【Mabtech明星產(chǎn)品之前情回顧】：

1、計(jì)數(shù)分泌人干擾素-γ細(xì)胞的方案：人IFN-γ的ELISpot試劑盒，點(diǎn)擊了解

2、你所不知道的Mabtech干擾素-γ抗體“大全”，點(diǎn)擊了解

3、Mabtech干擾素-γ的ELISA試劑盒“集錦”，點(diǎn)擊了解

4、計(jì)數(shù)分泌IFN-γ細(xì)胞的方案：Mabtech干擾素-γ的ELISpot試劑盒，點(diǎn)擊了解

時(shí)空交織，瞬息萬(wàn)變。在滅霸的平衡大法下，復(fù)仇者聯(lián)盟整支隊(duì)伍損失了超過(guò)一半的英雄；僅剩鋼鐵俠、美國(guó)隊(duì)長(zhǎng)、雷神、黑寡婦、綠巨人、鷹眼這6位暫且存活了下來(lái)。

滅霸，泰坦星人，掌握宇宙強(qiáng)權(quán)，一個(gè)響指即可滅掉一半宇宙生命的霸主。他們，迎來(lái)了終局之戰(zhàn)——協(xié)助我們進(jìn)行多細(xì)胞因子檢測(cè)。

來(lái)一波《復(fù)聯(lián)4》，勾出滿滿的回憶殺~~~

“超級(jí)英雄”就像我們常規(guī)的酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)法（ELISpot）實(shí)驗(yàn)一樣，每個(gè)實(shí)驗(yàn)孔只能檢測(cè)一種細(xì)胞因子。而形成“復(fù)聯(lián)”熒光免疫斑點(diǎn)法（FluoroSpot），就可以實(shí)現(xiàn)在一個(gè)孔內(nèi)同時(shí)檢測(cè)兩種或兩種以上的細(xì)胞因子或抗體。FluoroSpot是在ELISpot基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的新方法，擁有ELISpot的靈敏度，采用熒光法，能夠同時(shí)分析幾種分泌物。

FluoroSpot優(yōu)勢(shì)：     

一：靈敏度高，操作簡(jiǎn)便，相對(duì)穩(wěn)定，應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點(diǎn)。

二：能夠生成更多的數(shù)據(jù)，節(jié)省時(shí)間。與免疫斑點(diǎn)相比，使用的細(xì)胞和抗原均較少。

FluoroSpot 原理：     

三明治夾心結(jié)構(gòu)在熒光斑點(diǎn)中得以應(yīng)用，不同特異性的單克隆捕獲抗體混合物被包被于96孔板的PVDF膜上，生物素標(biāo)記的檢測(cè)抗體識(shí)別一種分泌物，tag標(biāo)記的檢測(cè)抗體識(shí)別其它的分泌物來(lái)實(shí)現(xiàn)雙色或三色細(xì)胞因子分泌細(xì)胞的檢測(cè)。通過(guò)帶有特定熒光基團(tuán)的共軛試劑放大信號(hào)斑點(diǎn)來(lái)檢測(cè)，可用自動(dòng)讀板器進(jìn)行分析。

三色FluoroSpot分析結(jié)果圖總共可以顯示7個(gè)亞群：3個(gè)單色的細(xì)胞因子，3個(gè)雙色的細(xì)胞因子，1個(gè)三色的細(xì)胞群。圖像顯示的是一個(gè)三色FluoroSpot分析結(jié)果。用一組CEF肽刺激人的外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC），分別用FITC標(biāo)記IFN-γ、CY3標(biāo)記IL-10和CY5標(biāo)記顆粒酶B（GzB）。Overylay展示的是三個(gè)指標(biāo)疊加后得到的結(jié)果。

三色FluoroSpot分析：能夠更容易區(qū)分不同的細(xì)胞因子

Mabtech的FluoroSpot試劑盒用途：     

1.用于分析T細(xì)胞響應(yīng)，B細(xì)胞響應(yīng)和分析巨噬細(xì)胞，單核細(xì)胞和樹(shù)突狀細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞因子不同的分布描繪不同的亞群。

2.三明治夾心法結(jié)合熒光基團(tuán)標(biāo)記的檢測(cè)試劑能夠?qū)ν粋€(gè)孔中兩個(gè)或兩個(gè)以上的分析物進(jìn)行分析。

3.對(duì)于某些分析物組合，提供帶預(yù)涂板的試劑盒。預(yù)涂板是一種方便的選擇，可以實(shí)現(xiàn)更快速的分析，同時(shí)將可變性降至最低。

艾美捷科技作為專業(yè)的生命科學(xué)領(lǐng)域解決方案供應(yīng)商，為您推薦Mabtech品牌的FluoroSpot“戰(zhàn)斗裝備”，適用多種種屬，產(chǎn)品優(yōu)質(zhì)，發(fā)表多篇高分文章。以下列舉出部分的FluoroSpot試劑盒，供您參考。

PS：以上僅列出部分產(chǎn)品，此外Mabtech還提供10個(gè)板子的大規(guī)格包裝的FluoroSpot試劑盒。

FluoroSpot試劑盒的特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)：

1、非常適合需要方便靈敏檢測(cè)的用戶。

2、設(shè)計(jì)用于計(jì)數(shù)分泌多種分析物的細(xì)胞。

3、適用人、猴、小鼠、牛、羊等多種種屬的試劑盒可供選擇。

4、包含不同組分的多樣化試劑盒可供客戶選擇。

5、含預(yù)包被板的試劑盒可實(shí)現(xiàn)更快速的分析，同時(shí)將可變性降至最低。

常見(jiàn)疑難問(wèn)題解答：

哪種細(xì)胞類型適合FluoroSpot分析？

FluoroSpot測(cè)定基本上可以應(yīng)用于任何想要研究單細(xì)胞水平的蛋白質(zhì)分泌的細(xì)胞。盡管到目前為止該技術(shù)主要用于鑒定抗原活化的T細(xì)胞分泌細(xì)胞因子和B細(xì)胞分泌抗體，但可以分析非粘附細(xì)胞和粘附細(xì)胞。

冷凍細(xì)胞可以用于FluoroSpot嗎？

冷凍保存的細(xì)胞非常適合FluoroSpot。但是細(xì)胞的狀態(tài)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果有很大影響，必須規(guī)范凍存/復(fù)蘇程序以獲得高活力的細(xì)胞。

完成實(shí)驗(yàn)操作后需多長(zhǎng)時(shí)間讀取FluoroSpot板，即熒光基團(tuán)的穩(wěn)定性如何？

如果板保持干燥并且在黑暗中，熒光非常穩(wěn)定，在分析前允許將板保存較長(zhǎng)的時(shí)間（即幾個(gè)月）。但是，為了獲得最佳結(jié)果，我們建議在操作完成后一周內(nèi)對(duì)板進(jìn)行分析。

分析FluoroSpot板需要什么類型的分析儀？

FluoroSpot需要分析儀來(lái)顯示熒光斑點(diǎn)，因?yàn)檠劬o(wú)法觀察到斑點(diǎn)。我們建議使用配備濾光片的自動(dòng)化系統(tǒng)：激發(fā)光（ex）490 nm /發(fā)射光（em）510 nm（FITC），ex 550 nm / em 570 nm（Cy3），ex 640 nm / em 660 nm（Cy5）和四色分析也包括ex 380 nm / em 430 nm（DAPI）。濾波片應(yīng)對(duì)特定波長(zhǎng)具有選擇性，以避免滲透。為了正確測(cè)量多分泌細(xì)胞，分析儀需要能夠創(chuàng)建疊加分析。

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高分文章參考：

1.Memory B Cells Activate Brain-Homing, Autoreactive CD4+ T Cells in Multiple Sclerosis. Cell. 2018.  

2.Respiratory Syncytial Virus Infects Regulatory B Cells in Human Neonates via Chemokine Receptor CX3CR1 and Promotes Lung Disease Severity.Immunity.2017.  

3.Microbiota epitope similarity either dampens or enhances the immunogenicity of disease-associated antigenic epitopes.PLoS One. 2018.  

4.Comparison of ELISpot and FluoroSpot in the Analysis of Swine Flu-Specific IgG and IgA Secretion by in Vivo Activated Human B Cells. Cells. 2012.  

5.Immunogenicity of synthetic peptide constructs based on PvMSP9E795-A808, a linear B-cell epitope of the P. vivax Merozoite Surface Protein-9. Vaccine. 2019.

Mabtech公司于1986年創(chuàng)辦于瑞典，是一家歐洲的集研究，開(kāi)發(fā)，銷售，技術(shù)支持為一體的高科技免疫生物技術(shù)公司。Mabtech公司始終專業(yè)致力于研發(fā)新的單克隆抗體，生產(chǎn)創(chuàng)新的免疫試劑和銷售高品質(zhì)的全配套的免疫試劑盒。公司核心業(yè)務(wù)是致力于優(yōu)化發(fā)展酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)法技術(shù) (ELISpot)、熒光免疫斑點(diǎn)法技術(shù) (FluoroSpot) 和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)技術(shù) (ELISA) 等免疫學(xué)方法。公司開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)多種針對(duì)細(xì)胞因子，免疫球蛋白和載脂蛋白的單克隆抗體，用于生命科學(xué)研究中的體外應(yīng)用。Mabtech的試劑盒可用于研究感染性疾病，癌癥，過(guò)敏，移植等免疫反應(yīng)，通常用作疫苗試驗(yàn)中的監(jiān)測(cè)工具。此外，還生產(chǎn)用于獸醫(yī)和心血管研究的試劑盒。

艾美捷科技與國(guó)內(nèi)外優(yōu)秀的生物試劑供應(yīng)商保持著密切的合作關(guān)系，目前已成為眾多國(guó)際知名品牌的中國(guó)總代理或一級(jí)代理，主要包括：Abbkine、AAT Bioquest、Abnova、Agrisera、Alomone Labs、Biovision、Biosensis、Cayman Chemical、Caisson Labs、Cytoskeleton、Epigentek、Equitech-Bio、Hycult Biotech、Jackson、LifeSensors、ProSpec、PhytoAB、Norgen Biotek、Mabtech、iRegene、StressMarq、Trevigen、ImmunoReagents、SouthernBiotech、Origene、US Biological、Mabtech、Solis BioDyne等，可以在第一時(shí)間為用戶提供最前沿的專業(yè)資訊、完備的產(chǎn)品及物流服務(wù)。

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