兔C-反應蛋白CRP檢測試劑盒是一種高度敏感的雙位點酶聯(lián)用于測定兔血清和血漿樣本中CRP的免疫測定法（ELISA）。

作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產品兔C-反應蛋白ELISA。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

兔C-反應蛋白ELISA檢測原理：

雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）的原理如圖1所示。在這種測定中，樣品中的C反應蛋白（CRP）與已吸附在聚苯乙烯微孔板表面的抗CRP抗體反應。通過洗滌去除未結合的蛋白質后，加入與辣根過氧化物酶（HRP）偶聯(lián)的抗CRP抗體。這些酶標記的抗體與之前結合的CRP形成復合物。經過另一次洗滌步驟后，通過添加顯色底物3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）來測定結合的酶。結合的酶量與樣品中測試的CRP濃度直接相關；因此，450納米處的吸光度是測試樣品中CRP濃度的量度。測試樣品中的CRP量可以從標準曲線中插值得出，并根據樣品稀釋進行校正。

所需但未提供的物料：

- 精密移液器（2微升至1000微升），用于制備和分發(fā)稀釋液

- 試管

- 微孔板洗滌器/抽吸器

- 蒸餾水或去離子水

- 微孔板讀取器

- 制備試劑和緩沖溶液所需的各種玻璃器皿

- 計時器

- 用于樣品處理的離心機

- 抗凝劑（用于血漿樣品）

樣品收集和處理：

所有血液成分和生物材料應被視為潛在危險。處理和處置時遵循通用預防措施。如果血液樣品出現凝固、嚴重溶血、脂血或樣品完整性有問題，請做好記錄，并謹慎解釋結果。下面列出的樣品收集和儲存條件僅供參考。樣品穩(wěn)定性尚未評估。

- 血清樣品 - 應通過靜脈穿刺采集血液。血液凝固后，通過離心分離血清。移除血清并立即檢測或分裝后儲存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復凍融循環(huán)。

- 血漿樣品 - 應將血液采集到含有抗凝劑的容器中，然后進行離心。立即檢測或分裝后儲存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復凍融循環(huán)。

- 已知干擾物質 - 濃度高于0.1%的疊氮化物和硫柳汞會抑制酶反應。

樣品稀釋：

測定要求每個測試樣品在使用前進行稀釋。每次進行測定時，所有樣品應以雙份進行測定。推薦的稀釋比例僅供參考。稀釋應基于未知樣品的預期濃度，以使稀釋后的樣品落在標準曲線的動態(tài)范圍內。如果不確定樣品水平，在運行整個板之前，對一個或兩個代表性樣品進行系列稀釋是非常推薦的。

血清和血漿樣品：建議的起始稀釋比例為1:400。要制備1:400的樣品稀釋液，將2微升的樣品轉移到798微升的1X稀釋液中。這會產生1:400的稀釋液。徹底混合。

結果計算：

1. 從所有孔中減去平均背景值（標準零的平均吸光度讀數）。

2. 對每個標準的平均重復讀數進行平均，并使用結果構建標準曲線。通過使用能夠生成四參數邏輯曲線擬合的計算機軟件來減少數據來構建標準曲線。也可以使用二階多項式（二次）或其他曲線擬合；然而，它們將是對數據的不太精確的擬合。

3. 從標準曲線中插值得到測試樣品值。校正血清稀釋因子，以得到原始樣品中的CRP濃度。

附錄A - 參考血清信息：

本試劑盒包含一瓶參考血清。請參閱隨附的產品概況表以獲取批特定信息。請注意以下幾點：

1. 收到參考血清后應立即冷凍。如果儲存得當，直到過期日期前都是穩(wěn)定的。

2. 參考血清應適當稀釋，以適應標準曲線范圍。請參閱協(xié)議中的“樣品稀釋”部分以獲取說明。

3. 在移液樣品（程序部分）時，也應以雙份移液參考血清。

ALPCO產品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應激、細胞因子與信號轉導、糖尿病和肥胖癥、內分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領域見長。

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