TECHNICAL COLUMN
常見問題BioXCell-常見問題匯總
1.收到BioXCell產(chǎn)品后應(yīng)如何處理?
收到抗體后,在分裝儲存及使用時(shí)需在生物安全柜中進(jìn)行,并使用無菌槍頭、離心管、注射器和緩沖液等,降低污染率。另外,使用前抗體要處于低溫狀態(tài)。
2.如何正確保存BioXCell抗體產(chǎn)品?
請將抗體置于4℃避光儲存。無菌操作。即使分裝后,也不推薦將抗體冷凍保存。避免將抗體稀釋至工作濃度后在4℃條件下儲存超過一天,建議現(xiàn)用現(xiàn)配。
3.萬一沒注意說明書上的儲存要求,將抗體置于室溫儲存了一段時(shí)間,是否還可以繼續(xù)使用?
一般來說,室溫下放置幾個(gè)小時(shí)不會影響抗體的活性,但是放置幾天或者更長時(shí)間則有可能會導(dǎo)致蛋白降解,影響抗體活性,不建議使用。
4.BioXCell抗體的保質(zhì)期有多久?
按說明書要求儲存,BioXCell抗體有效期為1年。
5.BioXCell抗體是凍干粉還是液體形式?
BioXCell抗體均以無菌PBS緩沖液的形式提供。該溶液中不含穩(wěn)定劑、防腐劑、載體蛋白、甘油或任何其他添加劑。抗體的pI值決定了PBS緩沖液的pH值。
6.抗體收到后有漂浮物、絮狀沉淀或聚集物是否正常?應(yīng)如何處理?
存在聚集物或沉淀物屬于正常現(xiàn)象,不會影響抗體的活性。可以在室溫下輕輕搖晃使其溶解,或過濾或離心去除。
7.Bioxcell抗體的濃度是多少?BioXCell不同批次抗體的濃度不同,但一般來說是在4到11mg/mL之間。包裝的離心管上會標(biāo)記抗體的具體濃度。如果需要在訂購之前知道產(chǎn)品的確切濃度,請聯(lián)系艾美捷科技。
8.應(yīng)如何稀釋抗體至工作濃度?
建議使用官網(wǎng)推薦的InVivoPure系列專用稀釋緩沖液來稀釋BioXCell抗體,艾美捷在每個(gè)產(chǎn)品頁面上都列出了每種抗體的推薦InVivo Pure 稀釋緩沖液。在沒有InVivoPure稀釋緩沖液的情況下,可以使用與抗體PBS緩沖液pH相同或相近的的無菌PBS,以避免蛋白聚集。稀釋時(shí),建議使用預(yù)冷緩沖液,并在生物安全柜中操作,使用無菌槍頭、試管、注射器和緩沖液來保持抗體的無菌性。應(yīng)避免將抗體稀釋至工作濃度后在4℃條件下儲存超過一天。
9.BioXCell抗體的氨基酸或DNA序列是什么?
我們的抗體是使用標(biāo)準(zhǔn)雜交瘤技術(shù)生產(chǎn)的,因此抗體的AA或DNA序列通常是未知的。
10.BioXCell抗體的抗原表位是什么?
BioXCell不提供抗原表位信息,請客戶自行參考文獻(xiàn)。
11.BioXCell抗體在體內(nèi)的半衰期是多久?
廠家內(nèi)部并沒有抗體在體內(nèi)的半衰期數(shù)據(jù)。因?yàn)榭贵w的半衰期是高度可變的,并且受到物種、同型、抗原分布、抗原濃度和許多其他因素的影響。建議閱讀感興趣抗體已發(fā)表的相關(guān)文獻(xiàn),參考與您實(shí)驗(yàn)條件及設(shè)計(jì)相近的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),預(yù)估抗體的半衰期。
12.BioXCell抗體是否適用于體內(nèi)注射實(shí)驗(yàn)?
BioXCell所有的產(chǎn)品都是專門為體內(nèi)使用而配制的。所有抗體均在無菌 InVivoPure緩沖液中配制。抗體溶液不含穩(wěn)定劑、防腐劑、載體蛋白、甘油或任何其他添加劑。內(nèi)毒素水平 <2EU/mg ( InVivoMab),這使它們有資格進(jìn)行大多數(shù)體內(nèi)研究。為了滿足最嚴(yán)格的要求,BioXCell還提供內(nèi)毒素水平較低的抗體:<1EU/mg ( InVivoPlus)。
13.BioXCell抗體是否適合體外應(yīng)用?
可用于體外應(yīng)用,例如細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)和診斷測定,包括蛋白質(zhì)印跡、免疫沉淀、IHC、流式細(xì)胞術(shù)等。請參閱各個(gè)產(chǎn)品頁面以獲取已批準(zhǔn)的列表每種抗體的應(yīng)用。另外所有BioXCell抗體都是未偶聯(lián)的,因此流式細(xì)胞術(shù)和免疫熒光等應(yīng)用需要使用熒光染料偶聯(lián)的二抗。
14.小老鼠體內(nèi)注射實(shí)驗(yàn),應(yīng)該多久注射一次?每次注射多少抗體??
任何給定實(shí)驗(yàn)和抗體的最佳給藥劑量和頻率可能會因?qū)嶒?yàn)系統(tǒng)(即小鼠品系、疾病模型等)、實(shí)驗(yàn)持續(xù)時(shí)間、靶組織、抗原濃度和許多其他因素而有很大差異細(xì)節(jié)。出于這個(gè)原因,最佳劑量最好通過閱讀與您感興趣的抗體相關(guān)的產(chǎn)品參考文獻(xiàn)來確定,以查找與您的實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)類似的實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)中的已發(fā)布數(shù)據(jù)。以此現(xiàn)有研究為起點(diǎn),您可以通過實(shí)驗(yàn)優(yōu)化給藥劑量和頻率。BioXCell的每種產(chǎn)品在產(chǎn)品網(wǎng)頁上都有最新的參考列表。
15.體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中同種型對照組是否重要?如何選擇合適的同種型對照?
考慮同型對照處理組需要生成可靠的數(shù)據(jù),因?yàn)樗试S研究人員準(zhǔn)確地區(qū)分以抗原特異性方式從初級抗體結(jié)合觀察到的結(jié)果和從非抗原特異性結(jié)合或抗體注射的其他非特異性作用觀察到的結(jié)果。同型對照抗體必須與一抗的宿主物種、同種型和亞類相匹配。為了方便我們的客戶,我們在每個(gè)產(chǎn)品頁面上列出了每種抗體的推薦的同型對照貨號。
16.如果覺得自己的抗體效果不佳,怎么辦?
如果您懷疑您的抗體沒有發(fā)揮最佳功能,請務(wù)必認(rèn)真填寫并提交技術(shù)服務(wù)申請表。您填寫的實(shí)驗(yàn)信息越充分,BioXCell技術(shù)團(tuán)隊(duì)的建議才更可靠。
17.如何申請和查詢產(chǎn)品的COA?
官網(wǎng)自助鏈接:https://apps.bioxcell.com/certificate-of-analysis
18.應(yīng)該如何購買BioXCell抗體?
艾美捷科技是BioXCell中國區(qū)代理,歡迎咨詢購買:400-6800-868
19.Bioxcell InVivoMab和InVivoPlus兩種級別的抗體有什么區(qū)別?
| InVivoMAb | InVivoPlus | |
| 純度 | >95% | >95% |
| 蛋白質(zhì)完整性(通過SDS PAGE驗(yàn)證) | √ | √ |
| 內(nèi)毒素含量 | <2EU/mg | <1EU/mg |
| WB, FC or ELISA驗(yàn)證 | ||
| 蛋白質(zhì)聚集體≤5% | √ | |
| 鼠病原體檢測 | √ | |
| 不含疊氮化物和載體蛋白 | √ | √ |
| 大量現(xiàn)貨供應(yīng) | √ | √ |
| 體內(nèi)研究 | √ | √ |
| 貨號開頭 | BE開頭 | BP開頭 |
| 歸納 | 滿足基礎(chǔ)科研 | 臨床前研發(fā)/升級款 |
Abnova抗體應(yīng)用類型:
WB Western Blot
WB-Ce Western Blot (Cell lysate) 細(xì)胞裂解液(天然細(xì)胞,內(nèi)源)
WB-Re Western Blot (Recombinant protein) 重組蛋白(外源轉(zhuǎn)染質(zhì)粒到細(xì)菌,表達(dá)蛋白)
WB-Ti Western Blot (Tissue lysate) 組織裂解液(天然組織,內(nèi)源)
WB-Tr Western Blot (Transfected lysate) 轉(zhuǎn)染裂解液(外源轉(zhuǎn)染質(zhì)粒到細(xì)胞,表達(dá)蛋白)

實(shí)驗(yàn)類型選擇優(yōu)先(涵蓋范圍):
WB > WB-Ti > WB-Ce
WB-Re 和 WB-Tr,不推薦。如果客戶購買,建議跟客戶講一下,非官網(wǎng)承諾應(yīng)用類型,廠家不受理投訴。
Abnova抗體可以做多少張玻片(IF/IHC)?
【以1:500稀釋比,30ul的小包裝抗體為例】
1:500稀釋 = 500ul 抗體稀釋液中加入1ul原始抗體 ==》30ul原始抗體可以配置成為30ul * 500 = 15ml的稀釋后的抗體【工作液】,一張玻片一般用50ul的抗體工作液 = 15 ml / 50ul = 300張
如果是1:200稀釋的話,= 120張
作業(yè):WB實(shí)驗(yàn),一條膜通常需要1ml的工作液(1:1000稀釋的話,需要加入1ul原始抗體溶液),實(shí)驗(yàn)次數(shù)自算?
PS: 1 ml = 1000 ul
ICC,IF,IHC區(qū)別





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