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一、產品問題

問：你們的試劑盒可以用于診斷目的嗎？ 

答：我們目前所有的檢測試劑盒僅用于研究目的，不能用于診斷。

問：一個試劑盒可以進行多少次測試？ 

答：試劑盒的總測試次數可以在目錄編號中找到。例如，QuantiChrom?肌酐檢測試劑盒（目錄編號DICT-500）足夠在96孔板中進行500次測試。試劑盒的大小指的是標準96孔格式下的總測試次數，包括樣品以及所需的對照品和標準品。

問：檢測是否具有物種特異性？ 

答：BioAssay Systems的大多數生化檢測試劑盒不具有物種特異性，已測試過人類、小鼠、大鼠、牛等樣本。在極少數情況下，不同物種的酶的生化特性可能需要對協(xié)議進行調整，例如改變pH值，才能進行檢測。

問：可以使用哪些類型的樣本？ 

答：通常，我們的檢測可以用于多種類型的樣本，包括生物、食品、飲料和環(huán)境樣本，前提是存在合適的樣本制備方法。通常，感興趣的分析物應為澄清液體或易于提取到澄清液體中，最好是水溶液。

問：在哪里可以找到試劑盒的有效期？ 

答：有效期因具體試劑盒而異。請閱讀檢測協(xié)議或訪問我們的網站（www.bioassaysys.com）并搜索您感興趣的試劑盒。有效期從交付日期開始計算。-yu8fs6b0y4cq6dv4as2t9w8c10ac41dl70c7wf.xn--tlqud5a264gokgt6jr5av7dyfe6578c0h0b./)

問：每次檢測運行是否需要使用標準品或標準曲線？ 

答：是的，強烈建議使用。

問：你們的一些檢測試劑盒既可以用熒光法也可以用比色法。我應該使用哪種方法？ 

答：這取決于您的設備。熒光檢測通常比比色檢測靈敏度高10倍以上。這意味著如果您使用熒光檢測，可以使用更少的樣本，這在樣本量有限的情況下非常理想。

問：我可以將未使用的試劑儲存起來以備將來使用嗎？ 

答：可以，未使用的試劑可以根據檢測協(xié)議儲存。應避免試劑的反復凍融循環(huán)。

問：在哪里可以找到使用你們產品的出版物參考文獻？ 

答：引用文獻可以在我們的網站上找到，網址為http://www.bioassaysys.com/support.php。如果您搜索您感興趣的產品，可以點擊“出版物”鏈接查看引用列表。每種產品的引用文獻都會定期更新。

問：什么是檢測限（LOD）？它與定量限（LOQ）有什么區(qū)別？ 

答：在分析化學中，檢測限（LOD）是指可以與空白值區(qū)分開來的最低物質含量。檢測限通常根據空白值的均值、標準偏差和置信因子來估算。通常，LOD定義為3倍空白值的標準偏差。定量限（LOQ）的確定方法與LOD類似，但定義為10倍空白值的標準偏差。

問：為什么我的讀數與你們的檢測協(xié)議上的數據不同？ 

答：讀數可能會因多種因素而不同：您的儀器（分光光度計、酶標儀）和配件（濾光片或單色器）、板的類型（透明、白色或黑色）及其幾何形狀（圓形孔、方形孔、平底或V形底）以及移液的準確性。因此，強烈建議在每次檢測運行中與樣品一起運行標準品。

二、設備和配件

問：我沒有酶標儀，可以用我們的分光光度計和比色皿代替嗎？ 

答：可以。我們的檢測可以在所有使用比色皿的分光光度計或使用微孔板（如96孔板）的酶標儀上進行。大多數檢測可以根據比色皿、96孔或384孔格式的不同體積進行調整。

問：如何將微孔板格式的測試數量轉換為比色皿格式？ 

答：轉換取決于比色皿的大小和96孔板中檢測的最終體積。例如，對于DICT-500，96孔格式的最終體積為205 μL。對于1 mL比色皿，5個孔相當于1個比色皿。因此，1 mL比色皿的檢測次數為500 ÷ 5 = 100次/試劑盒。或者，如果使用小體積比色皿（例如可容納200 μL體積的比色皿），可以使用與96孔板相同的體積。

問：推薦使用哪種板進行檢測？ 

答：對于比色檢測，使用透明平底板進行光密度（OD）測量。對于熒光檢測，推薦使用黑色板。對于發(fā)光檢測，使用白色不透明板。

問：檢測協(xié)議建議在550-620 nm讀取，但我最接近的濾光片是540 nm。我還能在酶標儀上運行檢測嗎？

答：我們通常建議在檢測按規(guī)格工作范圍內使用波長。我們不建議在給定范圍外測量，因為檢測的靈敏度通常會降低。在某些情況下，在狹窄的波長范圍外進行準確測量是不可能的。

問：我應該使用哪個濾光片來測量發(fā)光？ 

答：使用我們的檢測進行發(fā)光檢測時，不需要使用濾光片。

三、樣本處理

問：我的樣本很渾濁。我還能使用它嗎？ 

答：所有樣本都應該是澄清的，沒有沉淀物或顆粒。如果有顆粒，應通過離心（例如14,000 rpm離心5分鐘）或通過0.45 μm濾器過濾來去除。

問：我今天不能進行檢測。樣本可以冷凍嗎？ 

答：原則上，建議使用新鮮制備的樣本進行檢測。然而，大多數分析物在適當儲存（例如4°C、-20°C、-80°C或液氮中）時是穩(wěn)定的。

問：我應該使用血清樣本還是血漿樣本？ 

答：通常，血清樣本比血漿樣本更受歡迎，因為血清樣本中不含抗凝劑。然而，對于我們的大多數檢測，可以使用血清或血漿。

問：如果數據表中沒有描述，如何為檢測制備細胞和組織樣本？ 

答：樣本制備方法可能因樣本類型和分析物而異。建議查閱相關文獻。以下是一般指南，適用于大多數情況：

組織樣本：從20-100 mg組織開始，加入200-1000 μL冰冷的PBS。通過在冰上使用Dounce勻漿器（10-20次）或在冰水浴中進行超聲處理來實現組織裂解。可以在顯微鏡下檢查組織裂解程度。以14,000 g離心10分鐘。將澄清的上清液轉移到干凈的管中。最好對不同稀釋度的樣本進行預測試。選擇讀數在標準曲線檢測范圍內的稀釋度進行進一步檢測。大多數樣本如果未立即檢測，可以儲存在-80°C。

細胞樣本：將約兩百萬（2 × 10^6）收獲的細胞在冰上懸浮在400 μL PBS中。通過在冰上使用Dounce勻漿器（10-20次）或在冰水浴中進行超聲處理來實現細胞裂解。可以在顯微鏡下檢查細胞裂解程度。以14,000 g離心10分鐘。將澄清的上清液轉移到干凈的管中。最好對不同稀釋度的樣本進行預測試。選擇讀數在標準曲線線性范圍內的稀釋度進行進一步檢測。大多數樣本如果未立即檢測，可以儲存在-80°C。

如果要使用裂解緩沖液，建議先進行檢測以測試裂解緩沖液中的成分是否干擾檢測。這可以通過運行兩個標準曲線來實現：一個在H2O（或數據表要求的緩沖液）中制備，另一個在與樣本相同比例的裂解緩沖液中制備。如果兩個標準曲線相同，則沒有干擾，可以安全使用裂解緩沖液。如果標準曲線有差異，仍然可以使用裂解緩沖液，前提是標準曲線保持線性；然而，用于分析裂解樣本的標準曲線需要在裂解緩沖液中制備。

問：我應該使用多少樣本進行檢測？ 

答：對于未知樣本，應進行預測試以評估最佳稀釋度。制備樣本的系列稀釋，并選擇讀數在檢測范圍內的稀釋度（理想情況下在標準曲線的中間）。然后按此稀釋因子稀釋樣本并重新運行檢測，將結果乘以稀釋因子。

四、訂購、運輸、接收和儲存

問：你們的產品是冰運的嗎？ 

答：有些產品在室溫下運輸，而有些產品則在冰墊或干冰上運輸（這適用于目錄編號以字母“E”開頭的試劑盒，例如ETGA-100）。

問：我們如何從國外購買你們的產品？ 

答：我們建議您聯(lián)系您所在國家或附近的國家的分銷商（http://www.bioassaysys.com/distributors.php）。如果您的國家未列出，您可以直接從我們這里訂購。請在下訂單前聯(lián)系我們（info@bioassaysys.com）。

問：我收到試劑盒后應該做什么？

答：立即打開試劑盒并確定適當的儲存條件。請參考檢測協(xié)議中的“試劑盒內容”下的“儲存條件”。相應地儲存試劑盒組件。

· ELISA比色法實驗顯色，是一個酶催化的實驗。在一定范圍內，環(huán)境溫度越高，酶活性越強，相同孵育時間內，溫度高的，檢測數據高。相同溫度，孵育時間長的，檢測數據高。

· 說明書的標曲只是一個參考用途，展示大概的結果形式。不能直接使用，否則，試劑盒就沒有必要提供標準品了，客戶直接用說明書的曲線來計算了，對吧。【每次實驗，當時都需要做標準曲線，才是最準確的方法】

· 標準曲線是否良好？ 客戶可以繪制相應的擬合曲線（線性，或者曲線形式），R2大于0.9以上是可以接受的，0.99那就是非常好，小數點后面9越多越好。

* 試劑盒規(guī)格的48或者96，通常代表的是反應次數或者孔的數量。而不是樣品數量。（標準品，對照都會參與到反應或者加入到孔中，因此樣品數量肯定會少）

試劑盒做一次實驗，需要客戶做：6個標準品（標準品數量，根據各個說明書里面說的來設置，6個濃度點）+ 一個空白孔（標準含量為0） = 7。通常每個實驗都要做復孔（最少2個復孔，也有做3個復孔的。2個復孔意味著1個東西，需要加到2個孔，統(tǒng)計學需求，算平均值等），這么一來被占用的孔就是7*2=14個孔。96-14=82個孔，只有這82個孔可以給客戶拿去測試他的樣品。如果也算是復孔，那么就是82/2=41個樣品。這是最多可以測試多少樣品。

總結：

【2個復孔】樣品數量= [ 96 - （標準品數量+對照組數量）*2] / 2

【3個復孔】樣品數量= [ 96 - （標準品數量+對照組數量）*3] / 3

#強調#：標準品的數量，陽性對照，陰性對照 的設置，根據說明書來，有些試劑盒是沒有陽性對照的。

以上為一次性將試劑盒用完的樣品數量。如果客戶要做2次實驗，需要繪制2次標曲。對應的，繼續(xù)相減。

1. 主要涉及ATP類的試劑盒，消耗能量ATP，發(fā)光（螢火蟲）。

2. 主要的實驗：熒光素酶分析實驗。

使用儀器：

1. 化學發(fā)光儀，

2. 光度計（Luminometer），

3. 多功能酶標儀（含化學發(fā)光，生物發(fā)光檢測模塊）。

1.試劑盒使用前，通常需要在室溫下平衡30-60min。(溫度對酶催化反應有影響）。

2.洗板時需保證微孔板平放，將洗滌液注滿各孔，但盡量避免漏液溢液，以每孔300 μl為宜；板洗次數一般為3次，要保證洗板的浸泡時間，每次浸泡時間一般為30-60 秒；盡量減少洗液殘留量，推薦每次洗板后進行拍板，并及時更換吸水紙，避免吸水紙的碎屑粘到反應孔內。

比色法：特定波長光穿透樣品，光被吸收的情況。（酶標儀）（分光光度計）

熒光法：特定波長光，激發(fā)染料，發(fā)出其它波長光的情況。（熒光/多功能，酶標儀）