FluoTag-X4抗GFP是一種由兩種內(nèi)部開發(fā)的單域抗體（sdAbs）混合而成的試劑，能夠以高親和力和特異性識別GFP及其最常見的衍生物上的兩個不同表位。它可直接且特異性地檢測GFP標(biāo)記的目標(biāo)，無需使用二抗。

一般信息：20世紀(jì)60年代，下村修及其同事在水母Aequorea victoria中發(fā)現(xiàn)了一種發(fā)光蛋白，這為基于熒光的研究鋪平了道路。然而直到20世紀(jì)90年代初，綠色熒光蛋白（GFP）序列才被克隆，并作為熒光標(biāo)記用于異源生物體中。如今，開源數(shù)據(jù)庫中已收錄了800多種熒光蛋白變體，其中FPbase提供了全面的收藏。

FluoTag-X4抗GFP由兩種內(nèi)部開發(fā)的單域抗體（sdAbs）混合而成，每種sdAb結(jié)合GFP上的不同表位。每個sdAb攜帶兩個熒光團(tuán)，使GFP標(biāo)記的目標(biāo)總共帶有四個熒光團(tuán)（FluoTag-X4）。這種設(shè)計(jì)增強(qiáng)了亮度和檢測靈敏度。

FluoTag-X4抗GFP能夠牢固地結(jié)合大多數(shù)來自Aequorea victoria的熒光蛋白。

艾美捷FluoTag-X4抗GFP AbberiorStar460：

貨號：N0304-Ab460-L

克隆號：1H1，1B2

宿主：羊駝

生產(chǎn)來源：大腸桿菌

應(yīng)用：

免疫熒光（ICC）

免疫組織化學(xué)（IHC）

注意：不建議使用該產(chǎn)品檢測Western blot中的蛋白質(zhì)，因?yàn)閟dAb主要識別天然/折疊的蛋白質(zhì)。

稀釋比例：1:250（相當(dāng)于每個sdAb克隆的最終濃度為5 nM）

靶標(biāo)：GFP

特異性：識別GFP（綠色熒光蛋白）及其常見衍生物，如EGFP、mEGFP、Sirius、tSapphire、Cerulean、eCFP、mTurquoise、acGFP、Emerald、超橢圓pHluorin、paGFP、superfolder GFP、eYFP、mVenus和Citrine。

配方：兩種sdAb克隆的混合物，從含有2% BSA（美國來源）的PBS（pH 7.4）中凍干而成。

運(yùn)輸：常溫運(yùn)輸

儲存：

含有凍干試劑的安瓿可在2 - 8℃下保存長達(dá)12個月。

復(fù)溶后，可在-80℃下保存長達(dá)6個月。

工作分裝可在-20℃下保存長達(dá)4周。

注意事項(xiàng)：僅用于體外/研究目的。無毒、無害、無傳染性。

用FluoTag染色的PFA固定的U2OS-NUP96-GFP穩(wěn)定細(xì)胞系的共聚焦圖像與STED圖像-X4抗GFP與abberior STAR RED（左圖，目錄號NO304-AbRED-L）或abberior STAR ORANGE（右圖，目錄號N0304-AbORANGE-L）結(jié)合。FluoTag-X4抗GFPs特異性結(jié)合與NUP96融合的GFP，使NUP96核孔蛋白在核孔復(fù)合物（NPC）中可視化。與abberior獲取的共聚焦顯微鏡圖像相比，STED圖像以更高的分辨率顯示了精細(xì)的結(jié)構(gòu)細(xì)節(jié)。

文獻(xiàn)參考：

Jacobs T, Isasti Sanchez J, Reger S, Luschnig S. Rho/Rok-dependent regulation of actomyosin contractility at tricellular junctions restricts epithelial permeability in Drosophila. Curr Biol. 2025;35(6):1181-1196.e5. doi:10.1016/j.cub.2025.01.043 (IF; fruit fly)

Macarrón-Palacios V, Hubrich J, do Rego Barros Fernandes Lima MA, Metzendorf NG, Kneilmann S, Trapp M, Acuna C, Patrizi A, D’Este E, Kilimann MW. Paralemmin-1 controls the nanoarchitecture of the neuronal submembrane cytoskeleton. Sci Adv. 2025 Mar 7;11(10):eadt3724. doi: 10.1126/sciadv.adt3724. Epub 2025 Mar 7. PMID: 40053592. (ICC/IF, rat hippocampal primary neurons)

Reinders NR, van der Spek SJF, Klaassen RV, et al. Amyloid-β-Driven Synaptic Deficits Are Mediated by Synaptic Removal of GluA3-Containing AMPA Receptors. J Neurosci. 2025;45(9):e0393242024. Published 2025 Feb 26. doi:10.1523/JNEUROSCI.0393-24.2024  (IF; rat hippocampal neurons)