Cytoskeleton微管蛋白（羅丹明）：豬腦常見問題分析

豬腦微管蛋白（純度>99%，見分類#T240）已被修改為含有隨機表面賴氨酸共價連接的羅丹明。羅丹明的活化酯用于標記蛋白質。標記化學計量法通過蛋白質和染料濃度的光譜測量來確定（蛋白質結合時的染料消光系數為64，000M）^-1厘米^-1).最終標記化學計量是每個微管蛋白異二聚體1-2種染料。羅丹明標記的微管蛋白可以使用530-550 nm激發和580-600發射的濾光片組進行檢測。羅丹明微管蛋白具有多功能、穩定且易于運輸的形式。它可用于顯微注射或體外聚合。Cytoskeleton， Inc. 還提供 AMCA（貨號 # TL440M）、海利特福陸 488（貨號 # TL488M）、X-羅丹明（貨號 # TL620M）和海利特福陸（貨號#TL670M）標記的相同質量的微管蛋白。   

作為Cytoskeleton全國總代理，艾美捷科技強烈推薦Cytoskeleton熱銷產品微管蛋白（羅丹明）：豬腦。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。  

Cytoskeleton公司目前主要的產品有340余種，其產品主要覆蓋肌動蛋白，微管蛋白，馬達蛋白，小G蛋白，細胞外基質，活細胞成像等相關領域，提供對應的蛋白質，抗體，檢測與分析試劑盒，并且產品線還在不斷的擴大中。

微管蛋白（羅丹明）：豬腦用途：

基于激光的應用 監測活細胞中的微管動力學 

斑點顯微鏡 

熒光微管的形成 

MAP和微管相關運動活動的顯微鏡檢查 

納米技術

用于標記的微管蛋白的蛋白質純度：

通過在4-20%聚丙烯酰胺凝膠上掃描考馬斯藍染色蛋白的密度測定來確定。用于TL590M的蛋白質是>99%純微管蛋白（圖1 A）。標記的蛋白質在SDS凝膠上運行并在紫外光下拍照。任何未摻入的羅丹明染料在染料正面都可見。在染料前沿未檢測到熒光，表明最終產品中不存在游離染料（圖1 B）。

圖 1：羅丹明微管蛋白純度測定。在50-4%SDS-PAGE系統中通過電泳分離20μg未標記的微管蛋白樣品，并用考馬斯藍（A）染色。使用精密紅蛋白測定試劑（貨號#ADV02）進行蛋白質定量。在20-4%SDS-PAGE系統中運行20μg相同的蛋白質樣品，并直接在紫外線照射下拍照（B）。

微管蛋白（羅丹明）：豬腦生物活性：

通過微管蛋白聚合測定法進行評估。為了通過質量控制，G-PEM中5 mg / ml羅丹明標記的微管蛋白溶液加5%甘油必須聚合至>85%。這與相同條件下的未標記微管蛋白相當。  

微管蛋白（羅丹明）：豬腦常見問題 

問題1：TRITC羅丹明標記的微管蛋白（貨號#TL590M）能否用于監測活細胞中的微管蛋白動力學？

答案 1： 是的，細胞骨架的所有熒光標記微管蛋白，包括TRITC羅丹明 - 微管蛋白，都可以微注射到細胞中，以研究活細胞中的微管蛋白定位和動力學。請參閱產品數據表（類別#TL590M）和這些論文上的簡要協議，以獲取有關用熒光標記蛋白微注射細胞的指導（Smilenov等人，1999。在靜止成纖維細胞中揭示的局灶性粘連運動。科學。286, 1172-1174;洛佩茲-盧赫等人，2001年。蛋白激酶 C-δ C2 樣結構域是肌動蛋白的結合位點，可在中性粒細胞中實現肌動蛋白再分布。生化· 357, 39-47;林和丹瑟，2009年。通過熒光散斑顯微鏡（FSM）對F-肌動蛋白動力學進行活細胞成像。J.30， e1325， DOI： 10.3791/1325）。 

問題2：儲存TRITC羅丹明標記的微管蛋白以保持高活性的最佳方法是什么？

答案 2： 凍干微管蛋白產品的推薦儲存條件是4°C，在黑暗中使用干燥劑將濕度保持在<10%的濕度。在這些條件下，蛋白質可穩定保存6個月。凍干蛋白也可以在-70°C干燥儲存，在那里它可以穩定6個月。但是，在-70°C時，管蓋中的橡膠密封件可能會破裂并允許水分進入。因此，我們建議儲存在4°C。 如果儲存在-70°C，如果利用這種儲存條件，則必須在凍干蛋白中加入干燥劑。按指示重構蛋白質后，將G-PEM緩沖液中的濃縮蛋白質等分，在液氮中快速冷凍并儲存在-70°C（穩定6個月）。注意：在液氮中快速冷凍微管蛋白非常重要，因為其他冷凍方法會導致活性顯著降低。通過在室溫水浴中放置1分鐘來快速解凍。避免反復凍融循環。   

Cytoskeleton專注于生物化學和細胞過程研究中的純化蛋白和便捷試劑盒開發與生產。公司提供藥物篩選、信號轉導、蛋白質轉錄后修飾（PTM）、細胞骨架研究相關的系列試劑盒和產品，尤其以細胞骨架相關研究見長，既能滿足于樣品較少的科學研究，也可以用于小規模篩選研究和高通量大規模篩選研究。此外，公司還提供微管蛋白，肌動蛋白，小G蛋白，GAPs，GEFs等現有產品的藥物篩選服務。