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原肌球蛋白/肌鈣蛋白(TT)復(fù)合物已從牛心肌中純化(1)。TT復(fù)合物由五種蛋白質(zhì)原肌球蛋白α:原肌球蛋白β:肌鈣蛋白C:肌鈣蛋白I:肌鈣蛋白T以1:1:1:1:1的化學(xué)計(jì)量比組成,見圖1。該復(fù)合物已被確定在F-肌動蛋白/鈣激活肌球蛋白ATP酶測定中具有生物活性(參見生物活性測定)。該復(fù)合物以白色凍干粉末形式提供。
作為Cytoskeleton全國總代理,艾美捷科技強(qiáng)烈推薦Cytoskeleton熱銷產(chǎn)品原肌球蛋白/原肌球調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物,牛心臟。產(chǎn)品僅用于科研,不可用于臨床診斷。
Cytoskeleton公司目前主要的產(chǎn)品有340余種,其產(chǎn)品主要覆蓋肌動蛋白,微管蛋白,馬達(dá)蛋白,小G蛋白,細(xì)胞外基質(zhì),活細(xì)胞成像等相關(guān)領(lǐng)域,提供對應(yīng)的蛋白質(zhì),抗體,檢測與分析試劑盒,并且產(chǎn)品線還在不斷的擴(kuò)大中。
| 產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 詳情 |
| 原肌球蛋白/原肌球調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物,牛心臟 | CS-TT05 | 查看 |
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| 圖1:肌肉細(xì)絲示意圖 | 圖2:托莫肌苷/肌鈣蛋白TCI復(fù)合物蛋白質(zhì)純度測定 |
原肌球蛋白/原肌球調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物,牛心臟用途:
鈣激活肌球蛋白ATP酶活性與細(xì)絲結(jié)合時(shí)的測量。
鑒定/表征影響 TT 復(fù)合物調(diào)節(jié)和肌球蛋白 ATP 酶活性的蛋白質(zhì)或小分子
鑒定/表征影響肌球蛋白/F-肌動蛋白相互作用的蛋白質(zhì)或小分子
存儲和重構(gòu)
短暫離心以收集管底部的產(chǎn)品。蛋白質(zhì)應(yīng)通過加入冰冷的Milli-Q水重組至3mg / ml。蛋白質(zhì)將位于以下緩沖液中:20 mM PIPES pH 7.0,25 mM KCl,5%(w / v)蔗糖和1%(w / v)葡聚糖。為了保持蛋白質(zhì)的高生物活性,建議將蛋白質(zhì)溶液等分成“實(shí)驗(yàn)大小”的量,在液氮中快速冷凍并儲存在-70°C。 如果儲存在-6°C,該蛋白質(zhì)可穩(wěn)定保存70個(gè)月。 蛋白質(zhì)不應(yīng)暴露于重復(fù)的凍融循環(huán)中。凍干蛋白在4°C干燥(<10%濕度)下穩(wěn)定1年。
純度
蛋白質(zhì)純度通過在4-20%梯度聚丙烯酰胺凝膠上掃描考馬斯藍(lán)染色蛋白質(zhì)的密度測定來確定。TT復(fù)合物的純度為85%(見圖2a)。使用針對每種成分的抗體來驗(yàn)證每種成分是否存在(見圖2b)
原肌球蛋白/原肌球調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物,牛心臟生物活性測定:
通過微管蛋白聚合測定法進(jìn)行評估。為了通過質(zhì)量控制,G-PEM中5 mg / ml羅丹明標(biāo)記的微管蛋白溶液加5%甘油必須聚合至>85%。這與相同條件下的未標(biāo)記微管蛋白相當(dāng)。
文獻(xiàn)引用:
1. J.M Murray. 1982. Hybridization and reconstitution of the thin filament. Methods in Enzymology, 85, p.15-17.
2. M.J. Holroyde et al. 1980. The calcium and magnesium binding sites on cardiac troponin their role in the regulation of myofibrillar adenosine triphosphatase.
Cytoskeleton專注于生物化學(xué)和細(xì)胞過程研究中的純化蛋白和便捷試劑盒開發(fā)與生產(chǎn)。公司提供藥物篩選、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)錄后修飾(PTM)、細(xì)胞骨架研究相關(guān)的系列試劑盒和產(chǎn)品,尤其以細(xì)胞骨架相關(guān)研究見長,既能滿足于樣品較少的科學(xué)研究,也可以用于小規(guī)模篩選研究和高通量大規(guī)模篩選研究。此外,公司還提供微管蛋白,肌動蛋白,小G蛋白,GAPs,GEFs等現(xiàn)有產(chǎn)品的藥物篩選服務(wù)。

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