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Rho開關(guān)通過(guò)在GTP綁定的活動(dòng)狀態(tài)和非活動(dòng)狀態(tài)的GDP綁定狀態(tài)之間交替運(yùn)行。了解調(diào)節(jié)GTP酶活化/失活的機(jī)制具有明顯的生物學(xué)意義,并且是深入研究的主題。許多Rho家族效應(yīng)蛋白將特異性識(shí)別蛋白質(zhì)的GTP結(jié)合形式這一事實(shí)已被實(shí)驗(yàn)利用,以開發(fā)一種強(qiáng)大的親和純化測(cè)定,該測(cè)定法監(jiān)測(cè)RhoA蛋白活化。該測(cè)定使用Rho效應(yīng)蛋白R(shí)hotekin的Rho結(jié)合域(RBD)。RBD基序已被證明與GTP結(jié)合形式的RhoA特異性結(jié)合。Rhotekin 的 RBD 區(qū)域?qū)?GTP-RhoA 具有高親和力,并且 Rhotekin 結(jié)合導(dǎo)致 GTP 水解的內(nèi)在和催化速率顯著降低,這一事實(shí)使其成為從細(xì)胞裂解物中親和純化 GTP-RhoA 的理想工具。該試劑盒中提供的Rhotekin-RBD蛋白含有Rhotekin殘基7-89,并且是GST融合蛋白的形式,它允許人們用色彩鮮艷的谷胱甘肽親和珠“下拉”Rhotekin-RBD / Rho-GTP復(fù)合物。因此,該測(cè)定提供了一種簡(jiǎn)單的方法來(lái)定量細(xì)胞中的RhoA活化。活化RhoA的量通過(guò)使用RhoA特異性抗體的蛋白質(zhì)印跡確定。
作為Cytoskeleton全國(guó)總代理,艾美捷科技強(qiáng)烈推薦Cytoskeleton熱銷產(chǎn)品RhoA Pulldown 活化檢測(cè)試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研,不可用于臨床診斷。
Cytoskeleton公司目前主要的產(chǎn)品有340余種,其產(chǎn)品主要覆蓋肌動(dòng)蛋白,微管蛋白,馬達(dá)蛋白,小G蛋白,細(xì)胞外基質(zhì),活細(xì)胞成像等相關(guān)領(lǐng)域,提供對(duì)應(yīng)的蛋白質(zhì),抗體,檢測(cè)與分析試劑盒,并且產(chǎn)品線還在不斷的擴(kuò)大中。
| 產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 詳情 |
| RhoA Pulldown 活化檢測(cè)試劑盒 | BK036 | 查看 |
ARhoA Pulldown 活化檢測(cè)試劑盒內(nèi)容:
該試劑盒包含足夠的材料,可用于 80 次測(cè)定,具體取決于細(xì)胞中 Rho 的活化水平,并包括用于陽(yáng)性和陰性對(duì)照的試劑。包括以下組件:
彩色瓊脂糖珠上的GST標(biāo)記Rhotekin-RBD蛋白(貨號(hào)#RT02)
RhoA 特異性單克隆抗體(貨號(hào) # ARH03)
His標(biāo)記的RhoA蛋白(貨號(hào)#RH01)
GTPγS: (不可水解的 GTP 類似物) (貨號(hào) # BS01)
國(guó)內(nèi)生產(chǎn)總值
細(xì)胞裂解緩沖液
洗滌緩沖液
加載緩沖區(qū)
停止緩沖
蛋白酶抑制劑混合物(貨號(hào) # PIC02)
包含詳細(xì)協(xié)議和廣泛故障排除指南的手冊(cè)
RhoA Pulldown 活化檢測(cè)試劑盒所需設(shè)備(圖1)和示例結(jié)果(圖2):
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| 圖1. BK036 中色彩鮮艷的谷胱甘肽瓊脂糖珠使試劑盒易于使用。 |
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| 圖2.BK036 RhoA活化測(cè)定的結(jié)果。使用試劑盒BK036在蛋白質(zhì)印跡中沉淀并檢測(cè)活化的Rho。第一個(gè)泳道顯示50 ng重組His標(biāo)記的RhoA標(biāo)準(zhǔn)品(Rec. His-RhoA)。以下泳道顯示了從等量的細(xì)胞裂解物中下拉非活性、負(fù)載 GDP 的 RhoA (RhoA-GDP PD) 或活性、負(fù)載 GTPγS 的 RhoA (RhoA-GTP PD)。 |
Cytoskeleton專注于生物化學(xué)和細(xì)胞過(guò)程研究中的純化蛋白和便捷試劑盒開發(fā)與生產(chǎn)。公司提供藥物篩選、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)錄后修飾(PTM)、細(xì)胞骨架研究相關(guān)的系列試劑盒和產(chǎn)品,尤其以細(xì)胞骨架相關(guān)研究見長(zhǎng),既能滿足于樣品較少的科學(xué)研究,也可以用于小規(guī)模篩選研究和高通量大規(guī)模篩選研究。此外,公司還提供微管蛋白,肌動(dòng)蛋白,小G蛋白,GAPs,GEFs等現(xiàn)有產(chǎn)品的藥物篩選服務(wù)。

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