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細胞骨架是細胞主要的機械結(jié)構(gòu),包含不同的蛋白生物聚合物。它是一個復雜且動態(tài)的網(wǎng)絡結(jié)構(gòu)。在真核生物中,它由三個主要成分組成,肌動蛋白微絲,中間纖維及微管。這三種纖維都可以根據(jù)細胞的要求,通過聚合和分解來快速生長和收縮(Fletcher and Mullins, 2010)。
微管由α及β微管蛋白以二聚體形式組成。它們聚合形成微管蛋白原纖維,最終結(jié)合,構(gòu)成中空微管。微管是細胞骨架的重要組成部分,它支撐了真核生物細胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)。
此外,它們也參與了細胞分裂,胞內(nèi)轉(zhuǎn)運和細胞運動的過程(Goodson and Jonasson, 2018)。
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圖1:使用抗α-微管蛋白 (cat. no. 302 008, 稀釋比例 1 : 500; 紅色) 和豚鼠抗巨蛋白(cat. no. 263 005, 稀釋比例 1 : 500; 綠色)抗體,對由甲醇固定的小鼠纖維母細胞進行間接免疫染色。細胞核由DAPI染色可見為藍色。 | 圖2:使用鼠抗α-微管蛋白 (cat. no. 302 211, 稀釋比例 1 : 1000; AP-紅色)抗體,對由PFA固定,石蠟包埋的小鼠眼切片進行間接免疫染色。細胞核由蘇木精染色可見為藍色。 |
作為管家基因,微管蛋白在所有細胞類型中都有大量表達。因此在蛋白免疫印跡實驗中,它們經(jīng)常被用作內(nèi)參對照。它們也通常用標記蛋白來可視化免疫細胞化學(ICC) (圖 1) 和免疫組織化學(IHC / IHC-P) (圖 2)中的微管網(wǎng)絡。
針對α-微管蛋白, Synaptic Systems提供廣泛種類的單克隆,多克隆和重組抗體。并且不區(qū)分不同微管蛋白的翻譯后修飾。
使用我們的α-微管蛋白抗體,并選擇結(jié)合其它抗體,將在多種實驗中給你Z大的自由。
α微管蛋白產(chǎn)品:
| 貨號 | 產(chǎn)品描述 | 應用類型 | 規(guī)格 |
| 302 008 | α-Tubulin, rabbit, monoclonal, recombinant IgG | WB ICC IHC | 100 ug |
| 302 203 | α-Tubulin, rabbit, polyclonal, affinity purified | WB ICC IHC ELISA | 100 ug |
| 302 204 | α-Tubulin , Guinea pig, polyclonal, antiserum | WB ICC IHC | 100 ug |
| 302 206 | α-Tubulin, chicken, polyclonal, affinity purified | WB ICC IHC IHC-P | 50 ug |
| 302 211 | α-Tubulin, mouse, monoclonal, recombinant IgG | WB IP ICC IHC IHC-P ELISA | 100 ug |
| 302 211C3 | α-Tubulin, mouse, monoclonal, purified IgG, Oyster 550 | ICC | 50 ug |
| 302 217 | α-Tubulin, rat, monoclonal, purified IgG | WB ICC IHC | 100 ug |
| 302 308 | α-Tubulin, Guinea pig, monoclonal, recombinant IgG | WB ICC IHC IHC-P | 50 ug |
| 302 411 | α-Tubulin, mouse, monoclonal, purified IgM K.O. | WB ICC IHC | 100 ug |
微管蛋白的翻譯后修飾
通常,微管的半衰期很短,僅為5-10分鐘。然而,一些翻譯后修飾微管蛋白變體的半衰期可以持續(xù)數(shù)小時。總之,翻譯后修飾可調(diào)節(jié)微管蛋白的聚合和解聚,在細胞骨架的動態(tài)微調(diào)中扮演著重要的角色(Infante, 2000)。
去酪氨酸化 /酪氨酸化:α-微管蛋白的C端絡氨酸是由基因編碼的,但是可以被血管抑制蛋白翻譯后移除。從而使新創(chuàng)C端的一個自由谷氨酸暴露(Aillaud et al., 2017)。這個微管蛋白變體經(jīng)常被當作Glu-微管蛋白,可在例如神經(jīng)元或腎小球中找到(圖 3)。這種去酪氨酸化反應可被微管絡氨酸連接酶(TTL)逆轉(zhuǎn)。酪氨酸化的α-微管蛋白被稱為Tyr-微管蛋白,對新生小鼠胚胎的存活至關重要(Erck et al. 2005)。
多谷氨酰化: 數(shù)個谷氨酸(通常為 4-6個)被添加在位于α和β微管蛋白c端的谷氨酸殘基中(Edde et al., 1990; Wehland et al., 1992)。這種多谷氨酰化的微管蛋白發(fā)生在例如神經(jīng)元細胞和有絲分裂紡錘體中。
Synaptic Systems 為Glu-微管蛋白,多谷氨酰化微管蛋白及Tyr-微管蛋白提供成熟優(yōu)質(zhì)的單克隆抗體。
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| 圖 3a: 使用大鼠抗Tyr-α微管蛋白抗體對經(jīng)PFA固定,石蠟包埋的小鼠腎切片進行間接免疫染色。(左, cat. no. 302 117, 稀釋比例 1 : 1000; DAB)。 | 圖 3b: 鼠抗 Glu-α微管蛋白抗體(cat. no. 302 011, 稀釋比例 1 : 1000; DAB)。細胞核被蘇木精染色可見為藍色。 |
Delta2: α-微管蛋白最后兩個殘基的不可逆去除導致delta2或者D2-微管蛋白的形成。這種高度穩(wěn)定的α -微管蛋白變體局限于神經(jīng)元細胞,所以通常用來標記神經(jīng)元細胞骨架的標記物 (Paturle-Lafanechère et al., 1994) (圖 4)。

圖4: 使用抗Δ2-微管蛋白 (cat. no. 302 213, 稀釋比例 1 : 500; 紅色)抗體,小鼠抗突觸結(jié)合蛋白1 (cat. no. 105 011, 稀釋比例 1 : 500; 藍色) 和 豚鼠抗GFAP (cat. no. 173 004, 稀釋比例 1 : 500; 綠色)抗體,對大鼠海馬體神經(jīng)元細胞和星形膠質(zhì)細胞進行間接免疫染色。
其它的微管蛋白
β3-管蛋白
第三類β-管蛋白也被稱為TuJ1,在中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)(CNS和PNS)中含量豐富,在胎兒和出生后的發(fā)育過程中表達突出(Katsetos et al.,2003。據(jù)報道,它也在某些非神經(jīng)元來源的腫瘤中表達(Dráberovà et al.,1998)(圖5)

圖 5: 使用小鼠抗β3-微管蛋白 (cat. no. 302 311, 稀釋比例 1 : 5000, 紅色)抗體,對經(jīng)PFA固定的小鼠大腦皮層切片進行間接免疫染色。細胞核由DAPI染色可見為藍色
其它微管蛋白產(chǎn)品:
| 貨號 | 產(chǎn)品描述 | 應用類型 | 規(guī)格 |
| 302 302 | β3-Tubulin, rabbit, polyclonal, antiserum | WB IP ICC IHC IHC-P | 200 ug |
| 302 304 | β3-Tubulin, Guinea pig, polyclonal, antiserum | WB IP ICC IHC IHC-P | 100 ug |
| 302 306 | β3-Tubulin, chicken, polyclonal, IgY fraction | WB ICC IHC IHC-P | 200 ug |
| 302 311 | β3-Tubulin, mouse, monoclonal, purified IgG | WB IP ICC IHC IHC-P | 100 ug |
| 302 213 | Δ2-tubulin, rabbit, polyclonal, affinity purified | WB ICC IHC IHC-P | 50 ug |
| 302 011 | Glu-Tubulin, mouse, monoclonal, purified IgG | WB ICC IHC IHC-P ELISA | 100 ug |
| 302 117 | Tyr-α-tubulin, rat, monoclonal, purified IgG K.O. | WB IP ICC IHC IHC-P | 100 ug |
參考文獻:
Aillaud et al., 2017: Vasohibins/SVBP are tubulin carboxypeptidases (TCPs) that regulate neuron differentiation. PMID: 29146868
Dráberovà et al., 1998: Expression of class III beta-tubulin in normal and neoplastic human tissues. PMID: 9541471
Edde et al., 1990: Posttranslational glutamylation of alpha-tubulin. PMID: 1967194
Erck et al., 2005: A vital role of tubulin-tyrosine-ligase for neuronal organization. PMID: 15899979
Fletcher and Mullins, 2010: Cell mechanics and the cytoskeleton. PMID: 20110992
Goodson and Jonasson, 2018: Microtubules and Microtubule-Associated Proteins. PMID: 29858272
Infante, 2000: Detyrosinated (Glu) microtubules are stabilized by an ATP-sensitive plus-end cap. PMID: 11058078
Katsetos et al. 2003: Class III beta-tubulin in human development and cancer. PMID: 12740870
Paturle-Lafanechère et al., 1994: Accumulation of delta 2-tubulin, a major tubulin variant that cannot be tyrosinated, in neuronal tissues and in stable microtubule assemblies. PMID: 7962195
Wehland et al., 1992: Class II tubulin, the major brain β tubulin isotype is polyglutamylated on glutamic acid residue. PMID: 1379548
Synaptic Systems(SySy)品牌成立于德國,專注于研發(fā)和生產(chǎn)針對突觸和神經(jīng)科學相關抗體,以及用于細胞生物學、組織病理學和高分辨率顯微鏡的各種抗體,除此之外,還推出與SySy抗體配套使用的試劑盒、試劑等產(chǎn)品組合,全方面滿足客戶的各種需求。抗體產(chǎn)品線主要有:突觸活性區(qū)域相關抗體、突觸后蛋白相關抗體、RNA修飾如m6A抗體、突觸粘附蛋白抗體、SNARE相關抗體、Alzheimer's相關抗體、細胞骨架、離子通道相關抗體等。該品牌產(chǎn)品專業(yè)且質(zhì)量好,在國內(nèi)外備受好評。作為SySy在中國的區(qū)域總代理,艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的SySy產(chǎn)品。
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