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人成纖維細(xì)胞生長因子2(FGF-2/bFGF)蛋白(145 aa)是我們誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPSC)和胚胎干細(xì)胞(ESC)維持以及iPSC和間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)增殖和分化的金標(biāo)準(zhǔn)和推薦FGF-2/bbFGF蛋白。
高純度和生物活性的17 kDa FGF-2蛋白,無動物來源(AOF)和無載體蛋白(CF),包含足以進(jìn)行完全生物活性的核心結(jié)構(gòu)區(qū)域(145 aa)。
艾美捷QKine重組人FGF-2(145aa)蛋白(Qk025):
摘要:高純度人FGF-2/堿性成纖維細(xì)胞生長因子(145氨基酸形式,包含殘基144-288,Uniprot編號:P09038)
純度>98%,通過SDS-PAGE定量密度測定法檢測
分子量為17 kDa
在大腸桿菌中表達(dá)
無動物源性(AOF)且無載體蛋白
在英國劍橋的實驗室生產(chǎn)
從Tris/NaCl/CyS/甘露醇中凍干
溶解方法:使用純水溶解,濃度大于100 ?g/ml,分裝為單次使用量,可加入載體蛋白,短期保存于-20°C,長期保存于-80°C
特色應(yīng)用:
誘導(dǎo)多能干細(xì)胞、胚胎干細(xì)胞和間充質(zhì)干細(xì)胞的擴(kuò)增
細(xì)胞擴(kuò)增
進(jìn)一步的質(zhì)量檢測:
質(zhì)譜檢測:單一物種,具有預(yù)期的質(zhì)量
內(nèi)毒素檢測:內(nèi)毒素含量小于0.005 EU/μg蛋白(低于檢測限)
從原液瓶中的回收率:大于95%

活性檢測:使用Promega血清反應(yīng)元件熒光素酶報告基因檢測法(*)在轉(zhuǎn)染的HEK293T細(xì)胞中測定FGF-2的活性。細(xì)胞以三份重復(fù)處理,加入FGF-2的系列稀釋液處理6小時。測量螢火蟲熒光素酶的活性,并與對照組的海腎熒光素酶活性進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理。半數(shù)有效濃度(EC??)為103 pg/ml(6.3 pM)。數(shù)據(jù)來源于Qk025批次號#014。*Promega pGL4.33[luc2P/SRE/Hygro] #E1340
純度檢測:FGF-2在非還原條件(-βME)和還原條件(+βME)下均以17 kDa的主要條帶遷移。35 kDa的高分子質(zhì)量條帶是二聚體,我們在高純度的人FGF-2中總是能看到這種條帶,其存在不影響生物活性。純化的重組蛋白(7 ?g)使用15%(w/v)SDS-PAGE在還原條件(+β-巰基乙醇,R)和非還原條件(NR)下進(jìn)行分離,并用考馬斯亮藍(lán)R250染色。數(shù)據(jù)來源于Qk025批次號#014。
文獻(xiàn)參考:
Hydrostatic Pressure Promotes Chondrogenic Differentiation and Microvesicle Release from Human Embryonic and Bone Marrow Stem Cells
In Biotechnology Journal on 18 December 2021 by Luo, L, et al.
Refined home-brew media for cost-effective, weekend-free hiPSC culture and genetic engineering.
In Open Research Europe 2024 by Truszkowski, L., Bottini, S., Bianchi, S. et al.
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