小鼠超靈敏胰島素ELISA定量檢測小鼠I和小鼠II前胰島素基因中的胰島素蛋白產(chǎn)物，樣本量僅需5 uL的血清或血漿。僅供研究使用，不得用于診斷程序。

對于尾部切片：

僅需5 uL樣本；

動態(tài)范圍為0.18-6.9 ng/mL；

靈敏度達到0.115 ng/mL。

對于低胰島素樣本：

僅需25 uL樣本；

動態(tài)范圍為0.025-1.25 ng/mL；

靈敏度達到0.019 ng/mL。

ALPCO 小鼠超靈敏胰島素ELISA試劑盒(10板)貨號：ALP-80-INSMSU-E10 的檢測原理：

ALPCO小鼠超靈敏胰島素ELISA是一種夾心型免疫測定。96孔微孔板上涂有特異性針對胰島素的單克隆抗體。標(biāo)準(zhǔn)品、對照品和樣本與標(biāo)記物一起添加到微孔板孔中。隨后，微孔板在微孔板搖床上以700-900 rpm的速度進行第一次孵育。第一次孵育完成后，使用洗滌緩沖液對孔進行洗滌并吸干。接著加入TMB底物，再次在微孔板搖床上以700-900 rpm的速度進行第二次孵育。一旦第二次孵育完成，加入終止溶液，然后使用分光光度計在450 nm處測量光密度（OD）。生成的顏色強度與樣本中胰島素的含量成正比。

所需材料：

精密移液器（用于分配5、25、75和100 uL，配有一次性吸頭）

重復(fù)移液器或多通道移液器（用于分配75和100 uL）

用于試劑制備的量筒和移液器

蒸餾水或去離子水（用于試劑制備）

微孔板洗板機或洗瓶

能達到700-900 rpm的微孔板振蕩器

配有450 nm濾光片的微孔板讀數(shù)儀

樣本準(zhǔn)備用的渦旋儀

注意事項：

本試劑盒中使用的人的血液產(chǎn)品已經(jīng)經(jīng)過HIV（人類免疫缺陷病毒）、HBV（乙型肝炎病毒）和HCV（丙型肝炎病毒）的檢測。檢測方法不能保證病毒的完全不存在，因此所有試劑都應(yīng)視為潛在的感染性物質(zhì)。操作和廢棄物處理應(yīng)符合所有相關(guān)的國家和地方對潛在生物危害物質(zhì)的處理規(guī)定。

所有來自動物來源的材料均為BSE陰性。然而，所有材料應(yīng)避免接觸反芻動物。

避免直接接觸皮膚。

本產(chǎn)品僅限外部使用。

使用本產(chǎn)品時避免進食、飲水或吸煙。

禁止用嘴吸取任何試劑。

本試劑盒中的試劑為特定批號，不能替代使用。

請勿使用過期試劑。

不建議對測試程序進行任何修改，修改可能會影響測試結(jié)果。

試劑制備：

所有試劑在制備和后續(xù)使用之前必須先回溫至室溫。

結(jié)合物儲備液需要與10倍的結(jié)合物緩沖液稀釋。例如，為了制備足夠的工作濃度結(jié)合物以完成一個微孔板，需將0.9 mL的結(jié)合物儲備液（11X）與9 mL的結(jié)合物緩沖液稀釋。

洗滌緩沖液濃縮液需要與20倍的蒸餾水稀釋。例如，為了制備工作濃度的洗滌緩沖液，需將20 mL洗滌緩沖液濃縮液（21X）與400 mL去離子水稀釋。工作濃度的洗滌緩沖液在室溫下（18-25°C）穩(wěn)定保存4周。

對照品（等級1、2、3）以凍干形式提供。請參閱隨每個試劑盒提供的分析證書，獲取適當(dāng)?shù)娜ルx子水量進行復(fù)溶。復(fù)溶時，關(guān)閉瓶口，輕輕搖勻瓶子，靜置30分鐘后使用。瓶中的內(nèi)容物應(yīng)為溶液狀態(tài)且無可見顆粒。復(fù)溶后的對照品在2-8°C下穩(wěn)定保存7天。如果需要，可以將其分裝后存放在≤ -20°C下，保存時間最長可達6個月。對照品不應(yīng)反復(fù)凍融。

結(jié)果計算

從標(biāo)準(zhǔn)品構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線，將零標(biāo)準(zhǔn)作為曲線的一部分。建議使用軟件程序計算標(biāo)準(zhǔn)曲線并確定樣品的濃度。推薦使用五參數(shù)曲線進行數(shù)據(jù)分析。

ALPCO小鼠超靈敏胰島素ELISA是一種配體結(jié)合檢測，響應(yīng)與分析物濃度之間呈S形關(guān)系。目前公認的此類曲線參考模型使用五參數(shù)邏輯（pl）擬合，因為這些模型在更大范圍內(nèi)優(yōu)化了準(zhǔn)確性和精確性。雖然立方樣條曲線和其他模型也是可接受的方法，但它們通常在濃度范圍的低端和高端顯示較低的實驗內(nèi)準(zhǔn)確性和精確性。

在下面的示例中，使用了五參數(shù)邏輯曲線擬合，以最大化低濃度樣品的準(zhǔn)確性和精確性。然而，由于個別實驗室條件的影響，所有模型在可檢測范圍的最低和最高端的準(zhǔn)確性和精確性都受到限制。因此，在解釋分析物響應(yīng)變得非線性時，應(yīng)始終謹慎。

不建議推測樣品濃度值超出標(biāo)準(zhǔn)濃度值的范圍。

典型標(biāo)準(zhǔn)曲線

以下結(jié)果僅供演示使用，不能替代通過檢測獲得的數(shù)據(jù)。每次檢測和測試的板上都必須進行標(biāo)準(zhǔn)曲線的測定。

ALPCO公司從成立初期就致力于生物醫(yī)藥領(lǐng)域各種免疫檢測試劑盒的研發(fā)與生產(chǎn)，力求為廣大客戶提供高質(zhì)量的免疫檢測產(chǎn)品。ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學(xué)、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細胞因子與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、 內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能、腸胃病學(xué)、免疫學(xué)、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長。艾美捷科技是ALPCO的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。