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Rho 開關(guān)通過在活動、GTP 綁定狀態(tài)和非活動、受 GDP 約束狀態(tài)之間交替運行。了解調(diào)節(jié)GTP酶活化/失活的機制具有明顯的生物學(xué)意義,并且是深入研究的主題。許多Rho家族效應(yīng)蛋白將特異性識別蛋白質(zhì)的GTP結(jié)合形式,這一事實已被實驗利用,以開發(fā)一種強大的親和純化測定法,該測定法監(jiān)測Rac和Cdc42蛋白活化。該測定使用Cdc42 / Rac相互作用結(jié)合(CRIB)區(qū)域(也稱為p21結(jié)合域,PBD)的Cdc42 / Rac效應(yīng)蛋白,p21活化激酶1(PAK)。CRIB/PBD蛋白基序已被證明與GTP結(jié)合形式的Rac和/或Cdc42蛋白特異性結(jié)合。PAK的PBD區(qū)域?qū)TP-Rac和GTP-Cdc42都具有高親和力,并且PAK結(jié)合導(dǎo)致Rac和Cdc42的內(nèi)在和催化水解速率顯著降低,使其成為從細(xì)胞裂解物中親和純化GTP-Rac和GTP-Cdc42的理想工具。該試劑盒中提供的PAK-PBD蛋白對應(yīng)于殘基67-150。這包括高度保守的CRIB區(qū)域(aa 74-88)以及與GTP-Rac和GTP-Cdc42的高親和力相互作用所需的序列。PAK-PBD是GST融合蛋白的形式,它允許人們“下拉”PAK-PBD / GTP-RAC(或GTP-Cdc42)復(fù)合物與谷胱甘肽親和珠。因此,該測定提供了一種簡單的方法來定量細(xì)胞中的Rac或Cdc42活化。活化 Rac 的量通過使用 Rac 特異性抗體的蛋白質(zhì)印跡確定。
作為Cytoskeleton全國總代理,艾美捷科技強烈推薦Cytoskeleton熱銷產(chǎn)品Rac1 Pulldown 活化檢測試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研,不可用于臨床診斷。
Cytoskeleton公司目前主要的產(chǎn)品有340余種,其產(chǎn)品主要覆蓋肌動蛋白,微管蛋白,馬達蛋白,小G蛋白,細(xì)胞外基質(zhì),活細(xì)胞成像等相關(guān)領(lǐng)域,提供對應(yīng)的蛋白質(zhì),抗體,檢測與分析試劑盒,并且產(chǎn)品線還在不斷的擴大中。
| 產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 詳情 |
| Rac1 Pulldown 活化檢測試劑盒 | BK035 | 查看 |
Rac1 Pulldown 活化檢測試劑盒用途包括:
分析體內(nèi)Rac1活化水平。
檢測增強 Rac1 活性的化合物和蛋白質(zhì)
檢測抑制 Rac1 活性的化合物和蛋白質(zhì)
該試劑盒包含足夠的材料,可用于 50 次檢測,具體取決于檢測設(shè)置,并包括用于陽性和陰性對照的試劑。包括以下組件:
彩色瓊脂糖珠上的GST標(biāo)記PAK-PBD蛋白(貨號#PAK02)
Rac1 單克隆抗體(貨號 # ARC03)
His標(biāo)記的Rac1蛋白(貨號#RC01)
GTPγS: (不可水解的 GTP 類似物) (貨號 # BS01)
國內(nèi)生產(chǎn)總值
細(xì)胞裂解緩沖液
洗滌緩沖液
加載緩沖區(qū)
停止緩沖
蛋白酶抑制劑混合物(貨號 # PIC02)
包含詳細(xì)協(xié)議和廣泛故障排除指南的手冊
Rac1 Pulldown 活化檢測試劑盒所需設(shè)備&示例結(jié)果:
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| 圖1.BK035 中色彩鮮艷的谷胱甘肽瓊脂糖珠使試劑盒易于使用。 |
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| 圖2.BK035 Rac1活化測定的結(jié)果。使用試劑盒BK1在蛋白質(zhì)印跡中沉淀并檢測活化的Rac035。第一個泳道顯示50 ng重組His標(biāo)記的Rac1標(biāo)準(zhǔn)品(重組His-Rac1)。以下泳道顯示了從等量的細(xì)胞裂解物中下拉非活性、負(fù)載 GDP 的 Rac1 (Rac1-GDP PD) 或活動的、負(fù)載 GTPγS 的 Rac1 (Rac1-GTP PD)。 |
相關(guān)研究:
抗Cdc42單克隆抗體(貨號# ACD03)
抗Rac1單克隆抗體(貨號# ARC03)
抗RhoA單克隆抗體(貨號# ARH03)
Cytoskeleton專注于生物化學(xué)和細(xì)胞過程研究中的純化蛋白和便捷試劑盒開發(fā)與生產(chǎn)。公司提供藥物篩選、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)錄后修飾(PTM)、細(xì)胞骨架研究相關(guān)的系列試劑盒和產(chǎn)品,尤其以細(xì)胞骨架相關(guān)研究見長,既能滿足于樣品較少的科學(xué)研究,也可以用于小規(guī)模篩選研究和高通量大規(guī)模篩選研究。此外,公司還提供微管蛋白,肌動蛋白,小G蛋白,GAPs,GEFs等現(xiàn)有產(chǎn)品的藥物篩選服務(wù)。

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