復(fù)性：當(dāng)完全理解包裝說明書中的信息并遵循良好的實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)范時(shí)，可以獲得可靠和可重復(fù)的結(jié)果。可能影響檢測(cè)性能的因素包括儀器功能、玻璃器皿的清潔度、蒸餾水或去離子水的質(zhì)量、試劑和樣本的移液準(zhǔn)確性、洗滌技術(shù)以及孵育時(shí)間和溫度。不要將不同批次或來源的試劑混合或替換使用。

所需材料（未提供）：

精密移液管（2 ?L至1000 ?L），用于制備和分裝稀釋液

試管

噴壺或微孔板清洗/吸引器

蒸餾水或去離子水

能在450 nm處讀數(shù)的微孔板讀數(shù)儀

用于制備試劑和緩沖液溶液的各種玻璃器皿

用于樣本收集的離心機(jī)

用于血漿收集的抗凝劑

計(jì)時(shí)器

微孔板振蕩器

樣本稀釋：

檢測(cè)要求每個(gè)測(cè)試樣本在使用前進(jìn)行稀釋。每次進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，所有樣本都應(yīng)進(jìn)行雙份檢測(cè)。推薦的稀釋倍數(shù)僅為建議。稀釋倍數(shù)應(yīng)基于未知樣本的預(yù)期濃度，使得稀釋后的樣本落在標(biāo)準(zhǔn)曲線的動(dòng)態(tài)范圍內(nèi)。如果不確定樣本水平，在運(yùn)行整個(gè)板之前，強(qiáng)烈建議對(duì)一個(gè)或兩個(gè)代表性樣本進(jìn)行系列稀釋。在使用前立即稀釋樣本。

CHO培養(yǎng)提取樣本：推薦起始稀釋倍數(shù)為1:20。要制備樣本的1:20稀釋液，將15 ?L樣本轉(zhuǎn)移至285 ?L的1X稀釋液中。充分混合。

試劑準(zhǔn)備：

恢復(fù)至室溫：使用前將所有試劑恢復(fù)至室溫（16℃至25℃）。

稀釋液：直接使用。

洗滌液濃縮液：提供的洗滌液為20X濃縮液，需用蒸餾水或去離子水稀釋1:20（1份濃縮液，19份水）。當(dāng)儲(chǔ)存溫度較低時(shí)，濃縮液中可能會(huì)出現(xiàn)結(jié)晶。在稀釋前將濃縮液加熱至30-35℃可以溶解結(jié)晶。

檢測(cè)抗體：根據(jù)每條微孔板檢測(cè)條的需求，將10 ?L檢測(cè)抗體加入990 ?L 1X稀釋液中，制備工作液。使用前立即稀釋，避免光照。均勻混合，但動(dòng)作要輕柔，避免起泡。

HRP-鏈霉親和素：根據(jù)每條微孔板檢測(cè)條的需求，將10 ?L HRP-鏈霉親和素加入990 ?L 1X稀釋液中，制備工作液。使用前立即稀釋，避免光照。均勻混合，但動(dòng)作要輕柔，避免起泡。

預(yù)包被ELISA微孔板：直接使用。打開鋁箔袋，取出微孔板。將不用于檢測(cè)的檢測(cè)條和孔放回袋中，并與干燥劑一起重新密封。

倉鼠（CHO）PLBL2校準(zhǔn)品：根據(jù)批次特定的分析證書進(jìn)行準(zhǔn)備。