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人表皮生長因子(EGF)蛋白是一種強效的EGF家族生長因子,用于許多人類和小鼠類器官和干細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng),包括腸道和腫瘤類器官培養(yǎng)。EGF也用于上皮細(xì)胞培養(yǎng)。
Qkine人EGF(Qk011)是一種高純度、無動物來源、具有生物活性的6.3 kDa重組蛋白,非常適合用于化學(xué)定義的誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPSC)、胚胎干細(xì)胞(ESC)和類器官培養(yǎng)基。
艾美捷QKine重組人表皮生長因子蛋白(Qk011):
摘要:高純度人表皮生長因子(EGF)蛋白(氨基酸殘基971-1023,Uniprot編號:P01133)
純度>98%,通過SDS-PAGE定量密度測定法檢測
分子量為6.3 kDa
在大腸桿菌中表達
無動物源性(AOF)且無載體蛋白
在英國劍橋的實驗室生產(chǎn)
從乙腈、三氟乙酸中凍干
溶解方法:使用10 mM HCl溶解,濃度大于100 ?g/ml(溶解液隨蛋白免費提供),分裝為單次使用量,可加入載體蛋白,并在-20°C或-80°C下冷凍保存
特色應(yīng)用:
腫瘤類器官培養(yǎng)
進一步的質(zhì)量檢測:
質(zhì)譜檢測:單一物種,具有預(yù)期的質(zhì)量
內(nèi)毒素檢測:內(nèi)毒素含量小于0.005 EU/μg蛋白(低于檢測限)
從原液瓶中的回收率:大于95%

活性檢測:使用Promega血清反應(yīng)元件熒光素酶報告基因檢測法(*)在轉(zhuǎn)染的HEK293T細(xì)胞中測定EGF的活性。細(xì)胞以三份重復(fù)處理,加入EGF的系列稀釋液處理3小時。測量螢火蟲熒光素酶的活性,并與對照組的海腎熒光素酶活性進行標(biāo)準(zhǔn)化處理。半數(shù)有效濃度(EC??)為11.6 pM(72.8 pg/mL)。數(shù)據(jù)來源于Qk011批次號#10。*Promega pGL4.33[luc2P/SRE/Hygro] #E1340
純度檢測:EGF蛋白在非還原條件(NR)下以約12 kDa的單一帶遷移,在還原條件(R)下以9 kDa遷移。純化的重組蛋白(7 ?g)使用15%(w/v)SDS-PAGE在還原條件(+β-巰基乙醇,R)和非還原條件(NR)下進行分離,并用考馬斯亮藍R250染色。數(shù)據(jù)來源于Qk011批次號#011。
文獻參考:
Generation of human iPSC-derived pancreatic organoids to study pancreas development and disease
bioRxiv preprint on 25 October 2024 by Darrigrand, J. et al.
Metabolic rewiring underpins human trophoblast induction.
Preprint on 18 March 2024 by ?ylicz, J., van Nerum, K., Wenzel, A., Argemi Muntadas, L. et al.
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