AkrivisBio 結晶紫細胞毒性測定，詳細測定方案

結晶紫結合作為細胞毒性的測量是檢測細胞活力或藥物細胞毒性的一種公認方法。結晶紫是一種三芳基甲烷染料，能與DNA等含有核糖的分子結合。通常，死細胞從細胞培養板上分離，并在洗滌步驟中去除。使用結晶紫來量化剩余粘附細胞群的DNA允許通過監測其在570nm處的吸光度來快速測量細胞活力。

AkrivisBio 的結晶紫細胞毒性試驗是一種簡單、靈敏的研究細胞增殖、活力或細胞毒性的試驗。該測定提供了細胞存活的定量測量，并可用于評估各種治療或化合物的細胞毒性作用。

艾美捷AkrivisBio 結晶紫細胞毒性測定：

Catalog: CPT-0102

Size: Includes reagents for 1000 wells

Sample Type: Adherent Cells

Species: Non specific

Method of Detection: Colorimetric, OD 570 nm

Assay Type: Quantitative

Application: To study cell proliferation, viability or cytotoxicity.

Range: Recommended 5000-20000 cells/well

Storage Conditions: -20°C

Shipping Temperature: Gel Pack

Shelf Life: One year from the date of delivery

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目錄：CPT-0102

尺寸：包括1000#試劑

樣品類型：粘附細胞

物種：非特定

檢測方法：比色法，OD 570 nm

化驗類型：定量

應用：研究細胞增殖、活力或細胞毒性。范圍：推薦5000-20000個細胞/孔

儲存條件：-20°C

運輸溫度：凝膠包裝

保質期：一年

AkrivisBio 結晶紫細胞毒性測定組成：

結晶紫染色40 ml NM CPT-0102-A

Wash濃縮液115 ml NM CPT-0502-B

溶解液100 ml WM CPT-0102-C

Doxorbicin 100?l紅色CPT-0102-D

將未開封的試劑盒儲存在-20°C的溫度下。在打開之前，對所有小瓶進行短暫離心。

水晶紫染色：使用前加熱至RT。用11 ml 100%甲醇重新配制。回收瓶子，搖晃并靜置15分鐘。在-20°C下儲存。濃縮洗滌液：將1份濃縮洗滌液加入9份去離子水中，制成洗滌液。儲存于4°C。

溶解溶液：使用前置于室溫下。可以在RT或與其他組件一起存儲。阿霉素（20mM）：使用前進行RT。在-20°C下儲存。

測定方案：

1、細胞培養：將粘附細胞培養至約80%的融合度。將細胞進行胰蛋白酶化并在500 X g下離心。加入5 ml生長培養基以分散細胞。使用血細胞儀測定細胞密度。如有必要，將細胞濃度調整至25000–100000/ml。將200?l細胞懸浮液添加到96孔透明平底板中，以播種5000-20000個細胞/孔。讓細胞沉淀過夜并粘附在培養板上。

2、處理：使用二甲基亞砜作為溶劑制備挑戰化合物。保持化合物濃度足夠高以使DMSO在細胞培養物中保持在0.5%以下。向井中添加化合物。準備DMSO載體對照和僅包含生長培養基的背景對照）。作為抑制劑對照，向含有細胞的孔中加入1?l 20 mM阿霉素。將平板在細胞培養條件下（37°C，加濕培養箱，5%CO2）培養72小時

3、結晶紫染色：去除培養基。用200?l洗滌溶液洗滌細胞。洗滌應盡可能輕柔。取出盡可能多的洗滌液。向每個孔中加入50?l Crystal Violet Stain甲醇溶液，在室溫下等待20分鐘。培養后，取出甲醇染色溶液。用200?l洗滌液洗滌4次。第4步洗滌后，盡可能多地去除洗滌液，并將盤子風干。

4、增溶：向每個孔中加入100?l增溶溶液。在RT.5下搖動平板20分鐘。

5、測量：在570nm處測量外徑。

6、計算：從所有讀數中減去背景控件的外徑。使用以下公式計算細胞毒性百分比：

AkrivisBio 致力于鑒別、開發和提供高質量的生物試劑和工具，這些試劑和工具在藥物發現、診斷和基礎研究等多個領域和應用中起著至關重要的作用。艾美捷科技是AkrivisBio的中國代理商，為科研工作者提供優質的產品與服務。