Hypoxyprobe PAb27試劑盒組件詳細(xì)信息：

Hypoxyprobe-1是一種取代的2-硝基咪唑，其化學(xué)名稱和唯一成分是匹莫地唑鹽酸鹽。Hypoxyprobe?-1的分子量為290.8；在水中的溶解度為400毫摩爾，相當(dāng)于116 mg/ml；在0.9%生理鹽水中，其紫外吸收在324 nm，消光系數(shù)為7020。自由堿形式的匹莫地唑分子量為254.3，pKa為8.7，八烷醇-水分配系數(shù)為8.5。有關(guān)Hypoxyprobe?-1的作用機(jī)制、常見(jiàn)問(wèn)題及應(yīng)用，請(qǐng)?jiān)L問(wèn)www.hypoxyprobe.com。Hypoxyprobe?-1在固體形式和水溶液中均具有化學(xué)穩(wěn)定性。例如，固體Hypoxyprobe-1在室溫下陰暗處存放兩年未出現(xiàn)可檢測(cè)的降解（通過(guò)UV和HPLC分析）。在0.9%生理鹽水中的Hypoxyprobe?-1溶液以100克/升的濃度在4℃下存放4.5年，未出現(xiàn)可檢測(cè)的降解（UV和HPLC分析）。匹莫地唑在缺氧細(xì)胞中被還原激活，激活的中間體與蛋白質(zhì)、肽和氨基酸中的巰基（硫醇）形成穩(wěn)定的共價(jià)加成物。抗體試劑PAb27HAP與這些加成物結(jié)合，從而允許通過(guò)免疫化學(xué)方法檢測(cè)。

PAb27HAP是一種高滴度親和純化的兔抗體制劑，可與缺氧細(xì)胞中Hypoxyprobe?-1的蛋白加成物結(jié)合。PAb27HAP中含有疊氮鈉以增強(qiáng)穩(wěn)定性。感興趣的組織可通過(guò)冷凍固定或福爾馬林固定的石蠟包埋切片進(jìn)行免疫組織化學(xué)研究；西方印跡；或在組織解離后進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)。注意：PAb27HAP與缺氧細(xì)胞中的匹莫地唑蛋白、肽和氨基酸加成物結(jié)合，但免疫組織化學(xué)分析的組織處理會(huì)洗去小分子肽和氨基酸加成物，因此免疫組織化學(xué)缺氧檢測(cè)依賴于缺氧組織中匹莫地唑的蛋白加成物。

作為Hypoxyprobe在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦Hypoxyprobe熱銷產(chǎn)品【缺氧探針】PAb27。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

應(yīng)用

免疫化學(xué)檢測(cè)細(xì)胞和組織缺氧，包括免疫熒光、免疫過(guò)氧化物酶法、西方印跡法或流式細(xì)胞術(shù)。當(dāng)Hypoxyprobe? PAb27試劑盒與抗兔二級(jí)試劑結(jié)合使用時(shí)，鼠類組織中的背景非常低（PAb27試劑盒不提供二級(jí)試劑）。

數(shù)量

a. Hypoxyprobe?-1 PAb27試劑盒包含100 mg、200 mg或1000 mg的Hypoxyprobe?-1（吡唑噻唑鹽酸鹽）。小動(dòng)物研究的典型劑量為60 mg/kg體重，人類研究為14 mg/kg體重。

b. 100 mg和200 mg試劑盒各含一個(gè)小瓶，1000 mg試劑盒含兩個(gè)小瓶，均為200微升的高效價(jià)親和純化抗吡唑噻唑兔抗血清，含0.09%疊氮鈉和1% BSA作為穩(wěn)定劑。PAb27HAP的最佳稀釋度由每位研究者自行確定。

不提供

不提供二級(jí)抗兔試劑和標(biāo)準(zhǔn)IHC試劑，如緩沖液、底物色素等。

存儲(chǔ)

a. 將Hypoxyprobe?-1固體在室溫下陰暗處存儲(chǔ)（也可存放在28°C）。

b. 將兔PAb27HAP存儲(chǔ)在2-8°C。請(qǐng)勿冷凍。

測(cè)定說(shuō)明

正常或腫瘤組織缺氧的研究始于靜脈輸注、腹腔注射或口服攝入Hypoxyprobe?-1溶液。典型劑量為小動(dòng)物研究60 mg/kg體重和人類研究14 mg/kg體重。對(duì)于一只25克的小鼠，這相當(dāng)于1.5 mg/只。劑量高達(dá)400 mg/kg在小鼠中使用時(shí)未見(jiàn)明顯毒性或組織缺氧變化，但60 mg/kg在最低成本下提供良好的免疫染色。Hypoxyprobe?-1在生理鹽水中的溶解度為116 mg/ml，因此可以使用非常小的體積來(lái)給藥。注射或攝入后，Hypoxyprobe?-1會(huì)分布到所有組織，包括大腦，但僅在氧濃度低于14微摩爾的細(xì)胞中與含巰基的蛋白質(zhì)形成加成物——相當(dāng)于37℃下的部分壓力pO2 = 10 mmHg。除了腫瘤，正常組織如肝臟、腎臟和皮膚也存在pO2為10 mmHg或更低的細(xì)胞。這些正常組織能夠結(jié)合Hypoxyprobe?-1。

Hypoxyprobe?-1在小鼠體內(nèi)的血漿半衰期約為25分鐘（有關(guān)參考資料，請(qǐng)參見(jiàn)www.hypoxyprobe.com上的FAQ鏈接）。相比之下，老鼠的血漿半衰期為45分鐘，狗為90分鐘，人類為300分鐘。可在Hypoxyprobe?-1給藥后15至90分鐘內(nèi)收集小鼠感興趣的組織。收獲時(shí)組織中存在的Hypoxyprobe?-1在組織缺氧時(shí)會(huì)被結(jié)合。然而，殘余的Hypoxyprobe?-1量相對(duì)于組織在15至90分鐘實(shí)驗(yàn)中暴露的量非常少，因此任何由于殘余Hypoxyprobe?-1引起的非特異性結(jié)合都是不可檢測(cè)的。