Hypoxyprobe? PAb27試劑盒組件詳細(xì)信息

Hypoxyprobe?-1是一種取代的2-硝基咪唑，其化學(xué)名稱(chēng)和唯一成分為匹莫尼達(dá)唑鹽酸鹽。Hypoxyprobe?-1的分子量為290.8，水溶性為400毫摩爾，相當(dāng)于116毫克/毫升；在324納米處的紫外吸收，0.9%生理鹽水中的消光系數(shù)為7020。游離堿基匹莫尼達(dá)唑的分子量為254.3，pKa值為8.7，辛醇水分配系數(shù)為8.5。Hypoxyprobe?-1在固體和水溶液中都具有化學(xué)穩(wěn)定性。例如，固體Hypoxyprobe-1在避光條件下室溫存放兩年，未檢測(cè)到降解（通過(guò)UV和HPLC分析評(píng)估）。在0.9%生理鹽水中的Hypoxyprobe?-1溶液以100克/升的濃度在4攝氏度下存放4.5年，未檢測(cè)到降解（通過(guò)UV和HPLC分析）。匹莫尼達(dá)唑在缺氧細(xì)胞中被還原激活，激活的中間體與蛋白質(zhì)、肽和氨基酸中的巰基（硫醇）基團(tuán)形成穩(wěn)定的共價(jià)加合物。抗體試劑PAb27HAP能夠與這些加合物結(jié)合，從而通過(guò)免疫化學(xué)方法進(jìn)行檢測(cè)。

PAb27HAP是一種高滴度親和純化的兔抗體制劑，能夠與缺氧細(xì)胞中Hypoxyprobe?-1的蛋白質(zhì)加合物結(jié)合。PAb27HAP中含有疊氮鈉以增加穩(wěn)定性。感興趣的組織可以通過(guò)冷凍固定或甲醛固定的石蠟包埋切片進(jìn)行免疫組織化學(xué)研究；也可以通過(guò)Western blotting（蛋白質(zhì)印跡）或在組織解離后進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行研究。注意：PAb27HAP能夠與缺氧細(xì)胞中匹莫尼達(dá)唑的蛋白質(zhì)、肽和氨基酸加合物結(jié)合，但免疫組織化學(xué)檢測(cè)過(guò)程中，組織處理會(huì)沖洗掉小分子肽和氨基酸加合物，因此免疫組織化學(xué)缺氧檢測(cè)依賴(lài)于缺氧組織中匹莫尼達(dá)唑的蛋白質(zhì)加合物。

作為Hypoxyprobe在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦Hypoxyprobe熱銷(xiāo)產(chǎn)品【缺氧探針】PAb 27試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

【缺氧探針】PAb 27試劑盒：

應(yīng)用：用于免疫化學(xué)檢測(cè)細(xì)胞和組織的缺氧，包括免疫熒光、免疫過(guò)氧化物酶、Western blotting（蛋白質(zhì)印跡）或流式細(xì)胞術(shù)。當(dāng)Hypoxyprobe? PAb27試劑盒與抗兔二抗試劑（PAb27試劑盒中不提供二抗試劑）結(jié)合使用時(shí)，在小鼠組織中的背景非常低。

數(shù)量：a. Hypoxyprobe?-1 PAb27試劑盒包含100毫克、200毫克或1000毫克的Hypoxyprobe?-1（匹莫尼達(dá)唑鹽酸鹽）。典型的劑量是小動(dòng)物研究每公斤體重60毫克，人類(lèi)研究每公斤體重14毫克。

b. 一個(gè)瓶（100毫克和200毫克試劑盒）或兩個(gè)瓶（1000毫克試劑盒），每個(gè)瓶含有200微升的高滴度親和純化的抗匹莫尼達(dá)唑兔抗血清，含有0.09%的疊氮鈉和1%的牛血清白蛋白作為穩(wěn)定劑。PAb27HAP的最佳稀釋度需由每位研究者自行確定。

不提供：抗兔二抗試劑和標(biāo)準(zhǔn)的免疫組化（IHC）試劑，如緩沖液、底物顯色劑等。

儲(chǔ)存：a. 將Hypoxyprobe?-1固體存放在室溫下避光處（也可以存放在28攝氏度）。

b. 將兔PAb27HAP存放在2-8攝氏度。不要冷凍。

檢測(cè)說(shuō)明

對(duì)正常或腫瘤組織缺氧的研究始于靜脈輸注、腹腔注射或口服Hypoxyprobe?-1溶液。典型的劑量為小動(dòng)物研究每公斤體重60毫克，人類(lèi)研究每公斤體重14毫克。對(duì)于一只25克的小鼠，這相當(dāng)于每只小鼠1.5毫克。在小鼠中使用高達(dá)400毫克/公斤的劑量，未觀察到毒性或組織缺氧的變化，但60毫克/公斤可以在最低成本下獲得良好的免疫染色效果。Hypoxyprobe?-1在生理鹽水中的溶解度為116毫克/毫升，因此可以使用非常小的體積來(lái)施用Hypoxyprobe?-1。

注射或攝取后，Hypoxyprobe?-1分布到所有組織，包括大腦，但它只與那些氧濃度低于14微摩爾的細(xì)胞中的含硫蛋白質(zhì)形成加合物——相當(dāng)于在37攝氏度下的部分壓力pO2 = 10毫米汞柱。除了腫瘤，正常的組織如肝臟、腎臟和皮膚也包含在pO2 = 10毫米汞柱或以下的細(xì)胞。這些正常組織會(huì)結(jié)合Hypoxyprobe?-1。

小鼠體內(nèi)Hypoxyprobe?-1的血漿半衰期大約為25分鐘。相比之下，大鼠的血漿半衰期為45分鐘，狗為90分鐘，人類(lèi)為300分鐘。感興趣的小鼠組織可在Hypoxyprobe?-1施用后15至90分鐘收獲。收獲時(shí)組織中的Hypoxyprobe?-1將在組織缺氧時(shí)被結(jié)合。然而，與組織在15至90分鐘實(shí)驗(yàn)中暴露的量相比，殘留的Hypoxyprobe?-1的量非常小，因此由于殘留的Hypoxyprobe?-1引起的任何非特異性結(jié)合是不可檢測(cè)的。

除了動(dòng)物研究，Hypoxyprobe?試劑盒也可用于組織培養(yǎng)中的細(xì)胞通常，細(xì)胞懸浮液在缺氧條件下與100到200微摩爾的Hypoxyprobe?-1一起孵化1到2小時(shí)。細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞旋轉(zhuǎn)收獲，固定并用PAb27HAP及色原性或熒光二抗試劑進(jìn)行免疫染色。