FGF2-G3（145aa）蛋白是FGF-2（bFGF）的耐熱工程形式。Qk052包含145個氨基酸形式的FGF-2（Qk025），具有Dvorak等人在2018年開發(fā)的9個氨基酸置換。這將蛋白質(zhì)的功能半衰期從<10小時（野生型）增加到>7天（FGF2-G3 145 aa）。

FGF2-G3用于B8培養(yǎng)基（Kuo等人，2019），用于無周末、高同質(zhì)性誘導多能干細胞培養(yǎng)。這種新的145aa耐熱FGF-2蛋白允許直接比較使用FGF-2 145aa（Qk025）用于化學定義的干細胞和類器官培養(yǎng)基以及培養(yǎng)肉培養(yǎng)基開發(fā)的系統(tǒng)中的功效。

高純度16 kDa生物活性FGF2-G3 145 aa蛋白，無動物來源（AOF），無載體蛋白，無His標簽。

艾美捷QKine重組FGF2-G3(145個氨基酸)蛋白(Qk052)：

摘要：高純度熱穩(wěn)定FGF2-G3蛋白，包含145氨基酸形式的FGF-2（Uniprot編號：P09038），并含有九個穩(wěn)定化的氨基酸替換

純度>98%，通過SDS-PAGE定量密度測定法檢測

分子量為16 kDa

在大腸桿菌中表達

無動物源性（AOF）且無載體蛋白

在英國劍橋的實驗室生產(chǎn)

從Tris/NaCl/CyS/甘露醇中凍干

溶解方法：使用純水溶解，濃度大于100 ?g/ml，分裝為單次使用量，可加入載體蛋白，短期保存于-20°C，長期保存于-80°C

特色應用：

誘導多能干細胞、胚胎干細胞和間充質(zhì)干細胞的擴增

細胞擴增

進一步的質(zhì)量檢測：

質(zhì)譜檢測：單一物種，具有預期的質(zhì)量

分析型反相色譜：呈現(xiàn)單一尖銳峰

內(nèi)毒素檢測：內(nèi)毒素含量小于0.005 EU/μg蛋白（低于檢測限）

從原液瓶中的回收率：大于95%

活性檢測：使用Promega血清反應元件熒光素酶報告基因檢測法（*）在轉(zhuǎn)染的HEK293T細胞中測定FGF2-G3（145氨基酸）的活性。半數(shù)有效濃度（EC??）為101 pg/ml（6.2 pM）。細胞以三份重復處理，加入FGF2-G3（145氨基酸）的系列稀釋液處理3小時。測量螢火蟲熒光素酶的活性，并與對照組的海腎熒光素酶活性進行標準化處理。數(shù)據(jù)來源于Qk052批次號#104339。*Promega pGL4.33[luc2P/SRE/Hygro] #E1340

純度檢測：FGF2-G3（145氨基酸）在非還原條件（NR）下以16 kDa的主要條帶遷移。可以看到少量二聚體（高分子質(zhì)量條帶）。在還原條件（R）下，僅可見16 kDa的條帶。未見其他污染蛋白條帶。純化的重組蛋白（3 ?g）使用15%（w/v）SDS-PAGE在還原條件（+β-巰基乙醇，R）和非還原條件（NR）下進行分離，并用考馬斯亮藍R250染色。數(shù)據(jù)來源于Qk052批次號#104339。

文獻參考：

Refined home-brew media for cost-effective, weekend-free hiPSC culture and genetic engineering.

In Open Research Europe 2024 by Truszkowski, L., Bottini, S., Bianchi, S. et al.

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