該試劑盒旨在讓客戶篩選阻斷人類拓撲異構(gòu)酶I（topo I）催化活性的試劑（藥物、天然產(chǎn)物、小分子、合成物）。使用高化學(xué)計量比的topo I:DNA誘導(dǎo)切割復(fù)合物，而不需要使用topo I毒物（喜樹堿），這有助于檢測topo I的催化抑制劑。該測定（見參考文獻1）基于拓撲異構(gòu)酶I以協(xié)同方式作用于DNA模板的發(fā)現(xiàn)，因此它傾向于顯示聚集活性（在鄰近位點，見參考文獻3）；因此，在酶與DNA的高比率下，在沒有喜樹堿及其各種同系物等拓撲異構(gòu)酶I毒素的情況下，相對容易檢測到拓撲異肽酶I的刻痕。

作為TopoGEN在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦TopoGEN熱銷產(chǎn)品人拓撲異構(gòu)酶I高載量試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

人拓撲異構(gòu)酶I高載量試劑盒：

SKU：TG1017

類別：藥物篩選試劑盒

標(biāo)簽：top1, 拓撲異構(gòu)酶1檢測，拓撲異構(gòu)酶1

內(nèi)容：

1. pHOT1 DNA，超螺旋底物。濃度為0.25微克/毫升（100微升TE緩沖液中含有25微克pHOT1 DNA，10毫摩爾Tris-HCl，pH7.5，1毫摩爾EDTA）。

2. 標(biāo)記DNA，松弛型pHOT1；在1倍凝膠加載緩沖液中濃度為0.05微克/微升（50微升，作為標(biāo)記物加載2微升）。

3. 拓撲異構(gòu)酶I反應(yīng)緩沖液（10倍TE；300微升）TE緩沖液（1倍）是10毫摩爾Tris-HCl pH 7.9，1毫摩爾EDTA。

4. 10%十二烷基硫酸鈉（300微升）：用于終止反應(yīng)，使用0.1體積（最終濃度為1%）。

5. 10倍凝膠加載緩沖液（300微升）：含有0.25%的溴酚藍，50%的甘油，反應(yīng)中使用0.1體積。

6. 蛋白酶K（500微升）濃度為0.5毫克/毫升。這是蛋白酶K的10倍儲備液。

7. 提供的純化人類拓撲異構(gòu)酶I濃度為25單位/微升（20微升）。對于目錄TG1017-1，總共包含500單位；對于目錄TG1017-2，總共包含1000單位。

試劑盒將在干冰上運輸。收到后，DNA應(yīng)存放在4°C，緩沖液和酶應(yīng)存放在-20°C。避免質(zhì)粒頻繁凍融循環(huán)，因為這可能導(dǎo)致DNA斷裂和酶失活。

文獻參考：

1.  Akerman, K., Fagenson, A., Cyril, V., Taylor, M., Muller, M, Akerman, M., and Munro O. (2014) Gold(III) macrocycles: nucleotide-specific unconventional catalytic inhibitors of human topoisomerase I. (2014) JACS: 136:5670-5682

https://dl.dropboxusercontent.com/u/6593368/ja412350f_s.pdf

2.  Mao, Y., Mehl, I., and Muller, M.T. (2002)  Nuclear and Nucleolar Localization by the N-terminal Domain of DNA Topoisomerase I.  Proc. Natl  Acad. Sci., USA 99: 1235-1240

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=Proc.+Natl++Acad.+Sci.%2C+USA+99%3A+1235-1240

3.  Mao, Y. , Okada, S., Chang, L. and Muller, M.T.p53 Dependence of Topoisomerase I Recruitment in vivo (2000)  Cancer Research 60: 4538-4543

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=Cancer+Research+60%3A+4538-4543

美國TopoGEN創(chuàng)立于1991年, 專業(yè)提供拓撲異構(gòu)酶試劑和分析試劑盒，他們的藥物篩選試劑盒可用于鑒定拓撲異構(gòu)酶靶向分子，用于癌癥化療和抗菌應(yīng)用。TopoGEN還可提供檢測和定量原核（DNA回旋酶，拓撲異構(gòu)酶IV）和真核拓撲異構(gòu)酶（拓撲異構(gòu)酶I，IIa，IIb，III）的檢測試劑盒，以及全系列的 DNA 底物和 DNA 切割靶標(biāo)、拓撲異構(gòu)酶抑制劑、拓撲異構(gòu)酶抗體和試劑盒補充試劑，DNA修復(fù)的相關(guān)系列產(chǎn)品也是他們產(chǎn)品的特色產(chǎn)品。  

作為TopoGEN在中國的代理商，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的TopoGEN以及客戶訂制化服務(wù)。