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特色產品FluoTag-Q抗RFP是從一種內部開發(fā)的單域抗體(sdAb)衍生而來,能夠以高親和力和特異性識別最常見紅色熒光蛋白,如mRFP、mCherry、DsRed以及其他DsRed衍生物。
最早被描述的紅色熒光蛋白(FP)之一是來自珊瑚盤菌(Discosoma sp.)的DsRed。DsRed于1999年發(fā)表后不久,經(jīng)過20多個突變,發(fā)現(xiàn)了一個具有多種增強特性的單體版本mRFP1。從這種有前景的單體紅色FP中,人們已經(jīng)描述了幾十種單體變體,其中mCherry是最受歡迎的衍生物之一。如今,在“fpbase”熒光蛋白數(shù)據(jù)庫這個開源數(shù)據(jù)庫中,可以找到800多種各種熒光蛋白的條目,其中包含了目前可用的最新變體。
NanoTag的納米抗體可以特異性且牢固地結合DsRed、RFP、mCherry以及其他家族成員。
FluoTags可以配備單個熒光團以獲得更定量的讀數(shù)(FluoTag-Q),也可以每個單域抗體配備兩個熒光團(FluoTag-X2),此外,NanoTag還開發(fā)了一種混合兩種sdAb的組合,它們可以同時結合目標蛋白,并且每個都帶有兩個熒光團(FluoTag-X4)。
艾美捷FluoTag-Q抗RFP AbberiorStar635P:
貨號:N0401-Ab635P-L
克隆:2B12
宿主:羊駝
生產于:大腸桿菌
應用:免疫熒光
注意:不建議在Western blot中使用該品,因為sdAb主要識別天然/折疊蛋白。
稀釋度:1:1000(相當于最終濃度為5 nM)
特異性:它識別RFP(紅色熒光蛋白)以及其他RFP衍生物,如mOrange、dsRed1、dsRED2、tdTomato、mCherry和mScarlet-i。可能還識別其他尚未測試的衍生物。
配方:
從含有2% BSA(美國產地)的pH 7.4的PBS中凍干單個sdAb克隆。用200 uL去離子水中的50%甘油復溶。如果適用,建議加入0.1%疊氮化鈉作為防腐劑。復溶于200 uL時,單域抗體的濃度為5 uM。
運輸:常溫
儲存:含有凍干蛋白的安瓿瓶可在4°C下儲存6個月。我們建議用含有0.1%疊氮化鈉防腐劑的50%甘油復溶蛋白。通過分裝復溶蛋白,減少凍融循環(huán)次數(shù)。長期儲存可在-80°C下保存長達6個月。工作分裝可在-20°C下保存長達4周。
注意:僅用于體外/研究目的。無毒、無害、無傳染性。

使用FluoTag-Q Atto 488抗RFP sdAb(貨號N0401-At488-L,稀釋度1:500)對表達TOM70-mCherry報告蛋白的PFA固定3T3細胞進行免疫染色(mCherry信號以紅色表示,相應的FluoTag信號以綠色表示,兩個通道的合并以黃色表示)。細胞核通過DAPI染色(藍色)可視化。
文獻參考:
Jacobs T, Isasti Sanchez J, Reger S, Luschnig S. Rho/Rok-dependent regulation of actomyosin contractility at tricellular junctions restricts epithelial permeability in Drosophila. Curr Biol. 2025;35(6):1181-1196.e5. doi:10.1016/j.cub.2025.01.043 (IF; fruit fly)
Macarrón-Palacios V, Hubrich J, do Rego Barros Fernandes Lima MA, Metzendorf NG, Kneilmann S, Trapp M, Acuna C, Patrizi A, D’Este E, Kilimann MW. Paralemmin-1 controls the nanoarchitecture of the neuronal submembrane cytoskeleton. Sci Adv. 2025 Mar 7;11(10):eadt3724. doi: 10.1126/sciadv.adt3724. Epub 2025 Mar 7. PMID: 40053592. (ICC/IF, rat hippocampal primary neurons)
Reinders NR, van der Spek SJF, Klaassen RV, et al. Amyloid-β-Driven Synaptic Deficits Are Mediated by Synaptic Removal of GluA3-Containing AMPA Receptors. J Neurosci. 2025;45(9):e0393242024. Published 2025 Feb 26. doi:10.1523/JNEUROSCI.0393-24.2024 (IF; rat hippocampal neurons)
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