ALPCO胰島素化學(xué)發(fā)光酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）用于定量檢測(cè)人血清、肝素化血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的胰島素。

作為ALPCO在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品胰島素化學(xué)發(fā)光ELISA試劑盒(10板)。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

胰島素化學(xué)發(fā)光ELISA試劑盒(10板)檢測(cè)原理：

ALPCO胰島素化學(xué)發(fā)光ELISA是一種夾心免疫分析法。96孔微孔板涂有一層特異性針對(duì)胰島素的單克隆抗體。將標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品與結(jié)合物一起加入微孔板孔中，然后在室溫下于微孔板振蕩器上以700-900轉(zhuǎn)/分鐘的速度孵育。第一次孵育完成后，用洗滌緩沖液清洗孔并吸干。然后加入鏈霉親和素-辣根過(guò)氧化物酶（SA-HRP）進(jìn)行第二次室溫孵育，孵育時(shí)微孔板振蕩器速度為700-900轉(zhuǎn)/分鐘。孵育完成后，再次用洗滌緩沖液清洗孔并吸干。加入化學(xué)發(fā)光底物，5分鐘后用化學(xué)發(fā)光微孔板讀數(shù)儀讀取結(jié)果。產(chǎn)生的光強(qiáng)度與樣品中胰島素的量成正比。  

*請(qǐng)參考每套試劑盒附帶的分析證書(shū)以獲取更多信息。

所需材料 

- 精密移液器，用于分裝10-100微升（配一次性吸頭）  

- 重復(fù)或多通道移液器，用于分裝最多100微升  

- 容量瓶和移液器，用于試劑配制  

- 蒸餾水或去離子水，用于試劑配制  

- 微孔板清洗器或洗瓶  

- 能達(dá)到700-900轉(zhuǎn)/分鐘的微孔板振蕩器  

- 配有化學(xué)發(fā)光檢測(cè)功能的微孔板讀數(shù)儀

注意事項(xiàng) 

1. 本試劑盒中包含的人類血液制品已檢測(cè)HIV（人類免疫缺陷病毒）、HBV（乙型肝炎病毒）和HCV（丙型肝炎病毒）。這些病毒的檢測(cè)方法不能保證病毒的完全不存在，因此所有試劑應(yīng)被視為潛在傳染性物質(zhì)。處理和丟棄應(yīng)遵守所有適用的國(guó)家和地方關(guān)于潛在生物危害材料處理的規(guī)定。  

2. 來(lái)自動(dòng)物源的所有材料均為瘋牛病（BSE）陰性。然而，所有材料仍應(yīng)被視為潛在傳染性物質(zhì)。  

3. 避免與皮膚直接接觸。  

4. 本產(chǎn)品不可內(nèi)服。  

5. 使用本產(chǎn)品時(shí)，避免進(jìn)食、飲水或吸煙。  

6. 不要使用嘴進(jìn)行任何試劑的移液操作。  

7. 本試劑盒中的試劑具有批號(hào)特異性，不得替換。  

8. 不要使用過(guò)期的試劑。  

9. 不建議對(duì)檢測(cè)程序進(jìn)行更改，這可能會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。  

10. 附錄中提供了用于讀取化學(xué)發(fā)光輸出的儀器設(shè)置示例。每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)儀器制造商的說(shuō)明優(yōu)化其儀器設(shè)置。請(qǐng)與微孔板讀數(shù)儀制造商的技術(shù)服務(wù)部門(mén)聯(lián)系，以獲取最佳儀器設(shè)置。

典型標(biāo)準(zhǔn)曲線 

以下結(jié)果僅用于演示目的，不能代替通過(guò)檢測(cè)獲得的數(shù)據(jù)。每次檢測(cè)運(yùn)行和測(cè)試的板都需要進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線檢測(cè)，數(shù)據(jù)分析采用1/y?加權(quán)的五參數(shù)曲線擬合。

儲(chǔ)存條件 

試劑盒應(yīng)儲(chǔ)存于2-8°C。試劑盒有效期至包裝標(biāo)簽上的過(guò)期日期。

結(jié)果計(jì)算 

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。建議使用軟件程序計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線并確定樣品濃度。推薦使用1/y?加權(quán)的五參數(shù)曲線擬合進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。  

胰島素化學(xué)發(fā)光ELISA是一種配體結(jié)合分析法，其反應(yīng)與分析物濃度呈S形關(guān)系。目前接受的此類曲線參考模型使用四參數(shù)或五參數(shù)邏輯斯蒂（PL）擬合，因?yàn)檫@些模型能夠在更廣泛的范圍內(nèi)優(yōu)化準(zhǔn)確性和精確性。  

使用1/y?加權(quán)的五參數(shù)曲線擬合是為了最大化低濃度樣品的準(zhǔn)確性和精確性。然而，由于個(gè)體實(shí)驗(yàn)室條件的影響，所有模型在可檢測(cè)范圍的最低端和最高端的準(zhǔn)確性和精確性都受到限制。因此，在解釋分析物反應(yīng)呈非線性時(shí)，應(yīng)始終謹(jǐn)慎。  

不建議將樣品濃度值外推到標(biāo)準(zhǔn)濃度范圍之外。

預(yù)期值 

胰島素化學(xué)發(fā)光ELISA已校準(zhǔn)至WHO胰島素第一國(guó)際參考制劑66/304。  

人胰島素從pg/mL換算到?IU/mL（微國(guó)際單位）的換算關(guān)系為：  

34.8 pg/mL = 1 ?IU/mL  

34.8 ?g = 1 IU = 6 nmol

文獻(xiàn)參考：

1. Finlay JWA, Dillard RF. Appropriate Calibration Curve Fitting in Ligand Binding Assays.AAPS Journal. 2007; 9(2): E260-E267. 

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測(cè)樣品來(lái)源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學(xué)、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能、腸胃病學(xué)、免疫學(xué)、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個(gè)研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見(jiàn)長(zhǎng)。

作為ALPCO在中國(guó)區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國(guó)客戶提供全面的ALPCO產(chǎn)品。