肝細胞生長因子（HGF）是一種多功能細胞因子，可促進包括間充質(zhì)細胞、內(nèi)皮細胞和上皮細胞在內(nèi)的各種細胞類型的生長和增殖。它參與胚胎發(fā)育、細胞運動、存活、血管生成和組織再生。在細胞培養(yǎng)中，HGF用于促進間充質(zhì)細胞向肝細胞、骨細胞和內(nèi)皮細胞分化。

重組人HFG NK1蛋白是HGF的一種強效天然亞型。這種蛋白質(zhì)不含動物來源、載體蛋白和標簽，以確保其純度，分子量為20kDa，具有出色的批次一致性。它僅以10ng/ml的濃度促進人類誘導多能干細胞向肝細胞樣細胞的有效分化，同時具有高度均勻的肝標志物HNF4α表達。

艾美捷QKine重組人HGF NK1蛋白(Qk013)：

摘要：高純度人HGF NK1蛋白（UniProt編號：P14210）

純度 >98%，通過SDS-PAGE定量密度分析測定

分子量：20 kDa

表達系統(tǒng)：大腸桿菌（E. coli）

無動物源成分（AOF）且無載體蛋白

在英國劍橋的實驗室生產(chǎn)

凍干自乙腈/三氟乙酸

復溶方法：在10 mM HCl中復溶至>100 ?g/ml（提供蛋白且免費），制備單次使用分裝，如需可添加載體蛋白，然后在-20℃或-80℃冷凍保存

推薦應用：

在10 ng/ml濃度下，促進人iPSCs分化為類肝細胞

進一步質(zhì)量檢測：

質(zhì)譜分析：單一物種，具有預期質(zhì)量

分析型反相色譜：單一尖銳峰

內(nèi)毒素：<0.005 EU/?g蛋白（低于檢測水平）

從原瓶回收率：>95%

HGF NK1活性測定：HGF NK1的生物活性與另一家商業(yè)供應商提供的哺乳動物細胞表達的全長HGF相當。通過在轉染的HEK293T細胞中使用Promega血清反應元件熒光素酶報告基因檢測進行比較。細胞用HGF的系列稀釋液處理6小時（每組兩個重復）。通過測量螢火蟲熒光素酶活性并歸一化到對照組的海腎熒光素酶活性來評估。Qk013 HGF（綠色）的EC??為49.6 pM（0.99 ng/ml），哺乳動物細胞表達的HGF（黑色）的EC??為68.4 pM（1.37 ng/ml）。數(shù)據(jù)來自Qk013批次#010。*Promega pGL4.33[luc2P/SRE/Hygro] #E1340

SDS-PAGE分析：在還原（R）條件下，重組HGF NK1蛋白以約21 kDa的主要條帶遷移；在非還原（NR）條件下，遷移為約18 kDa。未見其他污染蛋白條帶。3 ?g純化重組蛋白通過15%（w/v）SDS-PAGE在還原（+β-巰基乙醇，R）和非還原（NR）條件下分離，并用考馬斯亮藍R250染色。數(shù)據(jù)來自Qk013批次#104451。

文獻參考：

mTOR activity paces human blastocyst stage developmental progression

In Cell on 26 September 2024 by Lyer, D. P., Khoei, H. H. et al.

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