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微球菌核酸酶催化DNA和RNA的切割,產(chǎn)生3'-核苷酸。它表現(xiàn)出外切和內(nèi)切-5'-磷酸二酯酶活性。該酶在富含腺苷酸或尿苷酸和脫氧腺苷酸或胸苷酸的位點催化RNA和DNA的優(yōu)先內(nèi)水解。該酶的分子量為16,807道爾頓,并且依賴于鈣。最佳pH值為9.2,但根據(jù)存在的離子鈣濃度而變化。
作為Worthington全國總代理,艾美捷科技強(qiáng)烈推薦Worthington主要產(chǎn)品核酸酶,微球菌。產(chǎn)品僅用于科研,不可用于臨床診斷。
| 產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 詳情 |
| 核酸酶,微球菌 Nuclease, Micrococcal | WBC-LS004798 | 查看 |
穩(wěn)定性/存儲:為了在溶液中長期儲存長達(dá)六個月,將NUCSI稀釋至≥6000 u / ml在水中并等分冷凍。稀釋溶液可以通過添加0.1%白蛋白(Worthington代碼:BSANF)和10%甘油來穩(wěn)定。
測定方案:
方法
基本上是海因斯等人所描述的。(1966)基于核酸酶消化DNA后酸溶性寡核苷酸的釋放。一個單位對應(yīng)于在指定條件下,在 1°C 和 pH 0.260 下,在 37 nm 處光密度的變化為 8.0。
酶
以一毫克/毫升的速度溶解在試劑級水中。在0.001%白蛋白中稀釋至0.002-0.1mg / ml。
程序
移液器放入 5 個編號的試管中的每一個,如下所示:
| 0.1 M 硼酸鈉,pH 8.8 | 0.1毫升 |
| 0.01 米氯化鈣2 | 0.05毫升 |
| 0.25% 脫氧核糖核酸 | 0.1毫升 |
在 37°C 水浴中孵育 6-7 分鐘以達(dá)到溫度平衡。準(zhǔn)備至少四種不同的酶稀釋液,范圍為0.001-0.0002 mg / ml。每隔一段時間,將0.1ml適當(dāng)稀釋液移液到相應(yīng)的管中,并在水浴中更換。在第五個,作為空白,加入0.1毫升0.1%白蛋白。孵育 30 分鐘。通過加入0.5ml 7%高氯酸以定時間隔停止反應(yīng)。將試管放入冰浴中10分鐘,然后加入2.7毫升試劑級水。在臨床離心機(jī)上以最高速度離心15分鐘。提取清除上清液并讀取A260與空白。
注意:為獲得最佳結(jié)果,應(yīng)稀釋樣品,以便最終 A260介于0.2-0.9之間。
試劑
0.1 M 硼酸鈉,pH 8.8
0.01 M 氯化鈣
DNA,2.5毫克/毫升:通過將25毫克沃辛頓小牛胸腺DNA溶解在10毫升0.01米納米氯化中制備。在室溫下靜置過夜,然后慢慢攪拌以達(dá)到溶液效果。
7%高氯酸
0.1%牛血清白蛋白
核酸酶,微球菌相關(guān)產(chǎn)品:
無核酸酶白蛋白 脫氧核糖核酸酶 I (DP/D/DCLS/D2/DPFF/DPRF) 組蛋白 (H, NHL) 溶菌酶 (LY/LYSF) 核酸酶,S1 (中新/中核酸) 核酸、DNA、大腸桿菌、λ/片段、RNA磷酸酶,堿性 磷酸酶 (CAP/BAPF/BAPC/BAPSF/PC)磷酸二酯酶 I (VPH) 磷酸二酯酶 II (SPH) 蛋白酶 K (PROK/PROKS) 逆轉(zhuǎn)錄酶,重組 HIV (RTHIV)核糖核酸酶 A (R/RAF/RASE/RS/RPDF)核糖核酸酶 T1,不含動物源性 (RT1S)
核酸酶,微球菌部分引用文獻(xiàn):
Alexander, M. , Heppel, L. and Hurwitz, J.
The Purification and Properties of Micrococcal Nuclease , J Biol Chem 236 , 3014 , 1961
Andria, G. , Taniuchi, H. and Cone, J.
The Specific Binding of Three Fragments of Staphyloccoccal Nuclease , J Biol Chem 246 , 7421 , 1971
Anfinsen, C. , Rumley, M. and Taniuchi, H.
Structural and Enzymatic Properties of the Extracellular Nuclease of Micrococcus pyrogenes , Acta Chem Scand 17 , 5270 , 1963
酶是Worthington的主要產(chǎn)品線。從技術(shù)上講,Worthington實際上并不制造酶,而是從各種動植物組織和各種微生物來源(如細(xì)菌、真菌和霉菌)中提取酶。根據(jù)該酶在材料中的普遍性選擇特定酶的起始材料。例如,一種功能涉及使肌肉工作的酶將主要存在于肌肉組織中,因此起始材料可能是兔肌肉或豬心;參與發(fā)酵的酶最好在酵母中找到。 Worthington使用的一些動物組織包括牛胰腺、豬腎、牛眼、馬肝、兔肌肉、牛肝、豬心、馬血和小牛腸。各種蛋白質(zhì)也從辣根、紅薯、杏仁和美洲商陸中提取。一些產(chǎn)品是從大腸桿菌、幾種梭狀芽胞桿菌和各種其它細(xì)菌中分離出來的。還使用酵母、蘑菇、全脂牛奶和雞蛋等。
Worthington是一家通過的ISO9001認(rèn)證的家族企業(yè)。主要生產(chǎn)用于生物技術(shù)和生命科學(xué)研究,診斷,生物制藥和生物加工應(yīng)用的高質(zhì)量純化酶,蛋白質(zhì),核酸和試劑盒。作為生命科學(xué)領(lǐng)域知名的酶類供應(yīng)商,以及細(xì)胞分離酶的專家級公司,其核心酶產(chǎn)品包括:膠原蛋白酶,脫氧核糖核酸酶I,彈性蛋白酶,木瓜蛋白酶,核糖核酸酶,胰蛋白酶等。

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